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荧光定量PCR法在人类宫颈癌RNA干扰中的应用被引量：1: 2007年; 研究荧光定量PCR法在RNA干扰(RNA i)技术抑制宫颈癌Caski细胞人乳头瘤病毒16型E6基因(HPV16 E6)的应用情况,并与传统使用的灰度值分析法进行比较。构建shRNA重组质粒干扰载体转染至Caski细胞中。通过荧光定量PCR法和灰度值分析法检测干扰后细胞HPV16 E6基因的mRNA及蛋白质表达水平。实验表明HPV16 E6基因mRNA及蛋白质的表达量都有明显降低,与阴性对照空白质粒组相比有显著差异(P<0.01);RNA i对宫颈癌Caski细胞中HPV16 E6基因的表达具有较高的抑制率;荧光定量PCR法较之传统的灰度值分析法更为准确。; 曾索丁显平倪虹曾梅李小波; 关键词：RNA干扰人类乳头瘤病毒宫颈癌荧光定量PCR

靶向Survivin的shRNA表达载体的构建和对宫颈癌Caski细胞Survivin表达的影响: 2008年; [目的]探讨RNA干扰对Caski细胞Survivin基因表达的抑制作用。[方法]构建针对Survivin基因编码区和非编码区的两对短发夹状RNA真核表达载体,分别命名为pGenSur1、pGenSur2。以脂质体介导的转染方法将其导入宫颈癌Caski细胞株,采用荧光定量RT-PCR和western blot检测转染后24、48、72h Survivin基因mRNA和蛋白质表达水平。[结果]成功构建Survivin基因shRNA真核表达载体pGenSur1、pGenSur2。与野生型Caski细胞、阴性对照相比,Caski/pGenSur1细胞和Caski/pGenSur2细胞中SurvivinmRNA和蛋白表达随着干扰时间增加有显著性减少(P﹤0.01),72h到达最低值,mRNA抑制效率分别达到63.3%±1.44%和79.7%±2.12%,蛋白抑制效率达到64.2%±2.02%和79.4%±1.77%。[结论]靶向Survivin的shRNA质粒载体均可显著抑制宫颈癌Caski细胞内源Survivin的mRNA和蛋白的表达(P﹤0.01)。; 倪虹丁显平曾索; 关键词：宫颈癌 SURVIVIN CASKI

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曾索