张霄
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：泰山医学院聊城市人民医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 感染突变Cav-1基因的人胚肾293T细胞eNOS蛋白、NO表达变化被引量：2
- 2014年
- 目的观察感染突变窖蛋白-1(Cav-1)基因的人胚肾293T细胞中一氧化氮合酶(eNOS)蛋白及一氧化氮(NO)表达变化。方法采用PCR法扩增突变型Cav-1(F92A-Cav-1)基因,插入慢病毒载体pLVX-mCMV-mCherry。重组质粒转化,对阳性克隆进行测序和酶切鉴定,F92A-Cav-1成功克隆于慢病毒载体,将构建成功的重组质粒pLVX-F92A-Cav-1-mCMV-mCherry命名为LV-F92A-Cav-1;将293T细胞随机分为正常对照组、阴性对照组(空载体组)和LV-F92A-Cav-1组。正常对照组不转染,空载体组转染空载体,LV-F92A-Cav-1组转染LV-F92A-Cav-1。分别采用免疫荧光及NO荧光探针观察感染LV-F92A-Cav-1质粒的293T细胞中eNOS蛋白及NO表达,CCK-8法观察感染LV-F92A-Cav-1的293T细胞活性。结果与正常对照组及空载体组相比,LV-F92A-Cav-1组eNOS蛋白表达及NO生成增多;正常对照组、空载体组、F92A-Cav-1组293T细胞OD值分别为2.233、2.184、2.231,三组间两两比较,P均>0.05。结论感染突变Cav-1基因的人胚肾293T细胞中eNOS蛋白、NO表达增多。
- 陈海英汪磊王兰花夏鹏张霄薛玉增陈双峰王乐信
- 关键词：窖蛋白-1内皮型一氧化氮合酶一氧化氮慢病毒载体CAVEOLIN-1
