王兰花
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：聊城市人民医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 感染突变Cav-1基因的人胚肾293T细胞eNOS蛋白、NO表达变化被引量：2
- 2014年
- 目的观察感染突变窖蛋白-1(Cav-1)基因的人胚肾293T细胞中一氧化氮合酶(eNOS)蛋白及一氧化氮(NO)表达变化。方法采用PCR法扩增突变型Cav-1(F92A-Cav-1)基因,插入慢病毒载体pLVX-mCMV-mCherry。重组质粒转化,对阳性克隆进行测序和酶切鉴定,F92A-Cav-1成功克隆于慢病毒载体,将构建成功的重组质粒pLVX-F92A-Cav-1-mCMV-mCherry命名为LV-F92A-Cav-1;将293T细胞随机分为正常对照组、阴性对照组(空载体组)和LV-F92A-Cav-1组。正常对照组不转染,空载体组转染空载体,LV-F92A-Cav-1组转染LV-F92A-Cav-1。分别采用免疫荧光及NO荧光探针观察感染LV-F92A-Cav-1质粒的293T细胞中eNOS蛋白及NO表达,CCK-8法观察感染LV-F92A-Cav-1的293T细胞活性。结果与正常对照组及空载体组相比,LV-F92A-Cav-1组eNOS蛋白表达及NO生成增多;正常对照组、空载体组、F92A-Cav-1组293T细胞OD值分别为2.233、2.184、2.231,三组间两两比较,P均>0.05。结论感染突变Cav-1基因的人胚肾293T细胞中eNOS蛋白、NO表达增多。
- 陈海英汪磊王兰花夏鹏张霄薛玉增陈双峰王乐信
- 关键词：窖蛋白-1内皮型一氧化氮合酶一氧化氮慢病毒载体CAVEOLIN-1
- rBMSCs/F92A-Cav1对PAH大鼠的治疗作用及其机制
- 2017年
- 目的探讨过表达F92A-丙氨酸替代窖蛋白-1(Cav1)的大鼠骨髓间充质干细胞(r BMSCs/F92A-Cav1)对肺动脉高压(PAH)大鼠的治疗作用及其机制。方法予成年雄性Wistar大鼠腹腔注射1%野百合碱(MCT,60 mg/kg)建立PAH模型,建模后2周随机分为3组(10只/组):PAH组(仅给予MCT)、Cav1组(转导LV-Cav1的r BMSCs)、F92A-Cav1组(转导LV-F92A-Cav1的r BMSCs),同时设置正常组。基因修饰的r BMSCs(1×106/m L)于尾静脉移植入各组PAH大鼠,移植后3周,采用Image-Pro Plus 6 software评估肺动脉中膜厚度指数(MT%)、右心肥大指数(RVHI),采用Griess法检测血清NO水平,采用Western blotting法检测肺组织PI3K、AKT蛋白的相对表达量。结果PAH组MT%、RVHI及肺组织PI3K、AKT蛋白相对表达量均较正常组升高,但血清NO水平降低(P<0.05或<0.01);与PAH组相比,Cav1组、F92A-Cav1组中MT%、RVHI及肺组织PI3K、AKT蛋白相对表达量均降低,而血清NO水平增加,以F92A-Cav1组为著(P<0.05或<0.01)。结论 r BMSCs/F92A-Cav1可通过解除野生型Cav1对e NOS的抑制,促进NO释放,从而抑制PAH大鼠肺组织PI3K/AKT通路激活,进而发挥对PAH大鼠的治疗作用。
- 徐聪夏鹏杨红莉唐文强潘丽王兰花陈双峰张颖新王乐信陈海英
- 关键词：肺动脉高压窖蛋白-1骨髓间充质干细胞
