马彦军
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：汕头大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞的培养方法初探被引量：3
- 2011年
- 目的:建立大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞组织贴块法培养模型。方法:分离大鼠胸主动脉外膜,切成1 mm×1 mm×1 mm大小组织块,均匀贴于细胞培养瓶壁上,加入含20%血清的细胞培养液DMEM,置入细胞培养箱于37℃,5%CO2条件下传代培养。结果:第3～4 d,少量细胞从组织块周边游出,第6～8 d后,细胞围绕组织块生长至亚融合状态,0.25%胰酶消化后传代,可得到较纯成纤维细胞。结论:利用组织贴块法培养大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞存活率高,操作简单,结果稳定,在血管重塑、血管纤维化、细胞凋亡、细胞表型转变等研究领域具有应用价值。
- 马彦军林家冲杨絮张勇刚
- 关键词：血管外膜成纤维细胞组织贴块法
- 尾加压素Ⅱ促进血管外膜成纤维细胞表达白细胞介素6被引量：1
- 2014年
- 目的探讨尾加压素Ⅱ（UⅡ）对大鼠血管外膜成纤维细胞表达白细胞介素6（IL-6）作用的影响及其细胞内信号转导机制。方法雄性SD大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞体外同步化培养24 h后,于无血清DMEM培养基中加入UⅡ（10^-10^-10^-7mol/L）,共孵育3-24 h。为了探索UⅡ的作用机制,加入细胞内不同的信号转导通路抑制剂,处理30 min后,加入UⅡ（10^-8mol/L）共孵育3 h或12 h。实验结束时,收集细胞,采用逆转录-聚合酶链反应法检测细胞IL-6 mRNA表达（3 h）;另外,细胞实验结束后收集培养液,采用酶联免疫吸附测定法检测IL-6分泌水平（12 h）。结果 （1）UⅡ呈浓度（10^-10^-10^-7mol/L）和时间依赖性方式促进外膜成纤维细胞中IL-6 mRNA表达和蛋白分泌,至10^-8mol/L UⅡ达高峰（P〈0.01）;UⅡ（10^-8mol/L）刺激IL-6基因表达3 h达高峰,蛋白分泌24 h达高峰（P〈0.01）。（2）UⅡ促进外膜成纤维细胞表达IL-6的效应能被UⅡ受体阻断剂SB710411（10^-6mol/L）、钙离子通道阻断剂尼卡地平（10^-5mol/L）、丝裂原活化蛋白激酶抑制剂PD980959（10^-5mol/L）、蛋白激酶C抑制剂H7（10^-5mol/L）、Rho激酶抑制剂Y-27632（10^-5mol/L）和钙调神经磷酸酶抑制剂环孢霉素A（10^-5mol/L）所抑制（P〈0.01）。结论 UⅡ明显促进大鼠主动脉外膜成纤维细胞IL-6的表达,该作用通过激活UⅡ受体、钙离子通道、丝裂原活化蛋白激酶、蛋白激酶C、Rho激酶和钙调神经磷酸酶信号途径来实现,提示UⅡ诱导外膜成纤维细胞表达IL-6升高可能是其参与动脉粥样硬化的重要机制之一。
- 林家冲包世林吴利标马彦军杨絮张勇刚
- 关键词：白细胞介素6血管外膜成纤维细胞动脉粥样硬化
