张晓红
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 乳酸乳球菌在疫苗递呈载体中的应用被引量：5
- 2014年
- 乳酸菌是人和动物肠道内的常见细菌,被公认为安全级微生物。近年来,对于乳酸菌作为宿主菌表达外源蛋白或抗原的研究取得了一定进展。乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)是乳酸菌的模式菌种,其基因组测序已经完成,因而方便研究者根据实际需要利用分子生物学工具将其改造为各种表达载体可用的受体菌。目前已经开发了一系列质粒型克隆载体和整合型克隆载体系统及蛋白定位系统,已有多种病原微生物抗原成功在乳酸乳球菌中表达,重组乳酸乳球菌作为粘膜免疫疫苗的递呈载体呈现非常好的应用前景,文章介绍了近年来乳酸乳球菌在疫苗递呈载体中的应用情况,重点阐述了其在抗感染、抗肿瘤、抗自身免疫性方面的研究进展及其在疫苗研制中遇到的困难及需要解决的问题,并对其应用前景进行了展望。
- 刘晓锐张晓红吴洁
- 关键词：乳酸乳球菌疫苗抗原粘膜免疫
- hVEGF_(121)与βhCG融合蛋白的克隆、分离纯化与初步鉴定被引量：2
- 2014年
- 构建一种新型抗肿瘤融合蛋白疫苗,包含hVEGF121和βhCG抗原表位,并探索融合蛋白的纯化条件和方法。采用PCR方法,克隆VEGF和βhCG基因,并通过限制性内切酶NcoⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ将两个基因逐个插入pET-28a(+)质粒中,利用质粒自带的卡那霉素抗性筛选出阳性克隆,获得重组基因的表达载体。对重组菌进行乳糖诱导表达后,通过超声破碎,硫酸铵分级沉淀,阴离子交换层析等方法进行融合蛋白的分离纯化,Western-blot鉴定。测序结果表明成功构建重组载体pET-28a-VEGF-M2-X10-βhCG-CTP37,重组基因长993 bp,编码331个氨基酸残基。SDS-PAGE显示,经乳糖诱导,Escherichia coli BL21(DE3)重组菌表达hVEGF121-M2-X10-βhCG-CTP37多肽,约占菌体总蛋白量的35%。融合蛋白经分离纯化后纯度可达到电泳纯,约占蛋白冻干粉的80%。结论:克隆、测定了融合蛋白基因,并在Escherichia coli BL21(DE3)中诱导表达hVEGF121-M2-X10-βhCG多肽,同时成功分离纯化此多肽。
- 曹荣月宦晓军孙翁李盼郑梅赵鹤杨梦琪龙军张晓红
- 关键词：ΒHCG克隆分离纯化融合蛋白
