刘远洋
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
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- HCV NS3与CD40L胞外段融合蛋白表达载体的构建及免疫性
- 2013年
- 目的构建带有丙肝病毒NS3与CD40L胞外段融合蛋白的重组乳酸球菌表达载体,并探讨其电转乳酸球菌后的免疫原性。方法在乳酸球菌表达质粒pMG36e的基础上,应用基因重组技术构建重组表达载体pMG36e-NS3-CD40L。该载体电转乳酸球菌MG1363,口服的方式免疫雄性ICR小鼠。ELISA法检测小鼠外周血中抗NS3蛋白抗体,流式法检测小鼠脾T淋巴细胞亚型,CTL杀伤实验检测小鼠脾淋巴细胞的杀伤活性。结果构建了乳酸球菌表达载体pMG36e-NS3-CD40L,该载体成功电转入乳酸球菌MG1363。ELISA检测结果显示,该重组乳酸菌口服免疫小鼠后,能诱发小鼠产生高滴度的抗NS3抗原的抗体。流式结果证实,该菌能上调小鼠CD8+T淋巴细胞和CD4+T淋巴细胞比率,且以CD8+T淋巴细胞增加更为显著。CTL杀伤结果显示,该重组乳酸菌能上调小鼠CTL杀伤能力。结论成功制备了乳酸球菌表达载体pMG36e-NS3-CD40L,该载体转入乳酸球菌并经口服免疫小鼠后,能够诱发高水平的细胞杀伤活性。
- 陈佳玉赵子通刘远洋戴玲珊陈佳琪
- 关键词:NS3蛋白CD40配体乳酸球菌