项凡
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
- 供职机构:华南农业大学食品学院生物工程系更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 棘孢木霉木聚糖酶Ⅰ基因和启动子克隆与分析
- 2010年
- 目的:克隆及分析棘孢木霉木聚糖酶Ⅰ结构基因和上游调控区,以获得内源启动子。方法:根据木霉属木聚糖酶Ⅰ结构基因及上游调控区的保守性,以棘孢木霉基因组DNA为模板,进行简并PCR扩增。产物纯化并克隆至T载体,经酶切鉴定后进行序列分析。结果:扩增获得1.2 kb的片段,酶切鉴定及序列分析表明,该片段长1 265 bp,由753 bp的木聚糖酶Ⅰ结构基因和512 bp的上游调控区组成。结构基因编码230个氨基酸,具有糖基水解酶第11家族的典型保守区域。上游调控区具备核心启动子和转录起始点,有CAAT-Box、TATA-Box等启动子特征元件,分析其还有CreⅠ、XlnR、Ace1、AreA等多个转录因子结合位点。结论:克隆的512 bp上游调控区是典型的丝状真菌基因启动子,可作为内源启动子用于构建棘孢木霉高效外源基因表达系统。
- 庞漫宇郭丽琼项凡林俊芳
- 关键词:基因克隆启动子