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活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用: 本发明公开了活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用。本发明提供的蛋白质，为突变体蛋白，为将磷酸转酮酶进行如下任意一种或多种突变得到的蛋白质：第2位由T突变为A；第6位由I突变为T；第14位由N突变为D；(第20位由E...; 孙际宾李庆刚郑平周文娟张晓立德莱奥西班乔·泰沃马延和; 文献传递

活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用: 本发明公开了活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用。本发明提供的蛋白质，为突变体蛋白，为将磷酸转酮酶进行如下突变得到的蛋白质：对应于序列3的第6位氨基酸残基由I突变为T。本发明还保护突变体蛋白在制备代谢物中的应用。与...; 孙际宾李庆刚郑平周文娟张晓立德莱奥西班乔·泰沃马延和; 文献传递

活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用: 本发明公开了活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用。本发明提供的蛋白质，为突变体蛋白，为将磷酸转酮酶进行如下突变得到的蛋白质：对应于序列3的第6位氨基酸残基由I突变为T。本发明还保护突变体蛋白在制备代谢物中的应用。与...; 孙际宾李庆刚郑平周文娟张晓立德莱奥西班乔·泰沃马延和; 文献传递

黑曲霉柠檬酸工业菌株原生质体制备与转化被引量：10: 2015年; 黑曲霉是柠檬酸工业化生产的主要发酵菌株。尽管现代遗传操作技术在黑曲霉的实验室菌株、蛋白质生产菌株等的应用中获得了成功,但是柠檬酸工业菌株遗传转化异常困难,成为柠檬酸工业持续升级的重要限制因素。以柠檬酸工业生产实际应用的黑曲霉菌株为研究对象,对其原生质体的制备与再生以及PEG介导的转化等条件进行了细致优化。结果表明,柠檬酸高产工业菌株原生质体的制备需选取丰富培养基中培养48 h的年轻菌丝体,在1.5%裂解酶-0.5%蜗牛酶-0.2%溶菌酶的复合酶解体系下裂解2.5 h,原生质体的制备浓度可达106个/m L以上,原生质体再生效率可达90%以上。原生质体的浓度是原生质体-PEG介导转化方法的关键,当原生质体浓度达到106个/m L以上时,高产柠檬酸菌株的转化效率大幅提高。成功建立了由原生质体-PEG所介导的高产柠檬酸黑曲霉菌株的遗传转化体系。; 张晓立郑小梅满云罗虎于建东郑平刘浩孙际宾; 关键词：黑曲霉柠檬酸遗传操作系统原生质体 DNA转化

CRISPR-Cas9介导的基因组编辑技术的研究进展被引量：27: 2015年; CRISPR-Cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeats-CRISPR-associated proteins)系统为细菌与古生菌中抵御外源病毒或质粒DNA入侵的获得性免疫系统。该系统在crRNA的指导下,使核酸酶Cas识别并降解外源DNA。其中,Ⅱ型CRISPR-Cas系统最为简单,仅包括一个核酸酶Cas9与tracrRNA:crRNA二聚体便可完成其生物功能。基于CRISPR-Cas9的基因组编辑技术的核心为将tracrRNA:crRNA设计为引导RNA,在引导RNA的指导下Cas9定位于特定DNA序列上,进行DNA双链切割,实现基因组的定向编辑。CRISPR-Cas9系统以设计操纵简便、编辑高效与通用性广等优势成为新一代基因组编辑技术,为基因组定向改造调控与应用等带来突破性革命。从CRISPR-Cas9介导的基因组编辑技术的发展与应用等方面综述其最新研究进展,并着重介绍该技术的关键影响因素,为相关研究者提供参考。; 郑小梅张晓立于建东郑平孙际宾

活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用: 本发明公开了活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用。本发明提供的突变体蛋白：将磷酸转酮酶进行如下突变得到的蛋白质：对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y；对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y，第2位...; 孙际宾李庆刚郑平周文娟张晓立德莱奥西班乔·泰沃马延和; 文献传递

活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用: 本发明公开了活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用。本发明提供的蛋白质，为突变体蛋白，为将磷酸转酮酶进行如下任意一种或多种突变得到的蛋白质：第2位由T突变为A；第6位由I突变为T；第14位由N突变为D；(第20位由E...; 孙际宾李庆刚郑平周文娟张晓立德莱奥西班乔·泰沃马延和; 文献传递

活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用: 本发明公开了活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用。本发明提供的突变体蛋白：将磷酸转酮酶进行如下突变得到的蛋白质：对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y；对应于序列3的第260位氨基酸残基由H突变为Y，第2位...; 孙际宾李庆刚郑平周文娟张晓立德莱奥西班乔·泰沃马延和; 文献传递

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张晓立