李庆刚
- 作品数:22 被引量:8H指数:2
- 供职机构:中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划天津市科技计划中国科学院重点部署项目更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用
- 本发明公开了活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用。本发明提供的蛋白质,为突变体蛋白,为将磷酸转酮酶进行如下突变得到的蛋白质:对应于序列3的第6位氨基酸残基由I突变为T。本发明还保护突变体蛋白在制备代谢物中的应用。与...
- 孙际宾李庆刚郑平周文娟张晓立德莱奥西班乔·泰沃马延和
- 文献传递
- 新型的L-苏氨酸-诱导型启动子及其应用
- 本发明提供了一类新型的L-苏氨酸-诱导型启动子及其应用,具体的,本发明提供了新型的L-苏氨酸-诱导型启动子以及包含该启动子的构建物、载体和宿主细胞,所述启动子能被苏氨酸所诱导。本发明新型的L-苏氨酸诱导型启动子核酸分子能...
- 孙际宾李庆刚刘亚男郑平刘永飞张大伟马延和
- 文献传递
- 产O-乙酰高丝氨酸的大肠杆菌构建与发酵测试被引量:2
- 2017年
- O-乙酰高丝氨酸(OAH)是具有潜在工业应用价值的前体化合物,可用于制备高丝氨酸与蛋氨酸等。以一株改造自苏氨酸产生菌的Escherichia coli Thr L为出发菌株,过表达OAH合成途径中的关键酶高丝氨酸脱氢酶基因thr A和高丝氨酸乙酰基转移酶基因met X,并利用不同强度的启动子组合优化这两个基因的表达水平,通过发酵培养基中的苏氨酸和酵母粉的浓度优化以提升OAH的产生菌株的生产性能。通过启动子组合优化结果发现,当thr A与met X均采用J23110启动子时,该重组菌株E.coliOAH4的OAH合成能力最强,摇瓶发酵50 h后,其OAH产量为1.54 g/L。当苏氨酸的浓度为2 g/L,酵母粉的浓度为6 g/L时,E.coli OAH4的发酵水平最高,摇瓶发酵50 h后,OAH的产量可进一步提升至1.98 g/L。本研究首次在E.coli中实现了OAH的合成,并通过发酵优化确定了OAH的最优发酵条件,为后续OAH生产应用研究奠定了基础。
- 杨静杨静李庆刚李庆刚郑平郑小梅
- 关键词:大肠杆菌
- 赖氨酸生产菌株的构建方法和应用
- 本发明公开了赖氨酸生产菌株的构建方法和应用。本发明提供了一种构建工程菌的方法,包括如下步骤:在出发菌中,对SpeB蛋白、SecY蛋白和/或AtpB蛋白进行改造,获得与所述出发菌相比赖氨酸耐受能力提高和/或赖氨酸产量提高的...
- 孙际宾李庆刚郑平王晓玮周文娟陈久洲王钰马延和
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- 一种赖氨酸生产菌株的构建方法和应用
- 本发明公开了赖氨酸生产菌株的构建方法和应用。本发明提供了一种构建工程菌的方法,包括如下步骤:在出发菌中,对SpeB蛋白、SecY蛋白和/或AtpB蛋白进行改造,获得与所述出发菌相比赖氨酸耐受能力提高和/或赖氨酸产量提高的...
- 孙际宾李庆刚郑平王晓玮周文娟陈久洲王钰马延和
- 活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用
- 本发明公开了活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用。本发明提供的蛋白质,为突变体蛋白,为将磷酸转酮酶进行如下突变得到的蛋白质:对应于序列3的第6位氨基酸残基由I突变为T。本发明还保护突变体蛋白在制备代谢物中的应用。与...
- 孙际宾李庆刚郑平周文娟张晓立德莱奥西班乔·泰沃马延和
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- 新型的L-苏氨酸-诱导型启动子及其应用
- 本发明提供了一类新型的L‑苏氨酸‑诱导型启动子及其应用,具体的,本发明提供了新型的L‑苏氨酸‑诱导型启动子以及包含该启动子的构建物、载体和宿主细胞,所述启动子能被苏氨酸所诱导。本发明新型的L‑苏氨酸诱导型启动子核酸分子能...
- 孙际宾李庆刚刘亚男郑平刘永飞张大伟马延和
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- L-赖氨酸高产菌株及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种构建L‑赖氨酸生产菌株的方法,所述方法包括使得所述赖氨酸生产菌株中的咪唑甘油磷酸酯脱水酶、组氨醇磷酸化酶、组氨醛/组氨醇脱氢酶中的一种或几种在胞内不能正常发挥功能。本发明还公开了利用所述方法构建的L‑赖氨...
- 孙际宾李庆刚周文娟郑平马延和
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- 一种改进的赖氨酸浓度测定方法被引量:4
- 2013年
- 茚三酮显色法是一种常用的氨基酸测定方法,可以对游离氨基酸进行定性、定量分析,但检测赖氨酸的选择性和准确度却较差。本研究通过对传统茚三酮方法的改进实现赖氨酸的特异性检测。研究发现,在pH2.2的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液中只有赖氨酸可与茚三酮-铁试剂在480 nm处发生特征显色反应,其最佳测定条件为100℃反应35 min;并发现改进的方法赖氨酸的有效浓度为0-200 mmol/L。此方法可以排除脯氨酸、鸟氨酸、甘氨酸、精氨酸和组氨酸等杂质氨基酸的干扰,而且适用于对发酵液中赖氨酸浓度进行直接测定,结果准确可靠。
- 姜安娜曹名锋李庆刚郑平杨洪江孙际宾
- 关键词:赖氨酸显色反应特异性检测
- 活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用
- 本发明公开了活性提高的磷酸转酮酶及在生产代谢物中的应用。本发明提供的蛋白质,为突变体蛋白,为将磷酸转酮酶进行如下任意一种或多种突变得到的蛋白质:第2位由T突变为A;第6位由I突变为T;第14位由N突变为D;(第20位由E...
- 孙际宾李庆刚郑平周文娟张晓立德莱奥西班乔·泰沃马延和
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