石征宇 作品数:10 被引量:40 H指数:3 供职机构: 广西科技大学 更多>> 发文基金: 广西省自然科学基金 国家自然科学基金 科技型中小企业技术创新基金 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 生物学 化学工程 更多>>
嗜热脱氮芽孢杆菌产α-半乳糖苷酶影响因素的研究 被引量:1 2015年 该文对前期筛选出的嗜热脱氮芽孢杆菌YWX5产α-半乳糖苷酶的影响因素进行了初步的研究,通过测定α-半乳糖苷酶酶活,探究了培养基成分(包括碳源、氮源、无机盐)及培养条件(初始pH值、培养温度、培养时间)对该嗜热脱氮芽孢杆菌产α-半乳糖苷酶能力的影响.实验结果表明,对该菌产酶最有效的碳源为3%豆粕,氮源为0.5%硝酸钾,附加氮源为0.5%酵母浸出物;添加0.5%氯化钠和0.1%磷酸氢二钾有助于该菌产酶.另外,该菌最佳产酶培养温度为60℃,培养基最适初始pH在7.0~8.0,培养时间为65 h. 韦阳道 易弋 石征宇 邓春 伍时华 黎娅关键词:Α-半乳糖苷酶 酶活 影响因素 一株弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及致病性研究 被引量:17 2018年 为确定导致罗非鱼患病的原因,本试验对濒临死亡的罗非鱼进行无菌解剖,从心脏部位分离得到1株细菌,通过形态学观察、生理生化鉴定和16SrDNA分析,确定菌株为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)。药敏试验结果显示,该菌株具有很强的多重耐药性,测试的20种药物中,该菌株对恩诺沙星、青霉素等13种药物具有完全耐药性,仅对头孢曲松、头孢他啶、头孢拉定、哌拉西林、舒巴坦5种药物敏感。人工感染试验结果显示,该菌对草鱼、黄颡鱼、罗非鱼、禾花鲤具有较强的致病性。本试验结果阐明了罗非鱼患病的原因,同时在养殖过程中可指导养殖户合理用药。 石征宇 易弋 黄德生 罗福广 黄杰 鲁晶娣 黎娅关键词:罗非鱼 耐药性 Geobacillus thermodenitrificans α-半乳糖苷酶原核表达及酶学性质的研究 α-半乳糖苷酶(α-GalActosidase)又称蜜二糖酶,在自然界中存在范围较广,属于外切糖苷酶类,能够专一催化糖链末端含α-1.6半乳糖苷键的多糖、糖蛋白、糖脂等物质,即能催化毛蕊花糖、棉籽糖、水苏糖和蜜二糖等底聚... 石征宇关键词:Α-半乳糖苷酶 原核表达 蛋白纯化 酶学性质 生物信息学 活性位点 嗜热地衣芽孢杆菌植酸酶的原核表达及酶学性质研究 被引量:1 2016年 将地衣芽孢杆菌SR01(Bacillus licheniformis SR01)的植酸酶phy基因重组于表达载体p GEX-4T-3中,导入大肠杆菌BL21(Escherichia coli BL21)构建工程菌p GX1143,并得到了高效表达。对其酶学性质的研究表明:该酶最适反应p H为5.0,最适反应温度为55℃,具有广泛的p H稳定性和较好的热稳定性;Co^(2+))、Li^+、Mg^(2+))和Ba^(2+)对酶活性有促进作用,Cu^(2+)、Pb^(2+)、Fe^(2+)、Ag^+、SDS对酶活性有不同程度的抑制作用,并且Pb^(2+)、Fe^(2+)和SDS对酶活性的抑制作用较强烈;此外,该酶还具有非常好的抗胰蛋白酶水解能力和部分抗胃蛋白酶水解的能力。 李平 易弋 石征宇 伍时华 黄翠姬 黎娅关键词:地衣芽孢杆菌 植酸酶 酶学性质 Geobacillus thermodenitrificans α-半乳糖苷酶原核表达及其酶学性质 被引量:1 2019年 本文利用大肠杆菌原核表达系统对来源于Geobacillus thermodenitrificans的α-半乳糖苷酶编码基因进行了重组表达,并对该酶的酶学性质进行了研究。结果表明,该α-半乳糖苷酶的分子量为100~110 kDa,以p NPG为底物时,该酶的最适反应温度为70℃,最适pH6.0,且该酶具有较好的温度稳定性和pH稳定性; Hg^+、Ag^+、Cu^(2+)离子能完全抑制α-半乳糖苷酶的活性,Fe^(3+)、Mn^(2+)、Zn^(2+)等离子对α-半乳糖苷酶的活性具有不同程度的激活作用;以pNPG为底物测得该酶的米氏常数K_m=10.04 mmol/L,最大反应速度V_(max)=18.25μmol/min。 石征宇 鲁晶娣 韦盘秋 伍时华 程谦伟 黎娅 易弋关键词:GEOBACILLUS Α-半乳糖苷酶 原核表达 酶学性质 胡子鲶致病性摩氏摩根菌的分离鉴定与致病性研究 被引量:14 2017年 本研究从患病胡子鲶体内分离得到一株菌,通过菌体形态观察、生理生化试验、16SrDNA分析及构建系统发育树对其进行分析,得出该致病菌为摩氏摩根菌。人工感染试验结果显示,该致病菌对胡子鲶具有较强的致病能力,同时对罗非鱼、泥鳅和禾花鲤也有很强的致病能力。药敏试验结果显示,KD01菌株对青霉素G、氨苄青霉素和新生霉素等药物有高度的耐药性,对复方新诺明、恩诺沙星和环丙沙星等药物敏感。本试验结果对胡子鲶出血性肠道坏死疾病研究提供有力的依据,同时可指导养殖户合理用药。 韦阳道 易弋 黎娅 石征宇 伍时华 梁建荣关键词:胡子鲶 突变酶Y93S对嗜热地衣芽孢杆菌SR01葡聚糖酶热稳定性的影响 2017年 为提高嗜热地衣芽孢杆菌SR01葡聚糖酶的热稳定性,对其相关的氨基酸残基进行定点突变改造。通过对其结构的分析,构建了Y93S突变体,利用分子动力学模拟分析评估后,发现Y93S突变体可能具有较高的耐热能力,利用定点突变技术构建Y93S表达载体并分析温度对表达产物酶活的影响。试验结果表明,突变酶Y93S的最适温度由野生型酶的55℃提高至70℃;在90℃条件下,突变酶Y93S较野生型酶的半衰期由60 min提高到120 min以上;pH及p H稳定性较野生型变化不明显。突变酶Y93S极大的提高了野生型酶的热稳定性,具有潜在的工业应用价值,同时为葡聚糖酶的耐热机理提供有力依据。 韦阳道 易弋 黎娅 石征宇 伍时华 梁建荣关键词:分子动力学 葡聚糖酶 热稳定性 基于分子动力学模拟研究定点突变对葡聚糖酶热稳定性的影响 2017年 为提高葡聚糖酶的热稳定性,对葡聚糖酶的三维结构进行模拟分析,获得2个突变体R226A、G224A,用分子动力学的方法从原子水平上研究突变体与野生型的耐热性。结果显示,突变体R226A、G224A的均方根偏差,回旋半径和静电势能等参数值要低于野生型蛋白,表明突变体的热稳定性较野生型明显上升,更有利于在高温环境下发挥其生物活性。通过计算机模拟分析的方法研究定点突变对野生型酶的热稳定性的影响,可大大节省试验时间,同时可为阐明葡聚糖酶耐热性机制提供理论依据。 韦阳道 易弋 石征宇 李家杰 苏家敏 伍时华 黎娅关键词:分子动力学 定点突变 葡聚糖酶 热稳定性 黄颡鱼迟钝爱德华菌的分离鉴定及其致病性研究 被引量:3 2018年 为了确定黄颡鱼发病的原因,试验从患病黄颡鱼体内分离得到1株病原菌,命名为GDYM20160809,通过形态学观察、生理生化特性鉴定、16S rDNA分析及系统进化树构建等方法对分离菌进行鉴定,采用滤纸片扩散法对分离菌进行药敏试验。结果显示,该分离菌为革兰氏阴性短杆菌,PCR扩增其16S rDNA片段,经测序及BLAST比对,显示其与迟钝爱德华菌(Edwardsiella tarda)的同源性达100%,结合生理生化鉴定结果确定分离菌为迟钝爱德华菌。药敏试验结果显示,分离菌对磺胺类药物、头孢类药物、青霉素、复方新诺明等药物敏感,对磺胺间甲氧嘧啶钠、新生霉素、多黏菌素B、阿米卡星、卡那霉素和万古霉素6种药物耐药;人工感染试验结果证实,菌株对罗非鱼、禾花鲤、草鱼和黄颡鱼都有很强的致病性。本试验结果为有效防控黄颡鱼细菌性疾病提供了理论依据,并可指导养殖户合理用药。 石征宇 易弋 韩书煜 罗福广 黄杰 鲁晶娣 黎娅关键词:黄颡鱼 RDNA 产谷胱甘肽荧光假单胞菌发酵条件的优化 被引量:4 2017年 方法:在实验室前期工作中,分离得到一株可生产谷胱甘肽(GSH)的荧光假单胞菌BJYG12,在单因素的基础上,通过正交试验对该菌株发酵生产GSH的条件进行了优化。结果:发酵温度28℃,初始pH 7.5,接种量5%,培养基含酵母膏25g/L,蔗糖15g/L,KH_2PO_4 1.5g/L,MgSO_4 2.5g/L,优化发酵条件后,菌株产GSH的能力增长了15.7%。 石征宇 易弋 苏家敏 韦阳道 黎娅关键词:荧光假单胞菌 谷胱甘肽 GSH