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雷公藤乙酰CoA酰基转移酶基因全长cDNA克隆及表达分析被引量：11: 2015年; 研究根据雷公藤悬浮细胞转录组数据库设计引物,对雷公藤悬浮细胞乙酰辅酶A酰基转移酶(acetyl-Co A C-acetyltransferase)基因Tw AACT进行全长c DNA(Gene Bank:KP297934)克隆以及生物信息学分析和基因表达分析。克隆得到Tw AACT c DNA全长为1 704 bp,编码405个氨基酸,等电点为6.10,相对分子质量为41.20 k Da,在线预测表明Tw AACT具有2个催化活性位点。雷公藤悬浮细胞经茉莉酸甲酯(Me JA)外源诱导后,通过荧光定量PCR表明,Tw AACT相对表达量明显增加,在24 h达到最高。研究首次克隆得到雷公藤AACT基因,为进一步阐述雷公藤萜类生物合成途径奠定基础。; 赵瑜君张萌刘雨佳苏平童宇茹胡添源陈忻高伟黄璐琦; 关键词：雷公藤克隆生物信息学分析基因表达分析

雷公藤CYP88A1基因全长cDNA的获得及生物信息学分析: 研究根据雷公藤悬浮细胞转录组数据设计引物,利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术从雷公藤悬浮细胞中克隆得到一条CYP450 88A1全长cDNA,并对其进行多重序列比对、蛋白结构预测及构建系统进化树等生物信息学分析,同...; 陈上张萌刘雨佳高伟王秀娟; 关键词：雷公藤萜类成分生物合成生物信息学

雷公藤CYP88A1基因全长cDNA的获得及生物信息学分析: 研究根据雷公藤悬浮细胞转录组数据设计引物,利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术从雷公藤悬浮细胞中克隆得到一条CYP45088A1全长cDNA,并对其进行多重序列比对、蛋白结构预测及构建系统进化树等生物信息学分析,同时...; 陈上张萌刘雨佳高伟王秀娟

雷公藤MCT基因的全长克隆与表达分析被引量：9: 2015年; 根据雷公藤转录组数据提供的基因片段设计特异引物,采用全长PCR方法克隆Tw MCT全长cDNA,分析序列同源性,预测TwMCT蛋白结构,并进行序列多重比对和构建系统进化树分析;采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）,以actin为内参,分析雷公藤悬浮细胞受茉莉酸甲酯（MeJA）诱导后0~72 hTwMCT基因的相对表达量。克隆得到全长1 318 bp TwMCT全长c DNA,具有完整编码框,编码311个氨基酸,蛋白相对分子质量为34.14 kDa,理论等电点为8.65;RT-qPCR结果表明该基因受MeJA诱导后表达逐渐上升,在24 h时达到最高值。克隆雷公藤TwMCT全长cDNA和分析表达特性,为进一步研究该基因的功能和雷公藤次生代谢调控提供了基因元件。; 童宇茹苏平张萌赵瑜君王秀娟高伟黄璐琦; 关键词：雷公藤

药用植物毛状根的诱导及其应用被引量：15: 2014年; 植物毛状根培养是植物组织培养中的一种,因其不仅克服了植物生长缓慢、有效成分积累有限的不足,且具有不依赖外源植物激素等优点,近年来研究较多。文章介绍了目前药用植物毛状根的诱导情况,并总结了植物毛状根培养体系在次生代谢物的生产、生物合成机制及调控基因的研究、植物基因工程、生物转化以及药物蛋白中的应用,旨在为其他药用植物毛状根的培养及利用提供参考依据。; 张萌高伟王秀娟; 关键词：毛状根药用植物次生代谢产物发根农杆菌生物转化

雷公藤牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶基因全长cDNA的获得及生物信息学分析被引量：11: 2015年; 该研究利用c DNA末端快速扩增(RACE)技术从雷公藤悬浮细胞中克隆得到一条GGPPS全长c DNA(Gene Bank:KM978333),并对其进行多重序列比对、蛋白结构预测及构建系统进化树等生物信息学分析。所克隆的Tw GGPPS c DNA全长1 857 bp,编码含514个氨基酸的蛋白序列,相对分子质量为57.13 k Da,等电点为7.85,具有5个保守域和2个功能域,亚细胞定位预测显示其可能位于质膜上,多重序列比对及系统进化树结果显示与其他植物GGPPS家族具有较高同源性。实验首次克隆了雷公藤GGPPS基因,为进一步研究雷公藤甲素等二萜化合物生物合成途径奠定基础。; 张萌苏平刘雨佳童宇茹赵瑜君高伟王秀娟黄璐琦; 关键词：雷公藤生物信息学分析

药用植物毛状根的诱导及其在次生代谢物研究中的应用: 毛状根培养系统不仅克服了植物生长缓慢、有效成分积累有限的不足,且具有不依赖外源植物激素等优点,近年来研究较多.本文介绍了毛状根的诱导及其影响因素,并总结毛状根在次生代谢物研究中的应用,指出发根农杆菌介导的毛状根诱导及培养...; 张萌高伟刘珊珊王秀娟; 关键词：次生代谢产物; 文献传递

雷公藤4-(5'-二磷酸胞苷)-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶基因的全长克隆与表达分析被引量：8: 2015年; 4-（5-焦磷酸胞苷）-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶[4-（cytidine-5-diphospho）-2-C-methyl-D-erythritol kinase,CMK]是雷公藤甲素等萜类成分生物合成途径上关键酶之一。根据获得的雷公藤转录组数据中Tw CMK片段设计特异性引物,采用全长PCR方法克隆Tw CMK全长c DNA,并进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR（RT-q PCR）检测茉莉酸甲酯（Me JA）诱导雷公藤悬浮细胞后0~72 h Tw CMK基因的表达水平。结果表明,Tw CMK全长c DNA由1 732个核苷酸组成,具有完整的开放阅读框,共编码387个氨基酸,蛋白相对分子质量为42.85 k Da,理论等电点为5.79;Tw CMK基因受Me JA诱导后表达逐渐上升,在24 h时达到最高值。为进一步研究雷公藤甲素等萜类成分次生代谢调控和生物合成奠定了基础。; 童宇茹苏平赵瑜君张萌王秀娟胡添源高伟黄璐琦; 关键词：雷公藤

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张萌