刘柱
- 作品数：7 被引量：16H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科技兴农重点攻关项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一株犬瘟热病毒变异株的基因组特征
- 引言犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)隶属于副黏病毒科麻疹病毒属,是单股负链RNA病毒。传染性极强,发病率和致死率都很高。发病率可达100%,死亡率也高达80%,宿主主要包括犬科、猫科、鼬...
- 刘柱李丹丹李琦宫晓华缪秋红李传峰陈宗艳张淼涛刘光清
- 文献传递
- 犬瘟热病毒AH株全基因组序列测定及其分子特征被引量：3
- 2017年
- 本研究对犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)安徽分离株(CDV-AH株)的全基因组序列进行了测定和分析。根据GenBank上已发表的部分CDV基因组全长序列设计了8对特异性引物,RT-PCR方法分段扩增出CDV-AH株的全基因组序列。采用DNAStar软件和MEGA软件对CDV-AH株与其他CDV毒株的基因序列进行了比对和分析,并绘制系统进化树。结果显示,CDV-AH株全长15 690 bp,编码6种结构蛋白(N、P、M、F、H和L),与CDV-PS株核苷酸序列同源性最高,为98.8%,而与CDV-1以及Onderstepoort等疫苗株的序列同源性较低,为92.1%。CDV-AH株在保守区域出现15处氨基酸突变,这些突变对其所编码蛋白结构和功能的影响需要进一步研究。基于H基因序列的系统进化分析表明,CDV-AH株与其他CDV野毒株共同形成一个拓扑群,属于亚洲Ⅰ型。
- 刘柱李丹丹李琦宫晓华缪秋红李传峰陈宗艳张淼涛刘光清
- 关键词：犬瘟热病毒
- 犬瘟热病毒H基因的序列分析被引量：2
- 2017年
- 【目的】探索犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)基因的遗传变异情况,为CDV的防控提供理论依据。【方法】收集2014-2015年流行于上海和安徽两地的CDV野毒株,用RT-PCR方法克隆其血球凝集素蛋白基因(H),从分子水平上讨论CDV H基因的流行规律、遗传进化特性和变异情况。【结果】分离的5株CDV之间H基因核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97.5%~99.9%和97.5%~99.2%,其与CDV疫苗株CDV3和Onderstepoort H基因核苷酸的同源性为90.9%~99.9%,氨基酸的同源性为90.4%~99.6%。进化树分析结果表明,分离到的5株CDV野毒株均属于亚洲Ⅰ型,与大部分的亚洲Ⅰ型处于同一分支。CDV H基因有9处潜在的天冬氨酸糖基化位点;H基因整体的同义突变概率与非同义突变概率的比例,即ds/dn=5.887 0。【结论】选择压力并未作用于分离到的CDV毒株,而是在中性选择作用下进化的。
- 李丹丹戚伟强李传峰刘柱陈宗艳张淼涛刘光清
- 关键词：犬瘟热
- 小反刍兽疫病毒FY株全基因组序列的测定及其分子特征的研究被引量：2
- 2017年
- 根据小反刍兽疫病毒(PPRV)参考序列设计了11对特异性引物,然后用RT-PCR方法分段扩增出PPRV富阳分离株(PPRV-FY)的全基因组序列,用DNAstar软件和Mega软件对PPRV-FY株及参考毒株的基因序列进行了比对和分析,并根据N基因核苷酸序列绘制了系统进化树。结果,PPRV-FY株全长15 948 bp,编码6种结构蛋白(N、P、L、M、F和H),2种非结构蛋白(C和V),PPRV各毒株转录起始序列和转录终止序列都高度保守。同源性分析结果表明,PPRV-FY株与PPRV-Coted′Ⅰvoire89同源性最低,为89.0%,与PPRV/Tibet/30/2007株和PPRV/Tibet/2007株的同源性最高,为97.3%,其基因间隔区N-P长度一致,相似度最高,而M-F相似度最低。通过比较PPRV-FY株与参考毒株基因组末端调控序列,可以看出整个麻疹病毒属GP区和AGP区保守性较高,且存在不同程度的互补。氨基酸序列分析结果表明,PPRV-FY株在保守区域出现21处氨基酸突变,这些突变对其所编码蛋白的结构和功能有何影响尚需要进一步研究。此外,本文还基于N基因序列,对PPRV-FY株及参考毒株进行了系统进化分析。结果表明,PPRV-FY株与其它亚洲源PPRV野毒株共同形成一个拓扑群,属于第IV谱系。
- 刘柱缪秋红李琦宫晓华李传峰陈宗艳窦永喜张志东杨宗照刘光清张淼涛
- 关键词：小反刍兽疫病毒全基因组
- 新型鸭细小病毒病毒样颗粒的表达与鉴定
- 引言鸭短喙-侏儒综合症是由新型鸭细小病毒(Novel duck parvovirus,NDPV)引起的一种以鸭生长发育障碍,鸭喙萎缩,舌头肿胀外垂,胫骨短小质脆,行走困难为主要特征的鸭传染病。该病于2014年在我国大陆首...
- 李琦李传锋唐井玉刘柱宫晓华吴巧梅谭永贵刘光清
- 新型鸭细小病毒VP3基因的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：8
- 2016年
- 应用PCR方法扩增了新型鸭细小病毒(novel duck parvovirus,NDPV)的VP3基因,然后将其克隆到原核表达载体p GEX-4T-1中,获得重组质粒p GEX-VP3。将p GEX-VP3转化BL21感受态细胞后,用1.0mmol/L IPTG于37℃进行诱导。最后,分别用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定。结果,NDPV VP3蛋白在大肠杆菌细胞中成功获得表达,表达产物主要以包涵体形式存在,分子质量为84 ku。将纯化的重组VP3蛋白免疫实验家兔,制备多克隆抗体。Western-blot检测结果表明,该抗体能同时与重组的NDPV VP3蛋白及自然感染的NDPV发生反应,说明制备的抗体具有良好的抗原反应性。这些结果为进一步建立NDPV检测方法和研发新型疫苗研究奠定了物质基础。
- 李琦李传峰唐井玉刘柱宫晓华陈宗艳王桂军吴润刘光清
- 关键词：VP3基因原核表达多克隆抗体
- 犬瘟热病毒N基因原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2016年
- 采用PCR方法扩增犬瘟热病毒N基因,将其克隆至原核表达载体p ET-32a(+)中,构建犬瘟热N基因原核表达重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达重组N蛋白。从包涵体中纯化重组蛋白,制备多克隆抗体,采用Western blot检测其特异性。结果显示PCR扩增得到犬瘟热N基因,重组N蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中得到表达,制备的多克隆抗体能与N蛋白特异性反应。
- 李丹丹刘柱丁明洋李传峰陈宗艳张淼涛刘光清
- 关键词：犬瘟热病毒N蛋白原核表达多克隆抗体
