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活性氧、丙二醛及超氧化物歧化酶在NaAsO_2致人角质形成细胞恶性转化过程中的动态变化被引量：7: 2015年; 目的探讨氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)在砷致人角质形成细胞(human keratinocytes,Ha Ca T)恶性转化不同阶段的动态变化。方法以含1.0μmol/L Na As O2的DMEM高糖完全培养基连续培养Ha Ca T细胞35代后,用基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平变化、细胞生长动力学改变和软琼脂集落形成实验鉴定其是否发生恶性转化。分别收集0、1、7、14、21、28和35代细胞,采用流式细胞仪检测不同代数细胞内ROS活性,生化法检测细胞内MDA含量及SOD活性变化。结果 1.0μmol/L Na As O2处理Ha Ca T细胞28代开始MMP-9相对蛋白水平明显上升,35代后细胞生长速度明显增快,倍增时间明显缩短;软琼脂集落形成数为(107±11)个,较对照组(24±7)明显增多(P<0.01)。ROS水平在染毒0到14代间呈先上升后下降随后再上升趋势,14代以后ROS水平逐渐降低。MDA含量在染毒1代时达到峰值,随后呈缓慢下降趋势。SOD活性在染毒0到21代呈先上升后缓慢下降趋势,21代以后其活性再次升高,呈持续上升趋势,且较0代明显升高(P<0.05)。结论低剂量亚砷酸钠长期诱导Ha Ca T细胞发生恶性转化过程中伴随细胞内氧化-抗氧化平衡失调,染毒后期SOD活性持续增加而ROS水平持续降低。; 马园王大朋许熙国杨旭王小娟朱震赵莹莹陈敏许菲菲付乐朱继刚高芬芳安艳; 关键词：亚砷酸盐 HACAT细胞恶性转化

亚砷酸钠致人支气管上皮细胞恶性转化过程中氧化应激指标变化被引量：3: 2014年; 目的探讨在亚砷酸盐致人支气管上皮(HBE)细胞恶性转化过程中氧化应激指标的变化趋势,初步探讨其对细胞恶性转化的作用。方法用1μmol/L亚砷酸钠连续染毒HBE细胞。通过形态学观察、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)以及软琼脂克隆实验鉴定细胞恶性转化情况,分别于暴露1、8、15、22、29、36、43代,以流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平,检测细胞丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果亚砷酸钠长期染毒HBE细胞至43代时,细胞生长速度明显加快,且呈浸润型生长,MMP-9分泌量升高,细胞集落数量增多。与正常对照(0代)比较,22代及以前HBE细胞内ROS、MDA及SOD的水平均呈先升高后下降的波浪形趋势;29代及以后,ROS、MDA水平逐渐下降,且以ROS表现更为明显,而SOD水平呈逐渐升高趋势。结论细胞内氧化-抗氧化平衡失调可能在低剂量砷化合物诱导HBE细胞恶性转化过程中发挥重要作用。; 杨旭王大朋许熙国马园王小娟朱震赵莹莹陈敏许菲菲付乐朱继刚高芬芳安艳; 关键词：人支气管上皮细胞亚砷酸盐恶性转化氧化应激

长期低剂量亚砷酸钠染毒对内质网凋亡通路相关蛋白的影响: 目的：探讨1.0 μmol/L亚砷酸钠长期作用于人支气管上皮细胞(HBE细胞)、人皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞),致使细胞发生恶性转化过程中内质网凋亡通路相关蛋白在不同阶段的动态变化.方法：以实验室前期建立的HBE、...; 李春春邓晗依倪一平杨旭马园安艳; 关键词：内质网凋亡

慢性砷暴露对人支气管上皮细胞超微结构的影响: 2017年; 目的研究长期亚砷酸钠诱导人支气管上皮细胞(HBE)恶性转化过程中线粒体及其他细胞器超微结构的改变,为砷致癌的机制研究提供动态细胞形态学改变基础资料。方法用1.0μmol/L亚砷酸钠连续染毒HBE细胞至43代,分别取正常和亚砷酸钠暴露1、8、15、22、29、36、43代HBE细胞,用流式细胞仪和生化法分别检测不同组别细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力的变化,用透射电镜观察亚砷酸钠暴露15、29、43代和传代对照的HBE细胞内各细胞器超微结构的改变,用real-time PCR检测不同组别细胞内线粒体DNA(mtDNA)拷贝数的变化。结果与正常HBE细胞(0代)比较,亚砷酸钠染毒组22代及以前的ROS、MDA及SOD水平均呈先升高后下降的趋势;染毒29代及以后的ROS、MDA水平逐渐下降,SOD水平逐渐升高。透射电镜观察,与传代对照组细胞比较,染毒15代细胞的线粒体开始出现肿胀,嵴模糊,内质网扩张,且细胞mtDNA拷贝数增加;染毒29代及以后线粒体肿胀明显,嵴断裂,呈明显空泡状态,且有膜增殖、盘绕现象,mtDNA拷贝数先降低后升高,且均高于传代对照,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 1.0μmol/L亚砷酸钠在诱导HBE细胞恶性转化的过程中发生了细胞内氧化-抗氧化状态失衡,且随着染毒代数的增加,细胞线粒体DNA拷贝数增加明显,超微结构观察有细胞内线粒体肿胀、内质网扩张及膜增殖等变化。; 王小娟杨旭王大朋许熙国马园朱震邓晗依李春春安艳; 关键词：亚砷酸钠人支气管上皮细胞超微结构

不同剂量亚砷酸钠暴露不同时间对HaCaT细胞活性氧的影响被引量：5: 2013年; 目的探索不同剂量亚砷酸钠暴露不同时间对诱导人永生化角质形成(HaCaT)细胞活性氧(ROS)产生的影响以及低剂量亚砷酸钠预处理HaCaT细胞对诱导ROS水平改变的时间效应。方法设未预处理组[分别加入终浓度为0(对照)、0.15、0.6、2.5、10μmol/L的亚砷酸钠染毒8、24、72 h]和预处理8 h组(加入0.15μmol/L亚砷酸钠预处理8 h后,加入10μmol/L亚砷酸钠染毒8 h)及预处理24 h组(加入0.15μmol/L亚砷酸钠预处理24 h后,加入10μmol/L亚砷酸钠染毒8 h)。利用2’,7’-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)通过流式细胞仪检测细胞内ROS水平。结果与对照组比较,各浓度亚砷酸钠染毒8 h和0.6、2.5、10μmol/L亚砷酸钠染毒24 h及0.6、2.5μmol/L亚砷酸钠染毒72 h后HaCaT细胞内ROS水平均较高,而0.15、10μmol/L亚砷酸钠染毒72 h后HaCaT细胞内ROS水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。亚砷酸钠染毒8 h时,HaCaT细胞内ROS水平达到峰值;之后,低剂量(0.15、0.6μmol/L)亚砷酸钠染毒组HaCaT细胞内ROS水平于24 h下降,72 h有所回升,而高剂量(≥2.5μmol/L)亚砷酸钠染毒组HaCaT细胞内ROS水平则呈持续下降。预处理8 h组HaCaT细胞内ROS水平高于预处理24 h组,差异均有统计学意义(P<0.05);与10μmol/L亚砷酸钠染毒未预处理HaCaT细胞8 h组比较,预处理8 h组HaCaT细胞内ROS水平较高,预处理24 h组HaCaT细胞内ROS水平较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HaCaT细胞急性暴露于亚砷酸钠后能够引起HaCaT细胞内ROS产生增加,而不同剂量亚砷酸钠暴露诱导HaCaT细胞ROS水平的改变与暴露时间密切相关,且低剂量亚砷酸钠暴露对HaCaT细胞产生的适应性反应可能取决于其作用时间。; 许熙国王大朋金洹宇刘星杨旭马园童建安艳; 关键词：亚砷酸盐活性氧

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杨旭

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