伍生军
- 作品数：14 被引量：24H指数：3
- 供职机构：延边大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省科技厅青年科研基金吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理医药卫生更多>>
- 猪附红细胞体eno基因重组蛋白的制备及免疫效果研究被引量：3
- 2020年
- 为了研究猪附红细胞体eno基因重组蛋白的免疫效果,本试验将猪附红细胞体eno基因与pET-15b载体进行连接,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。对表达菌株进行诱导表达、纯化,利用纯化后的猪附红细胞体eno重组蛋白(命名为rMseno)对小鼠进行免疫,从而评价该重组蛋白在小鼠体内产生的免疫应答水平。试验将20只4周龄的雄性昆明小鼠随机分为A、B、C、D 4个组。免疫A组接种纯化后的重组蛋白rMseno;免疫B组接种经IPTG诱导表达后的重组菌E.coli-Mseno;对照C组接种等量PBS;对照D组接种未经过诱导表达的重组菌E.coli-Mseno。通过ELISA检测方法分别测定血清中抗猪附红细胞体特异抗体水平及γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)细胞因子水平,最后通过脾脏淋巴细胞增殖试验来反映小鼠体内T淋巴细胞的增殖情况。结果显示,构建的重组pET-15b-eno质粒目的基因片段大小为1632 bp,与预期大小相同;纯化的重组蛋白rMseno大小为61 ku,并能够被鼠抗猪附红细胞体血清所识别;免疫A组和免疫B组小鼠血清中抗猪附红细胞体特异抗体水平,IFN-γ、IL-4细胞因子水平以及T淋巴细胞增殖指数均显著或极显著高于对照组(P<0.05;P<0.01)。结果表明,猪附红细胞体eno基因重组蛋白能够诱导小鼠产生较高的体液免疫水平以及细胞免疫应答水平。
- 闫宗斌伍生军杨静闫可心相思宇许应天薛书江柴方红
- 关键词：猪附红细胞体重组蛋白纯化昆明小鼠免疫效果
- 猪附红细胞体eno基因重组蛋白对仔猪免疫效果研究
- 2021年
- 为了研究猪附红细胞体eno基因重组蛋白对仔猪的免疫效果,本研究将9头仔猪随机平均分为3组:免疫组A皮下多点注射免疫纯化的猪附红细胞体重组蛋白rMseno,剂量为2.5 mg/头;免疫组B皮下注射免疫诱导后的重组菌Mseno/E.coli裂解液,剂量为5×10^(8)cfu/头;对照组C接种等量PBS;共免疫2次,2次免疫间隔21 d。在一免后0、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d采集仔猪血清,通过间接ELISA方法检测血清中重组蛋白特异性抗体、IgG_(1)、IgG_(2a)、细胞因子IFN-γ和IL-4水平;流式细胞术检测免疫仔猪CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞水平,评价重组蛋白对仔猪的免疫效果。间接ELISA方法检测结果显示,免疫组A和免疫组B猪血清中重组蛋白特异性抗体、IgG_(1)、IgG_(2a)、细胞因子IL-4和IFN-γ水平均极显著高于对照组C(p<0.01);流式细胞术检测结果显示,免疫组A和免疫组B CD4^(+)T细胞水平极显著高于对照组C(p<0.01);免疫组A和免疫组B的CD8+T细胞水平和CD4^(+)T细胞/CD8+T细胞比值显著高于对照组C(p<0.05);免疫组A与免疫组B比较,上述所测指标均差异不显著(p>0.05)。结果表明,猪附红细胞体eno基因重组蛋白能诱导仔猪产生较高的体液免疫和细胞免疫水平,纯化后的重组蛋白与表达重组蛋白的重组菌裂解液所诱导的免疫效果差异不显著。本研究首次证实猪附红细胞体eno基因重组蛋白对仔猪的免疫效果,为猪附红细胞体病亚单位疫苗的研发提供参考依据。
- 韩金成伍生军闫宗斌于啸洋金鑫李文学许应天薛书江
- 关键词：猪附红细胞体仔猪免疫效果
- 瑟氏泰勒虫病文献综述
- 2017年
- 本文旨在介绍泰勒虫的分类,瑟氏泰勒虫病的临床症状、剖检变化、诊断方法及防治。伴随着全球经济迅速飞快的发展,养牛产业逐渐快速的扩大,瑟氏泰勒虫病的感染区域也随之不断地扩大。这种血液原虫病给我国的养殖业造成了不可挽回的经济损失以及引起兽医界的高度关注,因此,系统全面地了解瑟氏泰勒虫病变得十分必要。
- 赵云伍生军倪婷婷王淼陈健
- 关键词：瑟氏泰勒虫
- 延吉市场犬胴体弓形虫感染情况的初步调查
- 2018年
- 为了调查延吉市场犬胴体的弓形虫感染情况,用间接ELISA法检测了来自延吉市某狗场的72份被检血清。结果显示:在72份血清样本中,共检出11份阳性血清,血清弓形虫抗体总阳性率为15.28%。在40份雄性犬血清中,检出7份阳性血清,阳性率为17.5%;在32份雌性血清中,检出4份阳性血清,阳性率为12.5%,但两者之间不存在统计学差异(p>0.05)。本调查首次证实了延吉市场的犬胴体存在弓形虫感染,这将对人畜造成潜在的威胁,应该引起相关部门的高度重视。
- 蔡佳希郑青山李瑛金清洙伍生军赵云薛书江许应天
- 关键词：弓形虫ELISA
- 延边地区鸡弓形虫血清学的初步调查被引量：4
- 2018年
- 弓形虫病是一种世界性分布的能够在人和多种动物间传播感染的寄生性原虫病。弓形虫感染鸡等家禽后常导致鸡的发育不良,产蛋率下降,严重甚至会致死,给家禽生产带来重大的经济损失[1]。若人类食用弓形虫感染鸡生产的肉制品和蛋,则严重威胁到人类的健康[2]。目前调查结果表明,弓形虫病在人群中的感染率为25%～50%,据估算世界范围内感染弓形虫的人口约占总人口的三分之一[3]。而在动物中,除了猪外,其他动物多呈隐性感染[4]。
- 伍生军赵达卓孙福亮赵云薛书江许应天
- 关键词：弓形虫病血清学弓形虫感染产蛋率下降寄生性原虫病家禽生产
- 高校创新创业教育与专业教育融合模式的研究被引量：1
- 2018年
- 21世纪是创新创业的时代，随着知识经济的推动，国家与国家之间的竞争越来越体现在国民的创新素质与创业能力上。《国家中长期科学和技术发展规划纲要（2006-2020年）》明确指出，到2020年要显著提高国家的自主创新能力，形成较为完善的创新体系，进入全球创新型国家行列。大学生作为建设创新型国家的生力军，其本身创新素质的高低发挥关键性作用。高等教育担负着培养高素质创新创业型人才的重任。
- 薛书江伍生军
- 关键词：创新创业教育专业教育创新型国家创新创业型人才高校
- 猪附红细胞体ENO基因重组腺病毒穿梭质粒的构建及真核表达被引量：3
- 2018年
- 为构建猪附红细胞体ENO基因重组腺病毒穿梭质粒,试验根据GenBank中登录的猪附红细胞体ENO基因序列(登录号:CP002525.1)设计特异性引物,对ENO基因进行PCR扩增,并将纯化后的PCR产物克隆到pMD19-T载体中。用KpnⅠ和XhoⅠ对pMD19T-ENO进行双酶切后,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体PCR^259中,构建PCR^259-ENO重组质粒,提取重组质粒进行鉴定。应用脂质体介导转染法将鉴定正确的PCR^259-ENO重组穿梭质粒转染293细胞,应用间接免疫荧光法(IFTA)检测ENO基因在293细胞中的表达。结果显示,试验克隆的ENO基因长为1 182bp,编码393个氨基酸,与GenBank中ENO基因序列(登录号:CP002525.1)同源性为99%。构建的重组腺病毒穿梭质粒PCR^259-ENO经PCR和酶切鉴定正确,并且能在293细胞中表达,表明ENO基因成功插入腺病毒穿梭质粒PCR^259中,重组腺病毒穿梭质粒PCR^259-ENO构建成功。
- 王淼倪婷婷伍生军赵云宋建臣董亮薛书江
- 关键词：猪附红细胞体
- 猪附红细胞体SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立被引量：5
- 2017年
- 为建一种快速、高效、灵敏的猪附红细胞体(M.suis)检测方法。本研究根据GenBank中的猪附红细胞体α-烯醇化酶(Eno)基因(序列号:AB265823.1),设计并合成了1对引物P5和P6,通过常规PCR方法对Eno基因中的一段序列进行扩增,并将其纯化后的PCR产物克隆入pMD-18T载体中,从而构建重组质粒。以阳性重组质粒为模板,建立了猪附红细胞体SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,并对其灵敏性、特异性进行检测。在1.44×10~6~1.44×10~2拷贝/μL范围内具有较好的线性关系,相关系数R^2=0.965,检测到的浓度下限为1.44拷贝/μL。特异性试验中仅对猪附红细胞体的检测结果呈阳性,而对猪肺炎支原体、弓形虫、猪链球菌、猪呼吸与繁殖综合征病毒的检测结果均呈阴性。重复性试验结果表明,其组内和组间变异系数均小于2.0%。用该检测方法对49份猪附红细胞体疑似血液样品进行检测,所建立的荧光定量PCR方法检测的阳性率为40.8%(20/49),高出常规PCR方法检测的阳性率1.33倍。SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的成功建立,为猪附红细胞体感染的早期诊断及定量分析提供了可靠依据。
- 伍生军倪婷婷张守发许应天孙兴忠薛书江
- 关键词：猪附红细胞体SYBR
- 猪附红细胞体病研究进展
- 2017年
- 附红细胞体（EPerythrozoon）是一类能够引起贫血的病原体，又称为嗜血支原体。附红细胞体病也被称为附红体病、血虫病、红皮病，主要是由附红细胞体寄生在人畜的红细胞表面、血浆所引起的，主要症状表现为贫血、黄疸等，是一种人畜共患病。该病主要靠吸血昆虫来进行传播，也可能和其它疾病混合感染，表现出不同的交叉症状。该病给畜牧业带来了很大的经济损失，尤其是养猪业。
- 王淼倪婷婷伍生军赵云陈健
- 关键词：养猪业人畜共患病症状表现病原体支原体
- 表达猪附红细胞体ENO基因的质粒DNA的构建及免疫效果研究被引量：3
- 2018年
- 试验旨在构建表达猪附红细胞体ENO基因的质粒DNA,并测定其免疫效果。将猪附红细胞体ENO基因克隆到PVAX1真核表达载体上,然后转染到Vero细胞中进行表达并测定其免疫效果。将18只BALB/c小鼠(雌雄各半)随机分为3组(PVAX1-ENO质粒DNA免疫组、PVAX1空载体对照组及PBS对照组),每组6只,每组小鼠对应免疫接种PVAX1-ENO质粒DNA、PVAX1空质粒和PBS。分离血清并通过ELISA方法测定血清中ENO蛋白抗体效价、IgG1和IgG2a抗体水平及IFN-γ和IL-4细胞因子水平。三免2周后每组选取3只小鼠检测CD4+和CD8+含量。结果显示,本试验成功构建了PVAX1-ENO质粒DNA,经PCR和酶切鉴定正确,并能在Vero细胞中成功表达。PVAX1-ENO质粒DNA免疫组ENO蛋白抗体水平、IgG1和IgG2a抗体水平、IFN-γ和IL-4细胞因子水平及CD4+和CD8+含量均显著高于PVAX1空载体对照组及PBS对照组(P<0.05)。结果表明,PVAX1-ENO质粒DNA可显著提高BALB/c小鼠的体液免疫水平,并在一定程度上刺激BALB/c小鼠细胞免疫。
- 赵云伍生军倪婷婷王淼张守发许应天薛书江
- 关键词：猪附红细胞体质粒DNA细胞免疫体液免疫
