韩剑锋
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：四川大学华西药学院靶向药物及释药系统教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA的PEG化脂质体的制备及处方的筛选
- 2014年
- 目的制备一种递送siRNA的PEG化脂质体,通过改变处方中PEG的比例来优化处方。方法采用前体脂质体的方法制备不同PEG含量的阳离子脂质体;用超速离心法分离脂质体siRNA复合物和游离siRNA;用荧光标记法检测siRNA,求得各处方脂质体对SiRNA的包封率;考察不同处方脂质体在血清中的稳定性;测定不同处方脂质体在A549细胞上的毒性和摄取效率;筛选最终脂质体处方并测定其粒径、电位,观察形状。结果选定5%PEG含量的脂质体为最终的处方,其在50%血清中的稳定性良好,在A549细胞上的摄取效率较高且无细胞毒性,siRNA与其的包封率为72.43%,siRNA形成复合物后的形态电镜结果显示良好。结论选定和制备了具有良好体外理化性质的PEG化脂质体递送siRNA。
- 张梦甜韩剑锋吴称玉孙逊
- 关键词：前体脂质体SIRNA处方筛选
- 人血清白蛋白降解片段的分离纯化被引量：1
- 2013年
- 目的用柱层析法分离纯化人血清白蛋白降解片段,优选最佳工艺。方法首先采用葡聚糖凝胶Sephadex G-100和Superdex 75对人血清白蛋白降解产物进行分离纯化,再用羧甲基纤维素和DEAE-纤维素在不同pH的磷酸盐缓冲液中下进一步纯化,通过分离度、蛋白回收率优选最佳工艺。结果 Superdex 75比Sephadex G-100分离效果好,将人血清白蛋白降解产物分离纯化为粗品Ⅰ和Ⅱ,蛋白回收率为61.82%±2.01%;羧甲基纤维素较DEAE-纤维素分离效果好,将粗品Ⅰ分离纯化为人血清白蛋白多肽片段A299-585,蛋白回收率为62.07%±1.12%;将粗品Ⅱ分离纯化为人血清白蛋白多肽片段A1-123和A124-298,蛋白回收率为66.29%±1.79%。结论 Superdex 75和CM-Sepharose FF不仅对人血清白蛋白的降解产物具有良好的分离度,而且有较好的蛋白回收率。
- 何夏凯韩剑锋袁志翔徐超群
- 关键词：人血清白蛋白分离纯化分离度
- 小分子聚乙烯亚胺与腺病毒结合增强基因转染效率的研究
- 2012年
- 目的提高重组腺病毒在细胞中,特别是缺乏柯萨奇腺病毒受体的细胞中的转染效率。方法将阳离子材料聚乙烯亚胺PEI与重组腺病毒通过电荷作用形成复合物,用激光粒度仪及电位分析仪测定其粒径和电位;以表达β半乳糖苷酶的重组腺病毒作为模型病毒,研究其在富含(A549)或者缺乏(MDCK、LLC)柯萨奇腺病毒受体细胞中的转染效率和毒性,并用荧光标记复合物,观察其进入细胞的能力。结果与聚乙烯亚胺结合形成复合物可明显促进腺病毒进入细胞的能力,从而提高腺病毒在各种细胞中的转染效率,同时发现小分子的PEI-2 kD由于其较好的生物相容性,对腺病毒进入细胞后的传递影响较小,所以最终的基因传递效率要显著优于PEI-25 kD;PEI-2 kD在本复合物中表现出的细胞毒性要小于PEI-25 kD。结论PEI-2 kD可以用于病毒载体和非病毒载体结合的基因传递研究。
- 陈思穆韩剑锋曾琴万瑜孙逊
- 关键词：聚乙烯亚胺腺病毒基因传递
