施鹜丹
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学附属第四医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省海外学人科研资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Bikunin的分子克隆及真核分泌型表达载体的构建和表达被引量：1
- 2011年
- 目的构建含有Bikunin的哺乳类细胞表达载体pSecTag2B-Bikunin,应用哺乳类细胞表达系统,表达分泌型Bikunin融合蛋白。方法用RT-PCR方法,从人肝细胞系L02扩增Bikunin编码区序列,将其克隆于pMD18-T Simple Vector中构建pMD18-T-Bikunin,经酶切、PCR及测序鉴定后,将Bikunin亚克隆至哺乳类细胞表达载体pSecTag2B中。用磷酸钙法转染NIH3T3细胞,24 h后,Western blot检测浓缩25倍的细胞培养上清中融合蛋白的表达。结果成功构建含有Bikunin的哺乳类细胞表达载体pSecTag2B-Bikunin。用磷酸钙法转染NIH3T3细胞,24 h后,Western blot检测浓缩25倍的细胞培养上清,有融合蛋白的表达。结论本实验成功克隆并在真核表达系统表达了分泌型Bikunin。
- 刘毕欧孙国勋赵明明施鹜丹康鹏云洪珞珈张辰宇
- 关键词：BIKUNIN分子克隆
