胡鹏
- 作品数：9 被引量：21H指数：3
- 供职机构：上海海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 低温胁迫对鱼类PI3K/AKT/GSK-3β信号通路的影响被引量：9
- 2016年
- 为探讨PI3K/AKT/GSK-3β信号通路在鱼类低温胁迫中的分子机制,利用3种抗寒能力不同的鱼类:斑马鱼(Danio rerio)、罗非鱼(Oreochromis niloticus)和草鱼(Ctenopharyngodon idellus),对其进行低温胁迫(8℃),监测这3种鱼鱼鳃中PI3K/AKT/GSK-3β信号通路中蛋白表达情况。结果表明:1)在相同低温胁迫下,3种鱼运动能力为:草鱼>斑马鱼>罗非鱼;2)Western blot结果表明:在罗非鱼中,低温抑制了p-PTEN蛋白的表达;诱导了AKT、p-AKT(Ser 473)和p-GSK-3β(Ser 9)蛋白的表达。在斑马鱼和草鱼中,低温都抑制了AKT和p-AKT(Ser473)蛋白的表达;诱导了p-GSK-3β(Ser 9)蛋白的表达。尽管低温一致性诱导p-GSK-3β(Ser 9)在3种鱼中的表达,但其呈现不同的变化倍数:罗非鱼中p-GSK-3β蛋白的上升倍数显著高于其他两种鱼。低温诱导了PI3K/AKT/GSK-3β信号通路,在不同低温耐受能力的鱼中呈现出不同的表达模式,这些物种特异性的表达模式可能会影响鱼类低温下不同的耐受能力。
- 王金凤胡鹏牛虹博陈良标
- 关键词：低温胁迫AKTGSK-3Β信号通路
- dusp1敲降对低温诱导斑马鱼ZF4细胞凋亡的作用被引量：3
- 2017年
- 为了研究双特异性磷酸酶(dual-specificity phosphatase 1,dusp1)基因与鱼类低温诱导的细胞凋亡之间的关系,本研究经Eco RI和Age1酶切构建plko.1-dusp1-sh RNA1,plko.1-dusp1-shRNA2,plko.1-negative control(nc),plko.1-EGFP的重组质粒,并分别与慢病毒包装质粒pCMV-DR8.9.1、pCMV-VSVG共同转染至293T细胞中,经293T细胞包装的病毒,感染斑马鱼(Danio rerio)胚胎成纤维样细胞(zebrafish embryos fibroblast like cell line,ZF4),RT-PCR检测表明dusp1成功被敲降。经嘌呤霉素筛选获得稳定表达细胞系,将细胞于28℃培养(正常对照组)或经10℃低温处理10 d,使用annexin V-FITC/Propidium lodide(PI)双色标记流式细胞术检测ZF4细胞凋亡情况。结果显示:低温胁迫下dusp1敲降的细胞凋亡(dusp1-shRNA1敲降,dusp1-kd1;dusp1-shRNA2敲降,dusp1-kd2)比例较nc组显著上调,其中早期凋亡和晚期凋亡细胞比例dusp1-kd1显著高于nc组,并且dusp1-kd1活细胞数显著低于nc组(P<0.05),进一步证明dusp1参与鱼类冷应激过程,并在低温情况下保护细胞。该研究为后期对斑马鱼细胞低温胁迫实验奠定了基础,其中dusp1基因沉默型斑马鱼细胞在10℃低温处理10 d凋亡数显著大于对照组,证明dusp1在细胞凋亡信号通路中起到重要调控作用,为低温下研究斑马鱼基因的分子机制提供新的思路。
- 牛虹博胡鹏程鹏丽储旭胡春兰陈良标
- 关键词：慢病毒SHRNA低温胁迫
- Asb15b基因和Asb14a基因的应用及减少鱼类肌间骨的方法
- 本发明属于基因工程技术领域，利用CRISPR/Cas9技术分别敲除了Asb15b、Asb14a基因，结果显示Asb15b基因或Asb14a基因敲除的斑马鱼较野生WT斑马鱼肌间骨减少约40％和约35％，证明Asb15b基因...
- 陈良标王化敏牛明慧胡瑞芹胡鹏吴智超
- 斑马鱼ciarta基因启动子低温诱导核心区域的鉴定
- 2016年
- 之前研究表明在低温胁迫下斑马鱼多个组织中,circadian associated repressor of transcription a(ciarta,也称为c1orf51)基因被广泛诱导表达。为了鉴定ciarta启动子中受低温响应的最敏调控区域,克隆5个不同长度的截短片段(-1 992^+100 bp,-1 354^+100 bp,-881^+100 bp,-634^+100 bp和-247^+100 bp),插入到荧光素酶报告载体p GL4.10中,随后将载体转染到斑马鱼来源的ZF4细胞中,研究这5个截短片段低温诱导基因表达的能力。结果表明,低温条件下,5个截短片段都能显著诱导下游基因的表达,其中-881^+100 bp截短片段表现出最高的启动子活性(达5.61±0.53倍)。通过对启动子中转录因子结合位点的预测结果进行分析发现,与-634^+100 bp截短片段相比,-881^+100 bp截短片段含有一个已知的低温调控元件(BCL6的结合位点),进一步证实BCL6的结合位点具有低温诱导基因表达的能力。实验鉴定出的ciarta启动子低温诱导核心区域可以作为一个工具来诱导基因在低温下的表达,为相关研究提供帮助。
- 张东胡鹏陈良标
- 关键词：斑马鱼启动子BCL6基因表达
- 裂腹鱼类转录组比较分析揭示青藏高原鱼类的适应性进化
- 裂腹鱼是一类分布在青藏高原的鲤科鱼类,为了研究裂腹鱼类对青藏高原的适应性进化,我们对两个高海拔和两个亚高海拔的裂腹鱼多个组织进行了转录组测序,并通过和两种平原鲤科鱼类比较分析鲤科鱼类的基因进化模式。进化树重建和分歧时间估...
- 俞梦超张东升胡鹏陈良标
- 关键词：适应性进化造血作用裂腹鱼
- 文献传递
- 低温调节鱼类发育的几个例子及其分子机制研究
- 陈良标许强华胡鹏李文豪
- 低温胁迫诱导斑马鱼ZF4细胞ROS及MAPK相关蛋白表达的影响被引量：10
- 2016年
- 为了研究鱼类低温下分子调控机制及其与活性氧(reactive oxygen species,ROS)之间的关系,本实验对斑马鱼(Danio rerio)胚胎成纤维ZF4细胞进行不同程度的低温胁迫(18℃和10℃),监测其在不同低温胁迫时间下(1 d、3 d和5 d)ROS的变化以及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路中蛋白的表达情况。结果显示:(1)DCFH-DA探针法表明在低温胁迫作用下,细胞内ROS含量增加。细胞内ROS上升水平与外界胁迫压力成正相关。低温处理3 d后,18℃和10℃的细胞,其ROS含量与对照组(28℃)相比分别显著升高到(1.23±0.04)倍(P<0.05)和(2.31±0.08)倍(P<0.05)。(2)Western Blot检测磷酸化的p38(p-p38)和磷酸化的JNK(p-JNK p54和p-JNK p46)的水平变化,结果显示低温胁迫可以使p38和JNK的活性增强,且均在10℃处理3 d达到最高水平。(3)进一步检测DNA断裂标记蛋白γH2A.X的表达水平,结果显示,无论在18℃还是10℃,其在第3天呈现高表达。本实验初步证实低温胁迫能够诱导斑马鱼细胞ROS的产生;通过对不同时间点的蛋白表达水平检测,发现p-JNK、p-p38和γH2A.X激活时间点与低温诱导ROS表达时间点相吻合。该研究为后期对斑马鱼细胞低温胁迫实验奠定基础,其中低温下处理3 d可以作为一个检测各个蛋白变化的关键时间点。
- 许琼琼韩兵社罗军涛李艳侯艳雯胡鹏张俊芳
- 关键词：ROSMAPKS
- 一种prmt2基因突变体及罗非鱼抗菌品系的构建方法
- 本发明涉及分子生物学和水产育种，具体涉及一种基于CRISPR/Cas9技术敲除获得prmt2基因突变体，以及建立prmt2基因敲除的罗非鱼抗菌品系。通过敲除该基因，可获得抗无乳链球菌的罗非鱼品系。通过感染实验发现，与野生...
- 陈良标胡鹏杨嘉龙李玮鲁纪刚翟雪
- 低温压力诱导斑马鱼ZF4细胞MAPK通路及ROS作用机制的初步研究
- 为了研究鱼类低温下分子调控机制,及其与活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)之间的关系。本实验对斑马鱼ZF4细胞进行不同程度的低温胁迫(18°C和10°C),监测其在不同低温胁迫时间下(1d、3...
- 许琼琼韩兵社罗军涛李艳胡鹏张俊芳
- 关键词：ROSMAPK
- 文献传递
