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大口黑鲈生长性状的微卫星DNA标记筛选被引量：32: 2009年; 本研究在人工养殖的大口黑鲈（Micropterus salmoides L．）群体中对40个微卫星位点进行扩增，运用卡方检验分析微卫星位点在极端大个体组和极端小个体组中的基因型分布差异，选择差异显著的16个微卫星位点对大口黑鲈随机群体进行基因型与性状的关联分析，同时分析群体的遗传多样性。结果表明：关联分析得到7个微卫星位点（JZL60、JZL67、JZL72、JZL124、MiSaTPW76、MiSaTPW117和MiSaTPW173）与体重、体长和体高显著或极显著相关（P〈0．05或P〈0．01），同时对差异显著的位点进行不同基因型间与生长性状的多重比较，找到了与体重、体长和体高性状相关的最有利基因型为JZL60位点的AA、JZL67位点的BB、JZL72位点的AC、MiSaTPW76位点的BB和MiSaTPW117位点的BC。应用这16个微卫星位点对随机群体进行遗传多样性分析，共检测到47个等位基因，平均等位基因2．938个，每个位点检测到的等位基因数为2-5个、群体的平均观测杂合度、平均期望杂合度和平均多态信息含量分别为0．515、0．500和0．445，表明该群体遗传多样性处于中等水平。; 樊佳佳白俊杰李小慧何小平何小燕李胜杰叶星吴立新; 关键词：大口黑鲈微卫星生长性状

微卫星DNA标记在大口黑鲈亲权鉴定中的应用被引量：9: 2009年; 【目的】探讨微卫星DNA标记在大口黑鲈(Micropterus salmoides)亲权鉴定中的可行性,为大口黑鲈家系选育的系谱精确鉴定和选育效果评价提供依据。【方法】选择12个多态信息含量较高的微卫星DNA位点,以人工选育建立的大口黑鲈5个全同胞家系为试验材料,采用Cervus 3.0进行亲权分析,并根据家系内个体间的遗传距离进行UPGMA聚类分析。【结果】所选的12个微卫星DNA多态位点在102个子代中的平均等位基因数(A)为3,平均观测杂合度(Ho)为0.594 8,平均期望杂合度(He)为0.545 7,平均多态信息含量(PIC)为0.475 9。Cervus3.0亲权分析表明,在置信度为95%时,使用12个和10个位点,模拟和实际分析的判别成功率分别为96%和98%,87%和91%;而置信度为99%时,分别为78%和92%,64%和86%;在置信度为99%和95%时,判别准确率皆在90%以上。从12个位点中挑选10个多态信息含量高的微卫星DNA位点,即可将102个子代完全准确地聚为5个群体。亲权分析结果与聚类分析结果一致。【结论】所选用的12个微卫星位点可用于大口黑鲈亲权鉴定研究,其判定成功率和准确率较高,结果可靠。; 何小燕白俊杰刘小林樊佳佳何小平李胜杰叶星; 关键词：微卫星聚类分析

大口黑鲈肌肉生长抑制素多克隆抗体的制备及其对仔鱼生长影响被引量：6: 2009年; 肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)是抑制肌肉生长和发育的生长调控因子。将大口黑鲈(Micropterus salmoides)MSTN成熟肽cDNA改造后克隆到pET32a(+)载体上,构建原核表达质粒,在大肠杆菌BL21中进行表达。SDS-PAGE检测表明重组表达的融合蛋白分子大小约28kD,含量为菌体总蛋白的34%。用纯化后的表达蛋白免疫新西兰兔制备抗大口黑鲈MSTN多克隆抗体,Western blot和ELISA检测证实所获得的抗体可与抗原蛋白特异性结合,抗体的效价为1∶62500。将获得的抗体显微注射到大口黑鲈的受精卵卵黄区,结果显示具有促进仔鱼生长的作用。; 张宁宁白俊杰李胜杰叶星何小平夏仕玲杜晓东; 关键词：大口黑鲈 MSTN 原核表达多克隆抗体仔鱼

转红色荧光蛋白基因唐鱼的遗传分析和生物学研究被引量：11: 2009年; 转红色荧光蛋白基因唐鱼(Tanichthys albonubes)测交获得实验鱼,以表达红色荧光蛋白为表型性状,采用点杂交和遗传学分析相结合的方法,研究外源基因的遗传传递规律,并对转基因唐鱼和非转基因唐鱼的生长和繁殖等方面进行了比较。结果显示:测交后代表型的分离规律基本符合经典的孟德尔单显性基因遗传模式,外源基因属于单位点整合,测交后代中没有发现沉默整合个体;实验鱼的生长和可量性状对比实验表明,转基因唐鱼和非转基因唐鱼在仔鱼期到性成熟之间,生长速度无显著差异,性成熟个体的外部形态除体色外也无差别,繁殖力方面基本无显著差异。本研究结果表明了培育转红色荧光蛋白基因唐鱼纯系的可行性;同时在生长、繁殖方面的研究结果为评价转基因唐鱼的生态安全奠定了基础。; 陈敏白俊杰何小平简清叶星吴立新姜鹏; 关键词：转基因鱼唐鱼红色荧光蛋白

大口黑鲈肌肉生长抑制素前肽真核表达载体的构建及其在肌肉组织中的表达被引量：2: 2009年; 将大口黑鲈(Micropterus salmoide)肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)前肽(MSTN-Pro)的cDNA定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)/mycHisB中,双酶切检测和测序鉴定证实,插入pcDNA3.1(-)/mycHisB载体中的片段为目的基因的核苷酸序列,MSTN基因前肽cDNA为正向插入,且重组质粒无错配或插入移位等突变。采用肌肉注射法将重组表达质粒注入大口黑鲈背部肌肉组织,在注射后第2天经RT-PCR检测到MSTN前肽基因mRNA的表达,第6天经免疫组化学检测到MSTN前肽蛋白的表达,第8天蛋白表达强度增强,对照组始终未检测到MSTN前肽基因的表达。; 张宁宁白俊杰何小平郭玉函叶星李胜杰杜晓东; 关键词：大口黑鲈真核表达肌肉注射

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何小平