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伍炳华: 作品数：25 被引量：20H指数：3; 供职机构：福建农林大学园艺学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学文化科学经济管理医药卫生更多>>

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一种双诱导同源重组无标记载体质粒及其应用: 本发明属于生物技术领域，提供一种双诱导同源重组无标记载体质粒及其应用，所述的质粒序列如SEQ ID NO.1所示。应用点特异重组的逆反应系统，可将质粒定位地插入目标基因组，并通过温度诱导同源重组酶的表达，使得原有质粒载体...; 缪颖伍炳华任育军

双瓣茉莉JsCYP71A基因的克隆和真核表达: 2021年; 基于双瓣茉莉[Jasminum sambac(L.)Aiton]的花、叶转录组,筛选了一个在花朵中高表达且与香气释放规律对应的P450基因进行克隆和表达模式分析。利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得该基因的5ʹcDNA序列,与转录组中序列进行拼接并验证,显示该基因是一个含1545 bp的开放阅读框、编码514个氨基酸残基的蛋白。此P450蛋白具有特征性的亚铁血红素结合结构域和半胱氨酸残基,与油橄榄、小叶咖啡等其他植物CYP71A氨基酸序列同源性较高,将其命名为JsCYP71A。遗传进化分析显示,该蛋白与拟南芥P450家族中CYP82亚族CYP82G亲缘关系最近。CYP71A和CYP82G多个成员与萜类香气代谢相关,推测JsCYP71A蛋白有相似功能。JsCYP71A在茉莉花白花苞里的表达量最高,在茎中的表达量较低,在叶片中几乎不表达,茉莉花开放过程中,JsCYP71A在夜间11点和1点表达量高,白天表达量低,与萜类香气物质释放呈正相关。JsCYP71A定位于细胞质中。为获得异源表达蛋白,构建真核表达载体,在酵母BY4742株系中表达JsCYP71A,经Western Blot检测发现株系能成功表达大小约60 kDa的蛋白,为后续JsCYP71A酶学功能分析奠定基础。本研究结果为分析JsCYP71A在茉莉花萜类香气合成代谢中的作用提供参考。; 袁媛刘予涵李建昆万超张月陈清西伍炳华; 关键词：茉莉花 P450 基因克隆亚细胞定位真核表达

一种以叶片为外植体的杜鹃花转基因方法: 本发明公开了一种以叶片为外植体的杜鹃花转基因方法，属于分子生物学技术领域。该方法用叶片作为外植体，外植体经消毒和与培养后直接进行农杆菌侵染转化，相较于获得愈伤组织后再用农杆菌侵染愈伤组织更为节省时间。外植体消毒后的预培养...; 王婷潘晶洁张永艳伍炳华; 文献传递

茉莉花JsMYB305转录因子互作蛋白的筛选及验证: 2022年; 【目的】茉莉花JsMYB305是参与萜烯合成酶(Terpene synthetases,TPS)基因调控茉莉花香气的转录因子。本研究旨在进一步分析JsMYB305转录因子调控茉莉花香气物质代谢的可能机制。【方法】基于茉莉花瓣酵母文库,以白色花苞和完全开放时的茉莉花为材料构建双杂交文库,通过酵母双杂交的方式筛选JsMYB305的互作蛋白并进行鉴定和验证。【结果】JsMYB305全长具有显著的自激活性,分别扩增不同长度的片段进行自激活验证,当编码长度≤510 bp时,JsMYB305没有自激活性。进一步以pGBKT7-JsMYB305(510 bp)为诱饵,从酵母双杂交文库中筛选到1个互作蛋白,经鉴定为水杨酸甲酯转移酶(Salicylic acid carboxyl methyltransferase,SAMT)蛋白。酵母定向双杂验证表明JsMYB305与JsSAMT具有相互作用。【结论】SAMT属于苯丙烷/丙环生物合成途径,故JsMYB305转录因子也参与了茉莉花苯丙烷/丙环类香气物质合成过程。研究结果为进一步深入研究JsMYB305在茉莉花香气合成中的调控机理提供了参考。; 胡莉万超张蕖陈清西伍炳华袁媛; 关键词：茉莉 MYB转录因子酵母双杂交

中国水仙SWEET基因在开花及鳞茎膨大过程的表达分析: 2024年; SWEET转运蛋白通过交替转运机制介导单糖和二糖双向跨膜运输,在植物的生长发育过程中糖的分配和利用起关键作用。本研究基于水仙(Narcissus tazetta var. chinensis)转录组分析获得的9条在花器官中表达量相对较高的9个SWEEET基因,这些NtSWEETs在SWEET家族的4个分支中皆有分布。在水仙开花过程中,NtSWEET1a、NtSWEET1b和NtSWEET4b基因在花被片中的表达水平随着花朵的开放表达量逐渐上升,其他基因则无明显规律;在花芽分化过程中,NtSWEET1a、NtSWEET1b和NtSWEET13既有较高的表达水平,又在鳞茎中各组织里的表达水平随着花芽分化而逐渐上升;在水仙鳞茎膨大期间,NtSWEET1a在鳞茎膨大期间保持较高的表达量,且随着鳞茎的膨大表达水平上升。进一步利用酵母功能互补实验分析这些SWEET蛋白对葡萄糖、半乳糖、甘露糖、果糖、蔗糖的转运功能,发现NtSWEET1a可以转运葡萄糖和半乳糖,暗示NtSWEET1a在开花、花芽分化及鳞茎膨大过程中参与了糖的转运,特别是葡萄糖和半乳糖的转运有重要作用。; 徐静魏培宁杨静文吕美玲伍炳华袁媛; 关键词：中国水仙 SWEET 转运蛋白开花

茉莉花JsMYB305转录因子的原核表达及蛋白纯化被引量：2: 2022年; 【目的】获得茉莉花香气调控转录因子JsMYB305的重组蛋白,为深入研究JsMYB305调控茉莉萜类香气代谢的分子机理及筛选其他互作蛋白提供基础。【方法】通过酶切连接的方式,将JsMYB305的编码序列构建到原核表达载体pGEX-4T-1,转化BL21(DE3)表达菌株,通过IPTG诱导蛋白表达、GST亲和树脂分离纯化,最后Western Blot鉴定重组蛋白。【结果】重组蛋白的诱导条件为0.2 mmol·L^(−1) IPTG,最适宜纯化的温度和时间为28℃诱导4 h,经20 mmol·L^(−1) GSH洗脱的蛋白纯度较好,Western Blot结果表明重组蛋白的大小正确。【结论】成功获得了JsMYB305重组蛋白,为后期利用GST-pull down技术筛选互作蛋白及EMSA研究JsMYB305对特定启动子位点的结合提供基础。; 万超张月胡莉伍炳华袁媛; 关键词：茉莉花 MYB转录因子原核表达蛋白纯化

福建省茉莉花产业发展的SWOT分析被引量：2: 2017年; 福建省是中国茉莉花的起源地,茉莉花产业对福建省促进农村发展和加快经济建设具有重要的意义。该文运用SWOT方法分析了福建省茉莉花产业的优势、劣势、机遇和挑战,在此基础上提出转变产业发展方式,加强新品种的创新力度,延伸产品的产业链和价值链,构建富有本土特色的文化体系和全面推广茉莉花的生态种植体系的措施和建议。; 龙思宇王宇婷王威伍炳华; 关键词：SWOT分析法

一种双诱导同源重组无标记载体质粒及其应用: 本发明属于生物技术领域，提供一种双诱导同源重组无标记载体质粒及其应用，所述的质粒序列如SEQ ID NO.1所示。应用点特异重组的逆反应系统，可将质粒定位地插入目标基因组，并通过温度诱导同源重组酶的表达，使得原有质粒载体...; 缪颖伍炳华任育军; 文献传递

一种创制高香型矮牵牛新种质的分子方法: 本发明的目的在于提供一种创制高香型矮牵牛的分子方法。本发明实现方法：本发明的目的在于提供一种创制高香型矮牵牛新种质的分子方法。该方法以遗传转化的手段，能够特异性地在矮牵牛花瓣中获得香气合成酶基因的高度表达，包括启动子的合...; 袁媛何弦张月伍炳华; 文献传递

一种改变矮牵牛开花节律的分子方法: 本发明的目的在于提供一种调控矮牵牛开花时间的分子方法。本发明实现方法：利用花特异性表达启动子和生物钟基因共同调控植物开花节律的分子方法，结合遗传转化的手段实现。包括启动子的合成、LHY基因的扩增、载体构建，以组织与细胞操...; 张梦吕美玲伍炳华刘卓毅; 文献传递

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