郭艳
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Toll样受体介导小鼠原代肝细胞产生的天然免疫应答及其对乙型肝炎病毒复制的抑制作用被引量：9
- 2011年
- 目的探讨肝细胞的Toll样受体（TLR）信号途径及其诱导的抗病毒免疫应答。方法分离野生型C57BL／6小鼠的原代肝细胞，定量逆转录一聚合酶链反应法检测TLR的表达。分别用TLR1～9配体刺激肝细胞并收集细胞上清液。酶联免疫吸附法检测细胞上清液内的细胞因子。病毒保护实验检测细胞上清液的抗脑膜炎心肌炎病毒因子，并将细胞上清液与HBV-Met细胞共孵育，用Southernblot法检测其对HBV复制的抑制效应。结果原代肝细胞能表达TLR1～9。与其TLR表达谱相应的，肝细胞在TLR1～9配体的刺激下均可以产生炎性细胞因子（肿瘤坏死因子α和白细胞介素6），而仅在TLRl、TLR3、TLR7和TLR9配体刺激下可产生I型干扰素（干扰素α和干扰素β）。在病毒保护实验中，TLR3和TLR7的配体可以刺激肝细胞产生大量的抗脑膜炎心肌炎病毒效应分子；而TLRl、TLR3和TLR4配体直接刺激的肝细胞上清液，以及TLR3、TLR7和TLR9配体转染刺激的肝细胞上清液，都能有效抑制HBV的复制。结论小鼠原代肝细胞有独特的TLR信号途径，并能通过TLR配体的激活产生抑制HBV复制的效应。这一发现对于制定基于TLR的抗肝脏靶向性病毒的治疗措施有指导意义。
- 吴珺陈明发夏幼辰郭艳林永孙潺张春燕陈妍刘慎沛郝友华陆蒙吉JorgF.Schlaak杨东亮
- 关键词：肝细胞TOLL样受体免疫肝炎病毒
- 小鼠TIM-3原核表达载体的建立及多克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的:克隆小鼠TIM-3基因,构建原核表达载体,制备相应的多克隆抗体并初步鉴定。方法:以小鼠脾细胞总RNA为模板,用RT-PCR方法,扩增得到TIM-3基因编码区,构建pRSET-B-TIM-3原核表达载体;经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白;然后常规免疫家兔,制备多克隆抗体;用ELISA方法检测抗体的效价,用Western blot、免疫组化、流式细胞术检测抗体的特异性。结果:成功构建的原核表达载体pRSET-B-TIM-3在大肠杆菌中诱导后可以高效表达TIM-3蛋白;免疫获得的多克隆抗体经过ELISA检测,抗体效价为1∶320 000,经Western blot、免疫组化和流式细胞术等鉴定,抗体的特异性较好。结论:成功克隆出小鼠的TIM-3基因,构建了原核表达载体,制备的兔抗小鼠TIM-3多克隆抗体具有较高的效价和良好的特异性。
- 马德强郝友华刘敏徐春利郭艳陈悦陆孟吉杨东亮
- 关键词：TIM-3蛋白多克隆抗体
