解凤立
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 抑肽酶间接竞争ELISA微量检测方法的建立被引量：3
- 2010年
- 将抑肽酶标准品和BSA交联后免疫新西兰大耳兔,辛酸-硫酸铵法从抗血清中纯化IgG抗体。用纯化的抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗羊抗兔IgG建立间接竞争ELISA法,用于抑肽酶基因工程菌的大规模快速筛选。该测定方法线性范围为20～500 ng/mL,灵敏度为2.554 ng/mL。建立的间接竞争ELISA法灵敏度高、特异性好,可用于抑肽酶基因工程菌构建过程中的大规模筛选。
- 解凤立徐彦宾黄翠翠何华吴梧桐谭树华
- 关键词：抑肽酶间接竞争ELISA多克隆抗体
- 毕赤酵母菌分泌表达重组抑肽酶的高密度发酵工艺研究被引量：3
- 2011年
- 目的:对毕赤酵母高密度表达重组抑肽酶的发酵工艺进行探讨。方法:先通过摇瓶培养方法,确定表达抑肽酶的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需的最佳配方。在此基础上,采用分批补料培养方法,对毕赤酵母pSA/GS115进行高密度发酵。紫外吸收法测定重组抑肽酶竞争性抑制胰蛋白酶对底物BAEE的水解活性。结果:BSM培养基中毕赤酵母生长必需的最佳配方为甘油40 g.L-1、氨水单次补加量0.1%、甲醇流加量1%。经过毕赤酵母高密度发酵,发酵液上清中蛋白的表达量为37.08 mg.L-1,目的蛋白活性达到4 450 BAEEU.ml-1,比摇瓶培养表达提高了8倍。结论:本发酵工艺可实现酵母工程菌的高密度表达发酵,其发酵产物具有较高的生物活性,为下一步大规模化制备抑肽酶奠定了基础。
- 刘振云沈露解凤立谭树华
- 关键词：毕赤酵母高密度发酵抑肽酶
