王星博
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家蛋鸡产业技术体系建设项目国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 宿主hnRNPs蛋白在A型流感病毒感染细胞过程中作用机制研究
- A型流感病毒是引起流行性感冒的主要病原体,严重威胁着人类的生命和健康安全。A型流感病毒为有囊膜的单股负链RNA病毒,是少数在细胞核内进行转录复制的RNA病毒,其基因组分为8个节段,分别编码不同的病毒蛋白。A型流感病毒极易...
- 王星博
- 关键词：A型流感病毒NS1
- 文献传递
- A型流感病毒PB1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2020年
- 以A型流感病毒A/Chicken/Zhejiang/YH/2/2013(H7N9)的PB1基因为模板,扩增其1519~2274bp间的片段,并构建原核表达载体pET-28a(+)-H7N9-sPB1。通过大肠杆菌原核表达获得重组蛋白His-sPB1后,以其作为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合筛选获得3株能够稳定分泌单克隆抗体的细胞株5G5、2H3和5E8。Western-blot和IFA检测表明,3株单克隆抗体对于不同亚型的流感病毒均具有良好的反应性。免疫共沉淀结果表明,3株单克隆抗体能用于免疫共沉淀试验。A型流感病毒PB1蛋白单克隆抗体的制备为进一步研究PB1蛋白的结构与功能以及流感病毒的监测与诊断提供了必要的工具。
- 钟亦晔石柳媛王星博杨辉颜焰廖敏周继勇
- 关键词：流感病毒单克隆抗体
- 3株H3N2亚型禽流感病毒的基因组特征与演化分析
- 2022年
- 旨在了解浙江地区家禽H3N2亚型禽流感病毒(AIV)的流行变异情况,采用RT-PCR技术对2021年浙江923份样品进行检测,对AIV分离株进行分子特征及遗传演化分析。结果表明,AIV样品阳性率为7.69%(71/923);共分离到2株鸡源和1株鸭源H3N2亚型AIVs,其HA和NA基因相似性分别为93.4%~100%和94.0%~99.9%,分离株内部基因片段来源复杂,与H1N2、H1N4、H10N7等亚型亲缘关系密切;遗传进化分析显示,H3N2亚型AIV主要流行于华东地区,鸭是其主要宿主,3株H3N2亚型分离株HA和NA基因均属于禽源进化分支;分离株HA蛋白裂解位点均为PEKQTR↓GLF,符合低致病性禽流感病毒特征,HA蛋白与受体结合相关位点为226Q和228G,PB2蛋白与哺乳动物适应性相关的氨基酸位点为627E,均不同于人流感病毒对应蛋白的相关位点(226L、228S和627K),推测其跨种传播至人的潜力较低;分离株PB1蛋白的66位氨基酸突变为S,提示其对哺乳动物的致病性可能增强。综上所述,本研究分离的H3N2亚型AIV符合低致病性禽流感病毒特征,基因片段来源复杂,跨种传播至人的潜力较低,但是否影响对宿主的致病性仍需进一步探究。
- 崔明仙王星博黄彦铭卞希一冯梦珂颜焰董伟仁周继勇
- 关键词：遗传进化
- 不同原核表达载体对非洲猪瘟病毒CD2v蛋白可溶性表达及免疫反应性比较被引量：1
- 2023年
- 本研究旨在系统性地探究不同原核表达载体对非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的可溶性表达差别,并利用临床非洲猪瘟病毒抗体阳性血清比较包涵体和可溶性CD2v蛋白的免疫反应性。利用5种原核表达载体pCold-TF、pET28a、pMAL-C6T、pGEX-4T-1、pET32a分别表达去除信号肽和跨膜区的非洲猪瘟病毒CD2v蛋白,利用镍-氨三乙酸(nickel-nitrilotriacetic acid,Ni-NTA)亲和层析法分别纯化源自pET28a和pCold-TF表达载体的包涵体和可溶性CD2v蛋白,并用间接酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法比较纯化蛋白的免疫反应性。结果显示,pCold-TF载体以表达可溶性蛋白为主,pMAL-C6T载体同时表达包涵体和可溶性蛋白,而其他载体主要表达包涵体蛋白。临床非洲猪瘟病毒抗体阳性血清检测数据显示,可溶性蛋白的免疫反应性显著优于包涵体蛋白(P<0.05)。pCold-TF载体的触发因子(trigger factor,TF)标签可促进CD2v蛋白的可溶性表达,其表达蛋白的免疫反应性优于包涵体蛋白。本研究结果为CD2v蛋白的免疫原性研究奠定了基础,亦为其他重要抗原的可溶性表达提供了思路。
- 冯梦珂王星博林璐璐崔明仙颜焰颜焰
- 关键词：非洲猪瘟病毒原核表达可溶性表达免疫反应性
- A型流感病毒NS1蛋白单克隆抗体的制备及其亚细胞定位分析被引量：2
- 2016年
- 以A型流感病毒A/Swine/Guangdong/(H3N2,H3病毒)株的基因组作为模板,扩增NS1基因并构建原核表达载体p ET-28a(+)-NS1。以大肠杆菌表达的NS1蛋白为抗原免疫小鼠,制备单克隆抗体,获得了2株分泌单克隆抗体细胞株2H9和3A4。IFA和Western-blot检测显示,抗NS1单克隆抗体与H3病毒感染的细胞有良好的反应性和特异性。亚细胞定位分析显示,H3N2病毒的NS1聚集于核仁处,H1N1病毒NS1聚集于核内周边,PR8毒株的NS1少部分在核内聚集、多数胞质呈颗粒状分布。流感病毒NS1单克隆抗体的制备为流感病毒流行病学监测、鉴别诊断及对其蛋白功能研究提供了工具。
- 杨辉吴小鹏王海龙石婷婷王星博袁庄川颜焰廖敏周继勇
- 关键词：流感病毒NS1单克隆抗体亚细胞定位
