高明
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 马立克氏病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2013年
- 为了获得分泌抗鸡马立克氏病病毒(MDV)gE囊膜糖蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,将pGEX-6P-1表达的重组蛋白gE作为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,共筛选获得4株能够稳定分泌抗MDV gE蛋白抗体的杂交瘤细胞株。抗体亚型鉴定结果表明,4株均为IgG1型,轻链为κ链。间接免疫荧光结果显示,4株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均能特异性识别MDV,并具有一定的中和活性。本研究对MDV诊断、抗原表位分析及鉴定等具有重要的应用价值。
- 李巧玲崔红玉牛军伟闫帅高明杨红亚赵妍王云峰
- 关键词：马立克氏病病毒原核表达单克隆抗体
- 表达鸡新城疫病毒F蛋白的重组马立克氏病毒的构建及其鉴定被引量：3
- 2012年
- 为构建表达鸡新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)的重组马立克氏病毒(MDV),本研究采用RT-PCR方法从NDV强毒株F48E9基因组中扩增出病毒的融合蛋白F基因,构建由CMV启动子和BGH polyA组成的2.7 kb F基因表达盒。将其插入带有黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶基因(gpt)和MDV US2同源臂的中间转移载体pUAB-gpt中获得重组MDV转移载体pUAB-gpt-wF。将该转移载体与MDV-814疫苗株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)总DNA共转染CEF,经同源重组及gpt选择系统筛选,获得带有F基因表达盒的重组MDV(rMDV814-wF)。其体外增殖与亲本病毒没有差异。经间接免疫荧光试验、PCR、Southern-blot及western blot等试验证明,重组病毒在CEF中传至13代以上仍稳定表达NDV的F蛋白。该重组病毒的构建为MDV活载体疫苗的筛选及应用奠定了基础。
- 闫帅崔红玉李巧玲赵妍石星明赵晓岩胡顺磊王玫高明李越王云峰
- 关键词：马立克氏病毒重组病毒F基因
- 嗜酸乳杆菌表面锚定展示H5N1亚型禽流感病毒血凝素HA1蛋白的研究被引量：3
- 2014年
- 为研究乳酸菌载体细胞表面锚定结合展示外源蛋白,本研究将禽流感病毒(AIV)H5N1亚型血凝素HA1基因克隆于pET-28a载体中,同时PCR扩增编码S-层蛋白的锚定区域基因Slap-C,并插入HA1基因下游构建重组表达质粒pET-HA1-Slap,转化于E.coli BL21中进行HA1-Slap融合蛋白的表达,SDS-PAGE检测显示表达的HA1-Slap主要以包涵体形式存在。融合蛋白经镍柱纯化、透析复性,与氯化锂处理的嗜酸乳杆菌混合孵育,SDS-PAGE和间接免疫荧光检测表明HA1-Slap锚定结合并展示于嗜酸乳杆菌细胞壁表面,并且具有良好的稳定性。本研究结果证明了嗜酸乳杆菌细胞壁表面展示AIV的HA1抗原蛋白的可行性,为新型乳酸菌载体黏膜免疫疫苗的研究奠定基础。
- 高明崔红玉王笑梅王云峰
- 关键词：嗜酸乳杆菌
