王程
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：安徽师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金安徽省优秀青年科技基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 单体异柠檬酸脱氢酶的研究进展被引量：6
- 2009年
- 异柠檬酸脱氢酶是三羧酸循环的关键酶之一,依赖金属离子Mg2+(或Mn2+)和辅酶NAD(P),催化异柠檬酸氧化脱羧生成α-酮戊二酸及CO2,为细胞新陈代谢提供能量和生物合成的前体物质。根据亚基的组成,原核生物IDH可分为单体IDH和同源二聚体IDH。本文主要对单体IDH的空间结构、催化机制及分子进化机制等研究进展进行了综述。
- 张贝贝陶张欢汪新颖王程
- 关键词：异柠檬酸脱氢酶同源二聚体
- 大肠杆菌苹果酸合酶A的酶学和生理功能研究被引量：2
- 2011年
- 苹果酸合酶是乙醛酸循环的关键酶之一。E.coli中苹果酸合酶A(malate synthase A,MSA)由aceB基因编码。根据E.coli基因组序列设计引物,利用PCR技术扩增aceB基因,并将其克隆入pET-29b(+),构建了重组表达质粒pET-MSA。经IPTG诱导,MSA在E.coliRosetta(DE3)中获得高效表达。纯化的MSA蛋白的分子量大小约为60 kDa,最适反应pH值和最适温度分别是pH值8.0、30℃。纯化的蛋白质在Mg2+存在时才能发挥最大的活性,其对乙酰辅酶A的Km和Vmax分别是8.07μM和3.6μM/min。此外构建了MSA和苹果酸合酶G(MSG)基因敲除菌株MG::ΔaceB和MG::ΔaceBΔglcB。研究发现缺少MSA的E.coli突变菌株在乙酸中的生长速率要比野生型菌株慢很多,表明MSA对大肠杆菌在乙酸中的生长起着重要作用。MSG虽然能部分补偿MSA的作用,但是包含MSA的乙醛酸旁路是更有效的乙醛酸代谢途径。
- 王程王敖赵旵军朱国萍
- 关键词：动力学生长速率大肠杆菌
- 枯草杆菌及大肠杆菌异柠檬酸脱氢酶的酶学性质研究被引量：1
- 2010年
- 对枯草杆菌异柠檬酸脱氢酶(BsIDH)、大肠杆菌异柠檬酸脱氢酶(EcIDH)和大肠杆菌异柠檬酸脱氢酶的突变体酶(EmIDH)进行了纯化和酶学性质鉴定。BsIDH和EcIDH对辅酶NADP^+的特异性与NAD^+相比,分别是NAD^+的1 330倍和3 890倍。而EmIDH对NAD^+的特异性与NADP^+相比,是NADP^+的122倍。因此,BsIDH和EcIDH是NADP^+依赖性异柠檬酸脱氢酶,而EmIDH的辅酶特异性已转换为NAD^+依赖性。EcIDH、BsIDH和EmIDH对底物异柠檬酸的K_m值分别为67.4 μmol/L、60.6μmol/L和105.6μmol/L。BsIDH和EcIDH的最适反应pH分别为8.2和8.0,EmIDH的最适反应pH为7.0。BsIDH和EmIDH的最适反应温度是45℃,EcIDH的最适温度为43℃。三种IDH的活性依赖于不同的二价金属离子的存在,Mn^(2+)、Mg^(2+)存在时酶活性最强,Cu^(2+)、Ca^(2+)、Zn^(2+)和Ni^(2+)强烈抑制酶的活性。系统的酶学性质研究为深入认识IDH的催化与调节机制提供了更多依据。
- 许希晨葛亚东王敖王程朱国萍
- 关键词：枯草杆菌大肠杆菌异柠檬酸脱氢酶酶学性质
