曲乐
- 作品数:2 被引量:7H指数:2
- 供职机构:苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 重组人平足蛋白基因在中国仓鼠卵巢细胞的稳定表达被引量:3
- 2016年
- 目的构建平足蛋白(PDPN)真核表达质粒PDPN-pEGFP-N1,建立稳定高表达重组人PDPN的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞株并对其进行生物学活性研究。方法通过反转录PCR和DNA重组技术从HEK293细胞中克隆PDPN cDNA,插入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的真核表达载体pEGFP-N1中。通过PCR、酶切及测序等方法鉴定重组载体;进而将该重组载体转染至CHO细胞中,通过荧光显微镜检测EGFP的表达,Western blot法检测PDPN在CHO细胞中的表达,流式细胞术分选高表达PDPN的CHO细胞,运用血小板聚集实验检测分选后细胞株的生物学活性。结果 DNA测序和酶切鉴定证明PDPN基因正确克隆至pEGFP-N1载体中,重组载体稳定转染CHO细胞后,在荧光显微镜下观察到绿色荧光,流式细胞术分选后的细胞高表达PDPN;Western blot结果显示转染后CHO细胞膜表面表达PDPN蛋白;过表达PDPN的CHO细胞可以诱导人血小板聚集。结论成功构建了稳定高表达PDPN蛋白的CHO细胞株,该细胞株可表达PDPN,并诱导血小板聚集。
- 曲乐赵星鹏傅建新夏利军戴兰阮长耿赵益明
- 关键词:PEGFP-N1CHO细胞血小板聚集
- 血管性血友病因子与脑血管疾病关系的研究进展被引量:4
- 2014年
- 脑血管疾病(cerebrovasculardisease,CVD)是指由各种原因导致的急慢性脑血管病变,其中血管壁受损是其最主要的病因。血管性血友病因子(vwF)作为血管内皮细胞功能的特异性标志物,其在CVD的发生、发展过程中也发挥着重要的作用。本文将就vWF与CVD关系的研究进展进行综述。
- 曲乐赵益明
- 关键词:血管内皮功能紊乱