夏圣宝
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：新疆农业大学药学院更多>>
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- 牛脑钙调素的分离纯化、鉴定及其免疫原制备被引量：1
- 2009年
- 【目的】从牛脑中分离纯化钙调素(CaM),并进行生化鉴定,同时用碳二亚胺法制备CaM偶联免疫原。【方法】以phenyl-Sepharose层析法从牛脑中分离纯化CaM,用PDE法检测其活性,以SDS-PAGE、PAGE检测其分子量并观察CaM有无Ca2+结合时的电泳行为,检测其紫外扫描光谱,同时用交联剂碳二亚胺制备CaM偶联抗原进行动物免疫,并用间接Elisa法检测动物血清免疫效价。【结果】纯化后的CaM对PDE有明显的激活作用,电泳结果显示为均一条带,分子量约为17.3 kDa,在SDS-PAGE中,CaM结合Ca2+时比未结合Ca2+时迁移率快;而在PAGE中,迁移率在结合Ca2+比未结合Ca2+时慢;紫外光谱扫描显示约在251、260、267、272和283 nm有5个吸收峰,动物血清免疫效价为1∶800。【结论】用phenyl-Sepharose层析法纯化CaM和用碳二亚胺法制备CaM偶联抗原是成功的。
- 周旋包晓玮马生军曹锐夏圣宝王颖
- 关键词：CAM碳二亚胺
