程海卫
- 作品数：24 被引量：0H指数：0
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- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 一种检测母猪初乳中sIgA的试剂盒
- 本发明提供一种检测母猪初乳中sIgA的试剂盒，属于生物技术领域。检测母猪初乳中sIgA的试剂盒，包括猪sIgA‑Fc蛋白纳米抗体51溶液和辣根过氧化物酶标记的猪sIgA‑Fc蛋白纳米抗体72溶液；所述猪sIgA‑Fc蛋白...
- 程海卫郑其升陈瑾于晓明乔绪稳侯立婷张元鹏侯继波
- 文献传递
- 靶向B细胞的口蹄疫GHloop多肽抗原的制备及免疫效力鉴定
- 2023年
- 本研究将葡萄球菌A蛋白人工合成类似物的二聚体(DD)与口蹄疫的GHloop串联,按照大肠杆菌偏好性密码子优化合成GHloop-DD,并评价其免疫原性。将GHloop-DD插入到原核表达载体pET-32a中,鉴定阳性后转入E.coli BL21进行诱导表达。利用SDS-PAGE与Western blot对目的基因表达产物的可溶性进行分析。利用镍亲和层析柱纯化目的蛋白;利用BCA试剂盒测定重组蛋白的浓度,将重组蛋白(2.5μg/只)与206佐剂乳化,制备疫苗,免疫5周龄小鼠,同时设商品化合成肽苗对照与空白对照。免疫后28 d采集试验小鼠血清,利用口蹄疫病毒多肽ELISA抗体检测试剂盒检测免疫小鼠血清的抗体水平;利用流式细胞仪测定淋巴结B细胞的数量及骨髓中长寿浆细胞的数量;利用荧光定量检测相关趋化因子的表达水平;利用细胞因子检测试剂盒检测脾脏淋巴细胞刺激后上清液中的细胞因子的水平。SDS-PAGE结果表明,GHloop-DD基因在大肠杆菌中以可溶形式获得高水平表达;Western blot结果显示,表达的重组蛋白能够与特异性抗体发生反应。免疫试验结果表明,GHloop-DD不但能够刺激免疫小鼠产生高水平的多肽特异性ELISA抗体,而且能够提高淋巴结B细胞的数目及相关趋化因子水平,使骨髓中长寿浆细胞的数量和脾脏淋巴细胞刺激后上清液中细胞因子的水平显著提高。以上结果表明,本研究制备的GHloop-DD具有良好的免疫原性,为口蹄疫多肽疫苗的研制提供了新的方向。
- 侯立婷张媛媛于晓明于晓明张元鹏杜露平乔绪稳张元鹏郑其升程海卫
- 关键词：体液免疫B细胞
- 基于连接肽的双特异纳米抗体及其编码基因和应用
- 本发明公开一种基于连接肽的双特异纳米抗体及其编码基因和其应用，所述基于连接肽的双特异纳米抗体是以新型连接肽将不同的特异性的纳米抗体的基因连接后获得目的基因片段进一步重组表达获得的目的蛋白，所制备的基于连接肽的双特异纳米抗...
- 程海卫杨利郑其升陈瑾杜露平侯立婷于晓明乔绪稳张元鹏秦竹李兰王义伟张浩明
- 一种含皂苷的脂质纳米颗粒的制备方法及其应用
- 本发明提供一种含皂苷的脂质纳米颗粒的制备方法及其应用，属于免疫制剂技术领域。该方法包括：配制含有纳米稳定剂的皂苷溶液，含有140‑160ml/L的甘油单月桂酸酯、12‑17g/L的海藻糖、23‑27g/L的TPGS和28...
- 王义伟张元鹏程海卫于晓明陈瑾郑其升
- 基于DC细胞的双功能纳米抗体及其构建方法和应用
- 本发明公开基于DC细胞的双功能纳米抗体及其构建方法和应用，所述双功能纳米抗体是以接头元件将基于DC细胞的目的蛋白特异性纳米抗体和编码粒径为150nm以下的病毒抗原特异性纳米抗体的基因连接后获得目的基因片段并重组表达获得的...
- 程海卫侯立婷杜露平于晓明乔绪稳张元鹏李兰王义伟张浩明秦竹杨利陈瑾郑其升侯继波
- 刀豆蛋白A纯化猪流行性腹泻病毒的研究
- 2023年
- 为开发一种新型高效、低成本的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)抗原纯化方法,本研究尝试了一种基于凝集素(刀豆蛋白A,Con A)的PEDV浓缩纯化方法。通过Con A与PEDV病毒粒子的特异性结合,形成Con A-PEDV复合物,然后通过低速离心和竞争性解离即可实现病毒纯化。结果表明:1)当Con A的使用浓度为80μg/mL,室温作用2 h,4000 r/min离心15 min时,纯化效果较佳;2)利用Tris-HCl缓冲液(pH 7,0.01 mol/L,内含200 mmol/L甲基-α-D-吡喃甘露糖苷和50 mmol/L NaCl)进行解离时,较PBS缓冲液有更高的解离效率;3)该方法病毒回收率大约为80%,总蛋白去除率可达90%。综上,本研究利用Con A纯化PEDV是可行的,为高质量PEDV灭活疫苗的研发奠定基础。
- 李兰张浩明杨利程海卫侯立婷张元鹏侯继波陈瑾郑其升
- 关键词：刀豆蛋白A猪流行性腹泻病毒纯化
- 猪圆环病毒2型灭活疫苗及其制备方法
- 本发明提供猪圆环病毒2型灭活疫苗及其制备方法，涉及生物制药领域。该疫苗含有0.01‑2mg/mL左旋咪唑、0.05～20 mg/mL紫苏提取物、0.03‑20mg/mL杨树花提取物。本发明还提供所述疫苗的制备方法，将左旋...
- 于晓明郑其升陈瑾侯立婷李鹏成乔绪稳程海卫侯继波
- 文献传递
- CVC1302通过小鼠骨髓源树突状细胞对免疫反应的调控
- 2023年
- 为获得C57BL/6小鼠骨髓源树突状细胞(DC)的体外制备方法并探讨免疫增强剂CVC1302对DC免疫调控的影响,取8周龄的C57BL/6小鼠骨髓细胞,在体外经过重组鼠源粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(Recombinant mouse granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, rm GM-CSF)诱导分化为DC。诱导当天与诱导第3 d、第7 d时,用倒置显微镜观察细胞形态;诱导第7 d时,收获细胞,鉴定表型。利用流式细胞术评价CVC1302对DC表面分子表达水平的影响,用超高分辨率显微镜评价CVC1302对DC递呈抗原的影响,采用流式细胞术检测T淋巴细胞的活化数量,利用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)方法检测T淋巴细胞活化后干扰素γ(IFN-γ)的分泌水平。结果表明,体外诱导的DC在显微镜下具有非常典型的树突状细胞形态,流式细胞术检测结果表明,经典的1型树突状细胞(Conventional type 1 dendritic cell, cDC1)和经典的2型树突状细胞(Conventional type 2 dendritic cell, cDC2)亚群均可检测到。CVC1302能够显著促进DC表面分子活化并且增强DC对鸡卵清白蛋白(OVA)抗原的递呈;CVC1302能够显著活化T淋巴细胞并且提高T淋巴细胞活化后IFN-γ的分泌水平。本研究利用rm GM-CSF成功在体外刺激诱导DC的产生,并证实了CVC1302在体外同样具有促进DC成熟、DC对OVA抗原的递呈及T淋巴细胞活化的能力。
- 侯立婷于晓明于晓明张元鹏杜露平陈瑾张元鹏侯继波
- 关键词：C57BL/6小鼠树突状细胞抗原递呈T淋巴细胞活化
- 猪圆环病毒2型灭活疫苗及其制备方法
- 本发明提供猪圆环病毒2型灭活疫苗及其制备方法，涉及生物制药领域。该疫苗含有0.01‑2mg/mL左旋咪唑、0.05～20 mg/mL紫苏提取物、0.03‑20mg/mL杨树花提取物。本发明还提供所述疫苗的制备方法，将左旋...
- 于晓明郑其升陈瑾侯立婷李鹏成乔绪稳程海卫侯继波
- 一种介导FMDV血凝的蛋白、编码基因及其应用
- 本发明提供一种介导FMDV血凝的蛋白、编码基因及其应用，属于生物技术领域。所述介导FMDV血凝的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供所述蛋白的编码基因，携带该蛋白的编码基因的载体、重组菌，以及所述...
- 杨利程海卫张浩明郑其升陈瑾乔绪稳侯立婷杜露平秦竹李兰于晓明张元鹏王义伟
