- 材料表面化学调控血管内皮细胞迁移的分子机制研究
- (引言)血管内皮细胞(Vascular endothelial cell,VECs)黏附和迁移是血管支架等心血管材料植入后支架段血管再内皮化修复的重要过程。近期研究表明,邻近VECs迁移对血管损伤后的再内皮化具有主要的贡...
- 刘肖珩沈阳余泓池高敏汪小力冯唐王云兵
- 关键词：血管内皮细胞细胞迁移
- 自噬参与调控流体剪切力诱导肝癌细胞发生上皮-间充质转化
- 2021年
- 目的流体剪切力(fluid shear stress,FSS)是肿瘤细胞所处的一种重要力学微环境,在肿瘤转移过程中至关重要。自噬与上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是调控肿瘤细胞迁移的重要机制,探索自噬在FSS诱导EMT中的作用及其对肝癌细胞迁移的影响。方法利用平行平板流动腔对HepG2和IQGY-7703两种肝癌细胞施加1。
- 苏冠月冯唐裴童杨帆孙登莲余泓池汪小力高文博何佳沈阳刘肖珩
- 关键词：上皮间充质转化流体剪切力肿瘤细胞迁移自噬
- 流体剪切力诱导喉鳞癌Hep2细胞上皮-间充质转化被引量：3
- 2016年
- 目的探究流体剪切力(fluid shear stress,FSS)对喉鳞癌Hep2细胞发生上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响。方法对Hep2细胞加载140 m Pa的FSS,观察不同时间点细胞的形态学变化;划痕实验检测力学加载后Hep2细胞迁移能力的变化;共聚焦显微镜下观察细胞骨架蛋白F-actin的分布;Western blotting检测EMT相关蛋白的表达。结果 FSS力学加载后,Hep2细胞形态由多边形向梭形转变,撤销FSS后,细胞恢复初始的多边形;Hep2细胞迁移能力的增加依赖于FSS加载时间。FSS促使细胞骨架蛋白F-actin重排,从而增强Hep2细胞的迁移行为。FSS使Hep2细胞EMT标志蛋白发生了时序性变化。结论 FSS是诱导Hep2细胞发生EMT的一个重要物理因素。
- 张莹莹冯唐沈阳刘静霞闫志平刘双凤刘肖珩
- 关键词：流体剪切力喉鳞癌细胞细胞迁移上皮-间充质转化
- RhoA调控流体剪切力诱导的肝癌细胞自噬
- 2019年
- 目的自噬是细胞内形成自噬体,包裹受损的细胞器和蛋白质,进而与溶酶体融合,将自噬底物降解成小分子以重新利用的生物学过程。研究表明,力学刺激能够诱导哺乳动物细胞自噬,但其具体分子机制并不清楚。本研究的目的是探究流体剪切力(fluid shear stress,FSS)对肝癌细胞自噬的影响及分子机制。方法采用蠕动泵和流动腔系统结合,在体外对肝癌细胞HepG2精确地加载FSS。利用透射电镜、免疫荧光和Western blot技术检测自噬体形成和自噬分子标志物LC3B和p62的表达,明确FSS诱导肝癌细胞自噬。构建RhoA干扰和过表达的肝癌细胞株,在此基础上研究RhoA在FSS诱导肝癌细胞自噬中的作用。结果肝癌细胞加载FSS(1 dyn/cm^2,0.5 h)后,具有典型双层膜结构的自噬体的数目和LC3B的荧光聚集点相对于静态培养组明显增多,同时细胞自噬的分子标志物LC3BⅡ/Ⅰ比值明显升高,p62表达降低,说明FSS诱导肝癌细胞自噬。通过生物学信息学分析,发现临床样本的肝癌组织RhoA蛋白表达明显高于癌旁组织,分子功能富集分析发现RhoA蛋白表达与自噬相关分子聚类呈正相关。成功构建RhoA敲减和过表达的细胞株,敲减RhoA后,FSS诱导的自噬分子标志物LC3BⅡ/Ⅰ比值降低,LC3B的荧光聚集点和自噬体数目明显减少;过表达RhoA后,FSS诱导的自噬分子标志物LC3BⅡ/Ⅰ比值进一步升高,LC3B的荧光聚集点和自噬体数目进一步增多,说明RhoA介导FSS诱导的肝癌细胞自噬。结论 RhoA调控FSS诱导的肝癌细胞自噬。
- 闫志平苏冠月冯唐沈阳曾烨刘肖珩
- 关键词：剪切力肝细胞肝癌自噬RHOA
- YAP在肝癌细胞HepG2迁移中的作用及其分子机制
- 2019年
- 目的肝癌是一种严重危害人类健康的恶性疾病,由于肝癌细胞极易发生迁移、侵袭和转移,导致其治疗效果不佳,且极易术后复发。YAP是机体内重要的转录共激活因子,与肿瘤的发生发展密切相关,有望成为肝瘤治疗新靶点。本研究的目的是探讨YAP在肝癌细胞HepG2迁移中的作用及其可能分子机制。方法以肝癌细胞HepG2为研究对象,构建敲减YAP的HepPG2细胞株或通过加载流体剪切力诱导HepG2细胞中YAP的表达。采用倒置显微镜观察细胞形态变化;通过骨架染色观察细胞骨架变化;分别采用qRT-PCR和Western blot检测各组细胞中YAP、Rac1、RhoA、Cdc42的基因和蛋白表达及GEF的蛋白表达;采用pull-down实验检测细胞中活化Rac1的表达水平;通过免疫荧光实验进一步观察Rac1、RhoA、Cdc42的表达和分布;采用免疫共沉淀检测YAP与Rac1、RhoA、Cdc42和GEF的相互作用情况。结果敲减YAP后,HepG2细胞呈不规则多边形,应力纤维丝解聚,迁移速度显著降低,穿过Transwell膜的细胞数减少;加载流体剪切力后,HepG2细胞中YAP表达上调,细胞迁移速度增加。敲减YAP后,HepG2细胞中Rac1、RhoA、Cdc42的蛋白和mRNA表达下调,GEF的蛋白表达也显著下调。对敲降前后的HepG2细胞施加相同的流体剪切力,HepG2中Rac1、RhoA、Cdc42及GEF的表达上调,但敲减YAP后其表达明显低于单纯加力组。YAP与Rac1、RhoA和Cdc42均没有直接结合,YAP与GEF直接结合。结论 YAP活化后促进肝癌细胞HepG2迁移和侵袭。活化的YAP可能通过GEF间接上调Rac1、RhoA和Cdc42的表达,进而促进肝癌细胞HepG2发生迁移。
- 苏冠月冯唐何佳高文博马伦杰沈阳刘肖珩
- 关键词：肝细胞肝癌迁移RHOGTPASES
- Snail1基因沉默对喉鳞癌Hep-2细胞紧密连接蛋白表达及迁移能力的影响被引量：1
- 2017年
- 本文为研究Snail1基因对喉鳞癌细胞株Hep-2紧密连接蛋白表达及迁移能力的影响,将含有Snail1基因的短发夹RNA(Sh-RNA)的质粒转染喉鳞癌细胞株Hep-2,培养出可稳定传代的Snail1基因沉默的细胞(命名为Sh-snail1细胞)。课题组以蛋白免疫印迹技术检测紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-5的表达是否发生变化。然后设计伤口愈合实验检测其迁移能力,再以蛋白免疫印迹技术检测与细胞迁移能力密切相关的Rho GTP酶家族重要成员Rho A、Cdc42蛋白的表达变化。结果表明,Sh-snail1细胞紧密连接关键蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-5表达明显上调,迁移能力明显减弱,且Rho A、Cdc42蛋白表达下调。该研究表明,喉鳞癌Hep-2细胞通过下调Snail1基因的表达使细胞间连接更加紧密,同时抑制Hep-2细胞的迁移能力,下调Rho A、Cdc42蛋白的表达。本文研究结果证实,Snail1基因与Hep-2细胞转移过程中的细胞间紧密连接打开以及细胞迁移能力增强密切相关,为靶向治疗喉鳞癌提供分子机制的研究依据。
- 刘双凤沈阳冯唐刘肖珩
- 关键词：SNAIL1基因沉默HEP-2细胞细胞迁移
- 肝癌外泌体在肿瘤微环境细胞间通讯中的作用
- 2024年
- 肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最致命的癌症之一。由于HCC发病隐匿、进展迅速且缺乏有效的治疗方法,预后极差,其5年平均生存率低于10%。肿瘤微环境是HCC发生发展所处的内环境,可调节HCC的起源、发展、侵袭和转移。肝癌细胞在癌症进展过程中可以通过释放含有特异信号的外泌体调控肿瘤微环境中的肿瘤细胞、癌相关成纤维细胞、癌相关免疫细胞等不同细胞的生物学行为,进而促进癌症进展。然而,外泌体在这些过程中对具体细胞调控的确切分子机制和作用仍不清楚。本综述首先介绍了HCC微环境的组成和肿瘤微环境中外泌体的来源和特征以及力学因素对外泌体的影响。其次,本综述重点讨论了HCC外泌体对微环境中不同类型细胞的作用。我们看到,在包括肝癌在内的临床癌症治疗中使用外泌体作为载体仍然有许多必须克服的困难。首先,外泌体的同质性很难得到保证。其次,外泌体主要通过皮下注射给药,虽然这种方法简单易行,但吸收效率并不理想。第三,外泌体提取方法有限且效率低,因此难以大量制备外泌体。特别是对于外泌体介导的肿瘤免疫治疗,确保使用的外泌体数量足以引发有效的肿瘤免疫反应非常重要。随着鉴定、分离和纯化技术的改进,外泌体有望成功运用于早期HCC的临床诊断和肝癌的临床治疗中。
- 冯唐杨欣蕊王琦为刘肖珩
- 关键词：外泌体肿瘤微环境肝细胞肝癌细胞间通讯
- 一种用于阴茎癌类器官培养和/或传代的培养基
- 本发明属于类器官培养技术领域，具体涉及一种用于阴茎癌类器官培养和/或传代的培养基。本发明的培养基由Advanced DMEM/F12培养基、GlutaMAX、HEPES缓冲液、Antibiotic‑Antimycotic...
- 冯唐邵彦翔刘睿之朱月婷张春贺刘继彦
- 流体剪切力调节肝癌细胞源性外泌体分泌促进细胞迁移
- 2021年
- 目的外泌体是细胞分泌的纳米级膜微粒,能在细胞之间进行信息传递。目前研究表明,外泌体在肿瘤发生发展中发挥重要作用。前期研究发现,流体剪切力促进肝癌细胞迁移,但外泌体在其中是否发挥作用及其影响机制尚不明确。方法(1)对HepG2和QGY-703细胞施加0.14 Pa的流体剪切力(FSS),通过透射电镜、扫描电镜、Western blot、纳米颗粒跟踪分析术对外泌体进行表征及数量统计。(2)通过划痕实验和Transwell实验,检测外泌体对肝癌细胞迁移和侵袭的影响。
- 冯唐苏冠月汪小力何佳李甜甜房飞沈阳刘肖珩
- 关键词：外泌体流体剪切力细胞源性肿瘤发生发展细胞迁移HEPG2
- 流体剪切力诱导细胞上皮-间充质转化(EMT)的分子机制研究
- (引言)原发性喉癌是由喉部上皮细胞恶化形成的喉部鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinomas)。喉鳞癌具有很强的转移性和侵袭性,导致患者的临床疗效和预后都很差。最近,上皮-间充质转化(...
- 刘肖珩余泓池汪小力苏冠月冯唐沈阳
- 关键词：流体剪切力细胞迁移SNAIL
