付彬
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：西南大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 多吡啶钌配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2的抗菌活性及机制研究被引量：4
- 2016年
- 目的研究多吡啶钌配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2的抗菌活性,并进一步探讨其作用机制。方法采用最小抑菌浓度(MIC)以及最小杀菌浓度(MBC),测定无机配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2的抗菌活性。为了阐明其抗菌机制,首先利用配合物自身荧光特性和核酸染料对DNA的竞争性结合所导致的荧光强度变化,以确定配合物与DNA的结合能力;然后通过DNA凝胶电泳,检测配合物与细菌基因组DNA结合后产生的效果以检测抗菌活性的机制。结果多吡啶钌配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2对大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌具有较强的抗菌活性,最小抑菌浓度达0.2~0.4 g·L^(-1)。荧光检测显示,配合物能够与细菌DNA发生结合,以此为基础,配合物能够干扰细菌的转录过程,抑制细菌生长。结论本研究证明了多吡啶钌配合物[(Phen)_2Ru(dppz)](PF_6)_2的抗菌活性及作用机制,为其进一步开发奠定了基础。
- 刘汉杰付彬付爱玲付琛
- 关键词：多吡啶钌配合物DNA结合DNA降解
- 基于CRISPR/Cas9技术构建原位敲入亨廷顿病(HD)小鼠模型被引量：1
- 2018年
- 目的:探究CRISPR/Cas9技术在建立亨廷顿病(Huntington’s Disease,HD)原位敲入小鼠模型中的运用。方法:首先,设计gRNA靶点序列(Htt gRNA)并检测其体外Cas9酶切活性,选择活性较好的一对备用。其次,利用全基因合成具有150Q(150个CAG重复)的Donor序列。然后将Cas9 mRNA,Htt-L3 gRNA,Htt-R3 gRNA和Donor DNA混合均匀进行胚胎显微注射,再将胚胎移植到受体小鼠中备孕。待小鼠出生后,鉴定F0代及其子代F1,F2,F3代的基因型。结果:F0,F1,F2及F3代小鼠基因组上均出现150Q的准确敲入,且子代稳定遗传。结论:在不改变小鼠HD基因表达调控的基础上,仅改变其特定致病基因的长度,利用CRISPR/Cas9技术成功构建HD原位敲入小鼠模型,为进一步模拟人类HD缓慢且迟发的发病过程及后续临床治疗研究拓展了HD模型。
- 彭怡王柏彬付彬徐兴然
- 关键词：亨廷顿病小鼠模型
- 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立亨廷顿病(HD)细胞模型
- 2018年
- 目的:探索CRISPR/Cas9基因编辑技术在构建亨廷顿病(Huntington's Disease,HD)细胞模型中的应用。方法:借助CRISPR/Cas9靶点设计网站对IT15基因进行分析并设计gRNA靶点序列,检测gRNA靶点序列的体外Cas9酶切活性。选择体外活性较好的一对gRNA靶点序列并装载到VK001-05打靶质粒上,根据靶点位置设计并构建50个CAG(Poly Q)重复且有EGFP和PuroR标记的Donor质粒。将打靶质粒和Donor质粒混合并借助转染试剂转染CATH-a细胞,提取转染后细胞基因组DNA鉴定gRNA靶点位置的基因型。结果:转染后CATH-a细胞的gRNA靶点位置准确无误地敲入50个CAG重复碱基。结论:研究进一步拓展了CRISPR/Cas9基因编辑技术在构建遗传性基因突变疾病模型方面的应用,同时也为未来临床治疗该类疾病提供了参考基础和研究平台。
- 付彬彭怡徐兴然
- 关键词：亨廷顿病POLY
