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鹿茸MSCs软骨分化过程WNT信号基因的表达与分析被引量：3: 2018年; TGF-β信号是刺激骨形成重要的旁分泌信号通路,Wnt信号是细胞生长和分化的重要通路,为探究两信号通路对鹿茸间充质干细胞软骨分化的影响,实验利用10 ng/mL TGF-β1刺激鹿茸间充质干细胞软骨分化,利用定量PCR与Westernblot技术检测分化过程Wnt家族16个生长因子及通路关键基因DKK1和β-catenin的表达变化。结果表明:刺激后第7天细胞开始分泌软骨的表面标志物,软骨分化开始,至第21天骨分化开始;分化过程中检测到Wnt3、Wnt4和Wnt5A 3个Wnt家族生长因子的表达,且Wnt3与Wnt5A基因的表达趋势相近,即在刺激后的第21天达到最高;Wnt4基因表达从软骨与骨的形成阶段呈上调表达趋势,DKK1基因在软骨发育的关键时期即第21天高表达,而β-catenin作为信号通路的枢纽在该时间点呈下调表达。由此可见,Wnt信号通路对塔里木马鹿茸MSCs软骨分化起重要的调控作用,Wnt家族的Wnt3和Wnt5A基因对软骨分化有重要作用影响,而Wnt4基因对软骨骨化有重要影响。; 开丽比努尔.吾布力王姗姗郑永富陈晓利李娜高庆华韩春梅; 关键词：TGFΒ1 WNT信号鹿茸软骨分化

新疆罗布羊群体遗传多样性及系统进化分析被引量：7: 2016年; [目的]新疆罗布羊群体遗传变异与起源分化的研究,可为罗布羊品种形成、保护和种质特性研究利用提供理论基础。[方法]利用7个微卫星(SSR)位点及mt DNA D-loop环序列分析了新疆尉犁地区120头罗布羊群体遗传多样性,及与其它新疆南部地方羊种与中国绵羊的三大母系:藏羊、蒙古羊和哈萨克羊,三个野羊种:羱羊、摩佛伦羊、盘羊和亚洲型A型、欧洲型B型的母系遗传距离与进化关系。[结果]罗布羊群体平均等位基因数(K)、观察杂合度(HO)、期望杂合度(HE)、多态信息含量(PIC)分别为8.86、0.711、0.791和0.769;发现BM143位点存在罗布羊群体HW不平衡现象。罗布羊分成A系、B系和C系3个进化系,B系进化支与欧洲B型和多浪羊遗传距离较近,聚为一类;C系进化支先与巴音布鲁克羊聚为一支,然后和A进化支聚成一类,再与新疆其它地方羊种及蒙古羊、藏羊、亚洲型A型聚为一类。三个支系中B支系与摩佛伦羊(O.musmon)的关系较近。[结论]新疆尉犁地区罗布羊群体遗传多样性丰富,具有较高育种价值;群体微卫星BM143位点存在的HW不平衡现象;罗布羊有3个进化系,聚类分析结果初步认为罗布羊是由中东经蒙古高原到达新疆,后来与新疆南部地方羊种混杂的品种。; 郑永富王姗姗高庆华钱梦阳宫昌海陈晓利韩春梅; 关键词：系统进化 MTDNA 微卫星DNA

超长时间低温保存绵羊鲜精活率和DNA完整性的比较被引量：5: 2017年; 羊的人工授精技术在畜牧生产实践中对短期内扩大良种羊的数量和质量、最大化发挥优秀种公羊的遗传潜力、加速杂交改良、加快育种进程、防止疾病传播特别是生殖道疾病的传播等方面有着重要意义。; 陈晓利郑永富王杰高庆华; 关键词：绵羊整性活率鲜精人工授精技术

三种奶牛冻精蛋白制备方法的效果比较: 2018年; 为了获得准确的奶牛冻精差异蛋白二维电泳(2-DE)分析结果,试验采用3种不同的方法,即改良TRIzol裂解法、改良三氯乙酸(TCA)-丙酮沉淀法和尿素盐酸胍裂解法,对奶牛冻精蛋白进行裂解,通过蛋白核酸浓度测定仪测定不同裂解法提取的蛋白量,用SDS-PAGE凝胶电泳检测不同方法提取的蛋白量。结果表明:随着精子数量的增加,裂解获得的蛋白量随之增加,改良TRIzol裂解法得到的蛋白量最高,尿素盐酸胍裂解法最低,改良TRIzol裂解法精子数为2.0×107、3.0×107和4.0×107个时蛋白量分别为(1.73±0.07),(1.94±0.05),(2.50±0.38)μg/μL,显著高于其他两种方法(P<0.05);三种不同裂解方法上样量均为25μL,即含蛋白质26.21~62.5μg,不同上样蛋白量比较,精子数3.0×10~7个获得的条带最清晰、无粘连;蛋白条带分布的比较,改良TCA-丙酮沉淀法获得的条带多集中在50~85 ku区域,而改良TRIzol裂解法在30~50 ku区域和14~25 ku区域(精子数为3.0×10~7和4.0×10~7个)。说明精子数为3.0×10~7个时采用改良TRIzol裂解法能得到更丰富、更全面的精子蛋白质种类,有利于二维电泳(2-DE)分析寻找差异蛋白质,为后续试验奠定基础。; 郑永富陈晓利韩春梅高庆华; 关键词：奶牛冻精蛋白裂解

奶牛γ精子特异表达SRY基因制备性控DNA疫苗的初步研究: 在哺乳动物的Y染色体上,特有的SRY基因是雄性特征体现的睾丸决定基因,它的表达与否决定着性别分化的方向。SRY基因决定雄性发育的生物学功能是靠核心HMG盒与D NA结合发挥作用,通过对Y染色体上的SRY基因设计疫苗,进而...; 陈晓利; 关键词：SRY基因性别控制性别决定; 文献传递

牙釉质基因巢式扩增鉴定牛早期胚胎性别的研究被引量：2: 2016年; 根据牙釉质基因在牛X染色体和Y染色体上存在的差异设计巢式引物,对牛静脉血基因组DNA样本以及10枚牛早期胚胎DNA样本进行巢式扩增和电泳分析,以鉴定性别。结果表明:利用此方法能够对牛10 pg量血液基因组DNA进行扩增鉴定性别,雌性产生1条片段长度为311 bp的源于X染色体的条带,雄性产生1条源于X染色体的条带(311 bp)和1条片段长度为251 bp的源于Y染色体的条带,对10枚胚胎进行鉴定,6枚为雄性,4枚为雌性。说明牙釉质基因巢式PCR扩增鉴定牛早期胚胎性别方法可靠,准确性和敏感性较高。; 马梦婷高庆华王姗姗陈晓利郑永富; 关键词：胚胎性别鉴定巢式PCR

奶牛宫颈粘液pH值与后代性别相关性分析被引量：2: 2015年; 为了解子宫颈粘液对奶牛后代性别影响，采集200头奶牛的子宫颈粘液，测定子宫颈粘液的pH值并记录与其相应编号的母牛后代性别用以推测宫颈粘液pH值与后代性别的相关性。实验结果显示子宫颈粘液的pH值越高后代为雄性的几率越大，反之宫颈粘液pH值越低产雌性个体的几率越大。奶牛子宫颈粘液phi〈6.7的母牛，后代性别多为雌性，pH值≥7.6时，后代多为雄性，奶牛子宫颈粘液pH值在6.8～7.5之间时，雌雄后代数目较为均等，接近于1：1。; 于涛马梦婷陈晓利王姗姗高庆华; 关键词：奶牛宫颈粘液 PH值性别控制

3D与平面培养条件下马鹿茸间充质干细胞的生长特性比较: 2017年; 细胞体外3D培养技术更有利于细胞功能的表达和发挥,是细胞组织工程的重要研究内容。马鹿鹿茸间充质干细胞(MSCs)是一种新发现的成体干细胞,具有向软骨分化的能力。【目的】为了深入研究鹿茸MSCs细胞特性及软骨分化机制,【方法】利用水凝胶为支撑材料进行3D培养,与细胞平面培养方式对比,分析鹿茸MSCs的生长特性与变化。【结果】结果表明,3D培养组生长呈团状,形态呈梭型。两种培养法细胞生长曲线相似,培养至48 h后细胞进入对数生长期,平台期即培养144 h之后3D培养组细胞密度显著高于平面培养组(p<0.05);对两种方法培养312 h(13 d)的细胞进行PI染色,3D培养组细胞凋亡率(32.67±11.08%)低于平面培养组(37.18±10.21%),但两组间没有显著差异。; 郑永富张兆琴王姗姗陈晓利韩春梅; 关键词：细胞密度凋亡

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陈晓利

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