郭陈智
- 作品数：2 被引量：12H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院生物化学与分子细胞生物学系更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家教育部博士点基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 流式分选仪FACSAriaⅡ分选GFP阳性乳腺癌MCF-7细胞株的条件优化研究被引量：11
- 2013年
- 目的研究流式分选仪FACSAriaⅡ分选绿色荧光蛋白(GFP)阳性乳腺癌MCF-7细胞株时不同条件选择对分选后细胞的纯度、得率和活性的影响。方法流式分选仪FACSAriaⅡ分别选择70、85和100μm三种喷嘴以及4-way purity、purity、yield三种分选模式分选MCF-7细胞的GFP阳性稳转株,计数分选后的细胞并计算分选得率,流式细胞术检测分选细胞的纯度,锥虫蓝染色法检测分选细胞的活性。结果 70、85和100μm三种喷嘴分选GFP阳性细胞纯度均达99%以上,分选得率分别为(37.67±2.05)%、(56.33±2.62)%和(43.33±0.47)%,活细胞比例分别为(88.23±0.97)%、(91.87±1.05)%和(95.33±0.90)%;选择85μm喷嘴,4-way purity、purity和yield三种分选模式分选细胞的得率分别为(51.00±2.45)%、(67.33±2.05)%和(74.00±0.82)%,纯度分别为99.6%、99.3%和96.2%。结论流式分选仪FACSAriaⅡ分选乳腺癌MCF-7细胞GFP阳性稳转株,选择85μm喷嘴以及purity分选模式较合适。
- 郭陈智史桂英
- 关键词：纯度得率
- 利用流式分选技术富集小鼠单倍体精子细胞被引量：1
- 2014年
- 目的:建立并完善流式分选单倍体精子细胞的方法。方法:制备小鼠睾丸单细胞悬液;活细胞DNA染料Hoechst 33342孵育细胞;利用流式细胞术分选富集单倍体圆形精子细胞或长型精子细胞;在分选富集得到的精子细胞中,通过RT-PCR方法检测多种组蛋白乙酰化修饰酶基因的表达情况;检测组蛋白乙酰基转移酶抑制剂姜黄素对上述基因表达的影响。结果:用Hoechst 33342染色结合流式分选方法可以高效地富集高纯度的精子细胞,还可以进一步纯化圆形精子细胞与长型精子细胞。RT-PCR结果表明,与睾丸整体组织相比,精子细胞中组蛋白乙酰化修饰酶基因的表达具有特异性,并受姜黄素处理的影响。结论:该流式分选方法提高了富集单倍体精子细胞的效率和纯度,为阐明精子形成的机制提供了简便易学、适于推广的技术平台。
- 夏小雨郭陈智徐晨
- 关键词：小鼠
