刘楠
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
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- 重组人碱性成纤维细胞生长因子在大豆毛状根中的表达被引量：1
- 2007年
- 目的利用基因重组技术在大豆毛状根中表达hbFGF。方法将hbFGF基因克隆到pCambia1301载体,以大豆子叶节和下胚轴为外植体,通过发根农杆菌C58C1介导转入到大豆中。经潮霉素抗性筛选,PCR法检测hbFGF基因的整合。用Western blot印迹分析hbFGF的表达。结果阳性毛状根中整合并表达了hbFGF基因。结论克隆hbFGF基因并转染到大豆的毛状根中,在毛状根中表达。
- 陈伟莉范伟全张新民刘楠韦安慧孔宁牟旭鹏颜炜群
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子大豆发根农杆菌毛状根
- 起始识别复合物结合位点对沉默子的辅助作用
- 2011年
- 背景:沉默子由起始识别复合物结合位点,阻遏活化蛋白RAP1等元件组成,人们对于沉默子的功能及相互关系有较多研究,但对组成沉默子的元件与基因沉默之间关系的研究很少。目的:研究起始识别复合物结合位点对沉默子基因沉默的辅助作用。方法:用右侧带有报告基因URA3的起始识别复合物结合位点,以及不带任何结合位点的序列替代酵母基因组HML区域的HML-I沉默子后,比较URA3基因表达量,并使用DNA拓扑法分析染色质的结构变化。结果与结论:HML-E沉默子单独存在的情况下,酵母无法在FOA平板上生长,但在起始识别复合物结合位点的辅助下,能够在FOA平板上生长,两者之间区域的染色质大多为负超螺旋。因此可知起始识别复合物结合位点能增加HML-E沉默子作用范围,产生这种作用的原因是两者相互作用下形成紧密的染色质结构。
- 张新民王浩天刘楠于群颜炜群毕鑫
- 关键词：沉默子拓扑结构酿酒酵母基因沉默
- 不同原沉默子对基因沉默的作用
- 2011年
- 目的:探讨不同原沉默子对基因沉默的作用和基因沉默差异的原因。方法:用不同原沉默子替换HML-I沉默子,在有无HML-E沉默子时,比较报告基因URA3表达量的变化以及染色质结构的不同。结果:删除HML-E沉默子且HML-I替换成原沉默子RAP1p、ORC和ABF1结合位点的3株酵母菌种在SC-ura及SC+FOA平板上的生长状态相同;HML-E沉默子存在的条件下,HML-I替换成原沉默子RAP1p、ORC和ABF1结合位点的3株酵母菌种在SC-ura平板上的生长状态没有区别;在FOA平板上,HML-I替换成原沉默子RAP1p结合位点的菌株无法生长,HML-I替换成ABF1结合位点以及ORC结合位点的菌株能够存活并形成了与HML-I替换成HMR-E菌株相似的特异性泳带。结论:沉默子与原沉默子相互作用对基因表达起一定程度的沉默作用,染色质结构的差异可能导致了基因沉默的差异。
- 张新民刘楠于群王浩天颜炜群毕鑫
- 关键词：基因沉默沉默子
- 自主复制序列结合因子1结合位点拷贝数对基因沉默的影响
- 2011年
- 目的研究自主复制序列结合因子1(Autonomously replicating sequence-Binding Factor,Abf1)的拷贝数对基因沉默的影响。方法用右侧带有报告基因URA3的不同拷贝数的abf1p结合位点,以及不带任何结合位点的序列替代酵母基因组HML区域的HML-I沉默子后,在HML-E存在和不存在这两种情况下,比较URA3基因表达量的差异。结果在HML-E沉默子存在的条件下,在缺失尿嘧啶合成缺陷型培养板(-ura)上,所有的菌体生长状态相差不多,但是在5-氟乳清酸(5-Fluoroorotic Acid,FOA)平板上,随拷贝数的增加,菌株生长状态越好。但是在HML-E不存在的条件下,无论是-ura还是FOA平板上酵母都无法存活。结论 Abf1p结合位点独自无法对插入的外源基因进行沉默,它形成基因沉默需要沉默子的帮助,并且随着拷贝数增加基因沉默的能力增强。
- 张新民于群毕鑫刘楠王浩天成岩颜炜群
- 关键词：基因沉默酿酒酵母
