刘慧芳
- 作品数：14 被引量：9H指数：2
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 黑线仓鼠及其白化突变系肌张力异常蛋白变体X1基因的克隆与序列分析研究
- ：将黑线仓鼠及其白化突变系肌张力异常蛋白变体X1基因编码区进行序列比对分析,试揭示黑线仓鼠及其白化突变系肌张力异常蛋白变体X1基因编码区之间是否存在变异.方法：根据小鼠与大鼠的同种型肌张力异常蛋白变体X1段基因设计6对引...
- 易思萌刘慧芳曾林孙兆增王新
- 关键词：实验动物基因序列
- Alpha-亚麻酸对HepG2细胞脂肪酸合成关键基因的影响
- 2014年
- 目的探讨不同剂量Alpha-亚麻酸(ALA)对硬脂酸培养后的HepG2细胞脂肪酸合成基因表达的影响。方法 HepG2细胞分为对照组(NC)以及含有0.5 mmol/L硬脂酸的培养液培养高脂组(HF),培养36 h后应用实时定量PCR检测脂肪酸合成关键基因SREBP1C、FAS及ACC表达;基因表达存在显著差异后分别用10%、20%、50%、70%、100%ALA替代硬脂酸培养36 h,实时定量PCR和免疫印迹法检测上述基因mRNA水平及蛋白表达。结果硬脂酸处理后HepG2细胞SREBP1C、FAS及ACC基因显著升高(P<0.001),ALA替代组SREBP1C基因mRNA表达水平均显著低于高脂组(P<0.001),0.5 mmol/L ALA组及0.35 mmol/L ALA组FAS显著低于高脂组(P<0.001),各替代组ACC基因mRNA水平与高脂组无统计学差异;替代组SREBP1C及FAS蛋白表达水平显著低于高脂组,而ACC蛋白表达量与高脂组无明显差异。结论硬脂酸促进HepG2细胞脂肪酸合成,ALA通过抑制SREBP1C及FAS基因表达来减弱脂肪酸合成。
- 李微张涛解现星孟威刘慧芳肖霖力李春风刘源
- 关键词：基因表达
- 猕猴B病毒囊膜蛋白gD基因真核细胞表达载体的构建及表达
- 2015年
- 目的构建猕猴B病毒囊膜蛋白gD的真核表达载体,并且检测其在293T细胞内的表达情况。方法首先通过基因合成手段获得含B病毒gD蛋白的基因片段,在经由PstⅠ和NotⅠ双酶切后连接到pEGFP-N3载体,随后将构建的pEGFP-N3-GD重组质粒转染到人胚胎肾上皮细胞系293T细胞。再用Western blot检测所提蛋白其在细胞内的表达情况,并用激光共聚焦分析其在细胞内的表达定位情况。结果成功获得携带gD基因的阳性重组质粒pEGFP-N3-GD,且pEGFP-N3-GD重组质粒能在293T细胞的表面正常表达。结论利用真核表达系统,既能够在细胞表面产生B病毒gD蛋白的特异性重组抗原,而且可用于B检测抗原的制备。
- 王新易思萌刘慧芳马凯范君文马雨楠游颖孙兆增
- 关键词：真核表达
- 一种经络穴位模型
- 本实用新型公开了一种经络穴位模型，以TEP材料制作成中空的TEP模型本体，TEP模型本体体表上标注有经络和/或穴位；在模型本体的内部安装电源，如果需要教学人体/动物体的经络，则沿着每一条经络设置一条带有分支开关的分支电路...
- 王新卞陆杰孙书芳吴帅成单虎杨婧刘慧芳马艳
- 文献传递
- 水貂肠道酵母菌的分离鉴定及系统发育分析被引量：6
- 2013年
- 为了获得水貂专用的有益菌种,以为研究毛皮动物益生菌制剂提供理论基础。从健康水貂的肠道中分离纯化出2株酵母菌,编号为JM1和JM2,进行了形态学观察、生理生化试验以及26SrDNA基因序列分析,并构建了系统发育进化树,同时对其生长情况和安全性等进行了综合鉴定。传统鉴定方法和26SrDNAD1/D2区序列分析结果表明:JM1为弗比恩毕赤酵母,菌株JM2为酿酒酵母;生长情况结果表明:2菌株在14～30h生长较快,在30～40h生长趋于平稳;2菌株培养液中糖度12h时波美度开始急速下降,并且在26h后有升高趋势;安全性试验显示:2菌株对小鼠均无毒性,且在2.73×107cfu/mL时小鼠生长速度最快。
- 魏亚松刘慧芳邹玲温建新刘国庆
- 关键词：水貂酵母菌系统发育分析
- Frizzled 3、Frizzled 4基因对黑线仓鼠A:CHA白化性状产生影响的初步分析
- 2017年
- 为了比较Wnt通路重要结合受体Frizzled家族的Frizzled 3、Frizzled 4受体蛋白基因在黑线仓鼠及其白化突变系(A:CHA)皮肤组织的表达差异,分析这两种基因对白化性状产生的影响,试验提取黑线仓鼠和A:CHA的皮肤组织总RNA,利用普通PCR方法筛选引物,通过实时荧光定量PCR技术比较黑线仓鼠和A:CHA皮肤组织Frizzled 3、Frizzled 4基因表达量的差异。结果表明:黑线仓鼠皮肤中的Frizzled 3、Frizzled 4基因mRNA的相对表达量分别是A:CHA组织中的4倍、5倍。Frizzled 3、Frizzled 4基因在A:CHA皮肤组织中的表达量下调。说明Frizzled 3、Frizzled 4基因与A:CHA白化性状的产生存在一定关联。
- 王新刘慧芳易思萌殷慧慧孙兆增
- 关键词：黑线仓鼠FRIZZLEDFRIZZLED实时荧光定量PCR
- 黑线仓鼠及其白化突变系(A:CHA)皮肤差异表达基因的筛选和验证
- 黑线仓鼠白化突变系（A：CHA）是徐植岚等人在黑线仓鼠种群内发现的一种自发突变的眼皮肤型白化动物。A：CHA品系在体表寄生虫，皮肤微循环、辐射防护、以及流行病学等各方面的应用，都表现出了比黑线仓鼠具有更多的优越性。A：C...
- 刘慧芳
- 关键词：动物模型差异基因表达高通量测序
- 文献传递
- 棕头蜘蛛猴Atfu-B基因α2结构域缺失剪切异构体的表达及其细胞内定位被引量：1
- 2013年
- 目的 Atfu-B* sv1是棕头蜘蛛猴主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)I类分子的一种剪切异构体,其α2结构域缺失。本实验旨在初步获得其在细胞内的表达和定位信息,并与全长的Atfu-B基因的表达情况进行比较,观察两者之间的差异。方法分别构建Atfu-B*sv1以及全长Atfu-B基因AtfuB*02:03和Atfu-B*03:01的真核表达载体,并将这三种重组质粒分别转染293T细胞。利用Western blot免疫印迹实验检测这三种基因在细胞内的表达情况,并利用免疫荧光和激光共聚焦显微镜技术分别分析这三种基因在细胞内的表达定位。结果 Atfu-B*sv1、Atfu-B*02:03和Atfu-B*03:01均能在293T细胞内正常表达,并且都发生了糖基化的修饰,三种基因都在细胞膜上表达。结论虽然Atfu-B*sv1的α2结构域缺失,但其细胞内的表达和定位与全长全长Atfu-B基因没有明显差异,其功能有待于进一步探索。
- 曹玉华严翔刘一曾林隋丽华赵彦斌刘冰刘慧芳孙兆增李莲瑞
- 猕猴B病毒gB蛋白胞外区基因片段的合成和真核表达
- 2014年
- 目的获得猕猴B病毒gB蛋白胞外区基因,并分析其表达特性。方法利用基因合成的方法合成B病毒gB蛋白胞外区的基因片段,经BamHⅠ和NotⅠ双酶切后连接到pEGFP-N3载体。将构建的pEGFP-N3-GB合重组质粒转染到293细胞。提取蛋白用Western blot检测其在细胞内的表达情况,并利用激光共聚焦分析在细胞内的表达定位。结果 pEGFP-N3-GB合重组质粒能在293细胞内正常表达,并且在细胞膜上表达。结论利用真核表达系统,可以产生B病毒gB蛋白的特异性抗原重组蛋白,且在细胞膜上表达。
- 刘慧芳孙书芳曾林易思萌游颖马雨楠范君文孙兆增王新
- 关键词：真核表达
- 猕猴B病毒gB和gC合成基因重组杆状病毒质粒的构建被引量：2
- 2013年
- 目的构建猕猴B病毒gB和gC合成基因的杆状病毒重组质粒(rBacmid)。方法根据本室已经合成的猕猴B病毒gB基因和gC基因,利用BamHI和XhoI特异性酶切,将其亚克隆于昆虫杆状病毒的pFastBacHTA转座载体。将该阳性转座载体转化到DH10bac感受态细胞,从中筛选出阳性重组细菌,并提取重组质粒。结果获得了重组质粒bacmid-gB和bacmid-gC。结论该研究为猕猴B病毒gB和gC蛋白在杆状病毒系统内的表达奠定了基础。
- 严翔曹玉华刘慧芳曾林隋丽华崔晓霞孙兆增何剑斌
- 关键词：GB基因GC基因杆状病毒
