肖潇
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:南华大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省研究生科研创新项目湖南省科技厅重点项目更多>>
- 相关领域:生物学核科学技术医药卫生环境科学与工程更多>>
- 耐辐射奇球菌pprI和pprA基因在真核细胞293T中的表达被引量:2
- 2016年
- 以pGADT-7-pprA、pet28a-pprI载体为模板,构建pEGFP-N1-pprA、pDsRed1-N1-flag-pprI真核表达载体,脂质体2000介导将两个重组载体共转入293T细胞。双酶切及琼脂糖凝胶电泳显示在4700、1000 bp处与4800、1100 bp处出现目的条带。测序结果显示构建序列与模板序列一致,氨基酸序列100%正确。荧光显微镜下见到红色和绿色荧光;Western blot结果显示在不同检测水平65 kDa及60 kDa大小处有融合蛋白表达。结果提示pEGFP-N1-pprA、pDsRed1-N1-flag-pprI真核表达载体构建成功,并在离体293T细胞中共同表达蛋白。证明原核基因pprI、pprA能够在真核细胞中共表达,为后续实验验证DR菌高抗性基因pprA、pprI及其产物在辐射调控网络中的相互作用和协同作用、提高真核细胞的辐射抗性提供了研究基础。
- 肖潇马云肖方竹唐艳杨奇黄波唐旻何淑雅
- 关键词:耐辐射奇球菌PPRI真核细胞
- 耐辐射奇球菌PprA及PprI蛋白相互作用及其对真核细胞辐射抗性的影响
- 目的:电离辐射对机体的损伤80%来自于辐射水解形成的活性氧自由基的攻击,故提高抗氧化水平是增强抗辐射能力的首选途径,提高DNA损伤修复能力也非常重要。近年来辐射防护基因治疗以其靶标明确、方便灵活等优点成为一个新的热点策略...
- 肖方竹肖潇马云王五洲唐艳何淑雅
- 耐辐射奇球菌pprM DNA结合域功能分析预测与基因敲除重组体的构建被引量:1
- 2013年
- 通过生物信息学分析发现,pprM基因含有冷休克DNA结合域。利用Overlap PCR方法获得pprM基因DNA结合域缺失的基因片段pprMΔCSD后,酶切扩增的片段和自杀质粒空载体pk18mobsacB,并将目的基因片段与自杀质粒载体连接构建重组载体pk18mobsacB-pprMΔCSD,将重组子转化大肠杆菌JM109感受态,筛选出阳性克隆,酶切及测序鉴定。成功构建pprM DNA结合域基因敲除重组体,且生物信息学分析预测结果显示pprM DNA结合域与耐辐射奇球菌抗辐射功能相关。
- 杨杰苏泽红李斌元马云肖潇范美婷李伟王秋岩何淑雅
- 关键词:耐辐射奇球菌重叠延伸PCR