周哲
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人胰高血糖素样肽-2类似物基因串联体构建及原核细胞表达被引量：2
- 2011年
- 利用同尾酶法构建人胰高血糖素样肽-2类似物{PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)}基因串联体重组质粒,实现目的基因在大肠杆菌中高效表达。通过PCR扩增获得PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)基因片段,利用同尾酶BamHⅠ和BclⅠ产生相同的粘性末端,经连接、转化、筛选等操作构建其基因串联体。经DNA测序分析,成功构建PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)的二、四、六、八拷贝基因串联体。SDS-PAGE显示,各重组菌经D-乳糖诱导后均表达目的融合蛋白,其相对分子质量与预期结果相符,目的肽含量并非随串联个数增加而明显增加,改变融合伙伴后,目的肽的表达量从0.106 g/L提高到0.372 g/L,为大量制备和纯化PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)奠定了基础。
- 李泰明刘涛张美由马艳红周哲谷春娇庄舰峰刘景晶
- 关键词：串联体同尾酶
