刘秋瑾
- 作品数:11 被引量:34H指数:4
- 供职机构:黑龙江八一农垦大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:黑龙江省博士后科研启动基金黑龙江省杰出青年科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 2015—2016年黑龙江三个地区猫冠状病毒N基因分子流行病学调查被引量:8
- 2018年
- 为了明确2015—2016年黑龙江三个地区猫传染性腹膜炎(FIP)病例中猫冠状病毒(FCoV)的流行情况,试验在黑龙江哈尔滨、大庆和齐齐哈尔地区采集26份经临床初步诊断患FIP的猫腹水样品,应用巢式RT-PCR技术对FCoV N基因进行扩增,对阳性样品进行序列分析、构建血清型和生物型遗传进化树。结果表明:巢式RT-PCR扩增出24份阳性样品,FCoV阳性率为92.31%(24/26)。24个FCoV毒株N基因序列分析显示,核苷酸序列同源性为89.0%~100%,推导氨基酸序列同源性为89.6%~100%。N基因血清型遗传进化树分析显示,23株属于FCoV-Ⅰ群,其中8株属于FCoV-Ⅰa亚群,15株形成一个独立的FCoV-Ⅰb亚群;1株属于FCoV-Ⅱ群,并与5个美国参考毒株及1个匈牙利参考毒株具有较近的亲缘关系。N基因生物型遗传进化树分析显示,24株属于FIPV生物型,其中18株形成一个单独FIPV亚群,与日本UCD1株亲缘关系较近,与美国参考毒株和匈牙利参考毒株亲缘关系较远。说明在黑龙江哈尔滨、大庆和齐齐哈尔地区阳性渗出型FIP病例中,主要以FCoV-Ⅰ型毒株感染为主。
- 刘秋瑾孙东波王欣宇李春秋武瑞郭东华
- 关键词:分子流行病学N基因遗传进化
- 中国几省市猪萨佩罗病毒巢式RT-PCR检测与遗传进化分析被引量:4
- 2019年
- 为了准确了解猪萨佩罗病毒(Porcine Sapelovirus,PSV)在中国流行情况及遗传进化规律,试验针对PSV 5’-NTR基因利用巢式RT-PCR方法对2015~2017年来自中国部分省市规模化猪场采集的368份样品进行检测,将阳性样品对VP1基因进行克隆、测序、构建进化树。巢式RT^PCR检测结果表明,368份样品中24份样品为阳性,总阳性率为6.52%;8份样品测序成功,序列分析结果表明核苷酸同源性为77.0%~99.7%,推导的氨基酸序列同源性为83.6%~100.0%,遗传进化分析结果显示,中国地区的PSV病毒呈现出遗传多样性,其中3个毒株与德国参考毒株亲缘关系较近,2个毒株与国内外参考毒株的亲缘关系均较远,变异较大。研究丰富了PSV分子流行病学资料,为进一步研究该病毒提供了参考。
- 张备李春秋苏明俊刘秋瑾乔成鹏朱金海孙东波
- 关键词:VP1分子流行病学
- 猪整合素β3多克隆抗体制备与鉴定
- 2016年
- 为了制备猪整合素β3多克隆抗体,试验利用大肠杆菌原核表达系统,对密码子优化的猪整合素β3基因主要抗原区进行原核表达,表达的重组蛋白纯化后,免疫Balb/c雌性小鼠,采血后分离血清,进一步通过ELISA和Western-blot对制备的猪整合素β3多克隆抗体进行鉴定。结果表明:猪整合素β3基因主要抗原区获得了成功表达,表达蛋白分子质量为102 ku左右,以纯化重组蛋白作为免疫原制备的多克隆抗体效价为1∶12 800,且能识别天然猪整合素β3。
- 高晶王志慧郭东华李春秋苏明俊王欣宇赵喜文王恩雨魏姗刘秋瑾孙东波
- 关键词:整合素Β3原核表达重组蛋白多克隆抗体病毒受体病毒感染
- 肝脏纤维化复合模型的改良及病理组织学评价被引量:3
- 2018年
- 为了建立完善、快速、高效肝脏纤维化动物模型,试验采用乙醇灌胃、高脂饲料喂养、高糖饮水等复合因素,并结合腹腔注射CCl4建立大鼠肝脏纤维化模型,并对肝脏纤维化形成病变和相关指标进行评价。结果表明:复合因素的改良能够促进大鼠肝脏纤维化的形成,造模8周大鼠肝脏细胞变性坏死,汇管区和肝小叶间纤维组织增生,可见胶原纤维沉积,形成典型肝脏纤维化的假小叶病变;大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、伽马谷氨酰胺转肽酶、白蛋白、总蛋白、胆固醇水平与对照组比较差异显著;与纤维化形成密切相关的转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白表达均呈阳性反应。说明试验建立的肝脏纤维化改良方法成功率高,形成时间短,模型稳定。
- 刘秋瑾原冬伟王晓雅张佳韧刘宏睿范文禄任永鑫
- 关键词:肝脏纤维化病理组织学免疫组织化学
- 2014—2015年黑龙江省哈尔滨地区犬冠状病毒M基因分子流行病学调查被引量:4
- 2016年
- 为调查黑龙江省哈尔滨地区犬冠状病毒(CCo V)的流行情况,本研究通过RT-PCR对141份腹泻犬粪便拭子样品中CCo V M基因片段(409 bp)进行了扩增,进一步对M基因进行了测序和分子进化性分析。结果表明:在141份样品中,38份样品为CCo V阳性(26.95%,38/141),其中CCo V-Ⅰ型和CCo V-Ⅱ型分别占13.16%(5/38)和86.84%(33/38)。M基因序列分析表明:5个CCo V-Ⅰ型毒株M基因序列的核苷酸同源性为95.7%~99.1%,推导的氨基酸序列同源性为97.4%~100%;33个CCo V-Ⅱ型毒株M基因序列的核苷酸同源性为97.4%~100%,推导的氨基酸序列同源性为100%;33个CCo V-Ⅱ型毒株与中国参考毒株HF3的核苷酸同源性为88.7%~96.2%,推导的氨基酸序列同源性为92.2%~97.4%。进化树分析表明:5个CCo V-Ⅰ型毒株与2个巴西参考毒株呈现出较近的亲缘关系;33个CCo V-Ⅱ型毒株形成五个亚群,与中国参考毒株(除NJ17毒株)和国外参考毒株表现出较远的亲缘关系。可见CCo V在犬腹泻中呈现出较高感染率,以CCo V-Ⅱ型毒株感染为主,并表现出遗传多样性。
- 王欣宇王福军辛科睿魏姗王恩雨郜洪泉王志慧邢宇昕赵喜文孙筱璇边秀东刘秋瑾孙东波
- 关键词:M基因流行病学
- 一例猫传染性腹膜炎的诊断被引量:8
- 2018年
- 为了确诊黑龙江八一农垦大学动物医院接诊的一例11月龄布偶猫所患疾病,通过剖检观察并采集病变组织进行苏木精-伊红染色(H.E.染色),观察其病理变化;应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术进行核酸复检。结果表明:胃、直肠、结肠等组织中均能扩增出猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)N基因片段,并且剖检及病理切片观察可见典型病理变化,说明该猫患有猫传染性腹膜炎。
- 蒋剑成王志慧张思瑶刘秋瑾郭东华
- 关键词:病理变化RT-PCR
- 变形蹄奶牛血清shotgun蛋白质组学分析
- 2016年
- 为了揭示变形蹄奶牛血清蛋白表达谱,探索奶牛变形蹄发生的机制,试验利用鸟枪法(shotgun)蛋白质组学技术分别对健康奶牛(UA,n=26)和变形蹄奶牛(HD,n=40)的混合血清样品进行了鉴定和生物信息学分析,进一步分析UA和HD样品的差异蛋白,并对选择的差异蛋白进行验证。结果表明:在UA样品中鉴定了393个蛋白,其中224个蛋白为高度可信蛋白;在HD样品中鉴定了409个蛋白,其中225个蛋白为高度可信蛋白。UA和HD样品中鉴定的蛋白,在分子功能、细胞进程和细胞成分分类中显示出明显的差别。在UA和HD样品中存在着24个潜在的差异蛋白,其中18个蛋白来自HD样品,6个蛋白来自UA样品;在HD样品潜在的差异蛋白中,桥粒蛋白(desmoplakin)、连接桥粒斑珠蛋白(junction plakoglobin)和钙磷脂结合蛋白A2(annexin A2)与奶牛变形蹄发生具有潜在的相关性。通过ELISA或Western-blot对UA和HD样品中的免疫球蛋白(Ig G)、牛结合珠蛋白(Bo Hp)、补体C4和补体C8进行了验证,说明变形蹄奶牛血清蛋白表达谱发生了变化。
- 赵喜文郭东华谷城曲永利王欣宇苏明俊魏姗王恩雨王志慧刘秋瑾辛科睿武瑞孙东波
- 关键词:奶牛变形蹄血清蛋白质组学差异蛋白
- 猫传染性腹膜炎病毒检测用引物组和试剂盒及其检测方法
- 本公开提供了猫传染性腹膜炎病毒检测用引物组,其中,该引物组包括SEQ ID NO.1‑4所示的引物。本公开还提供了猫传染性腹膜炎病毒的检测方法和试剂盒。通过上述技术方案本公开建立了新的猫传染性腹膜炎病毒的检测技术,能够实...
- 孙东波刘秋瑾郭东华武瑞王建发贺显晶李春秋
- 文献传递
- 2015~2018年中国部分地区猫冠状病毒检测及S基因遗传进化分析
- 猫冠状病毒(Feline coronavirus,FCoV)在世界猫群中广泛流行,猫感染FCoV可患猫传染性腹膜炎(Feline infectious peritonitis,FIP),FIP是导致猫死亡的主要传染病之一...
- 刘秋瑾
- 关键词:S基因遗传进化分析
- 文献传递
- 2014-2015年黑龙江三个地区犬细小病毒2型VP2基因序列分析
- <正>为了分析黑龙江三个地区犬细小病毒2型(CPV-2)流行毒株遗传演化的规律及流行现状,对2014年5月至2015年4月黑龙江三个地区有腹泻症状的201份犬粪便拭子样品以VP2为目的基因片段进行PCR扩增,测序及分子进...
- 刘秋瑾孙东波
- 关键词:VP2基因分子序列
- 文献传递