目的观察冰片与苯扎氯铵合用对兔角膜上皮细胞凋亡的作用。方法以200μg·m L-1冰片与不同浓度的苯扎氯铵(2,4μg·m L-1)联合作用于兔角膜上皮细胞,用噻唑蓝(MTT)法检测上皮细胞的活性;Annexin-V/PI染色流式细胞仪法检测上皮细胞的凋亡情况;Real time RT-PCR法检测细胞凋亡相关基因Fas、Caspase3m RNA的表达;Western Blot法检测Fas、Caspase3蛋白的表达。结果冰片与苯扎氯铵合用可明显增强苯扎氯铵对兔角膜上皮细胞活性的抑制作用(P<0.01);增强苯扎氯铵的促凋亡作用(P<0.01);促进角膜上皮细胞Fas、caspase3的m RNA表达(P<0.01)及蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论冰片与苯扎氯铵合用,可增强苯扎氯铵的细胞毒性,促进兔角膜上皮细胞的凋亡及Fas、caspase3 m RNA和蛋白的表达。
【目的】观察冰片对兔角膜上皮细胞的损伤作用。【方法】以浓度分别为100、200、400μg/m L的冰片作用于兔角膜上皮细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,Annexin V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染法流式细胞仪检测细胞凋亡率;Real-time PCR法检测细胞凋亡相关基因Caspase-3 m RNA的表达。【结果】不同浓度的冰片均可抑制兔角膜上皮细胞的活性;与正常对照组比较,冰片组可增加兔角膜上皮细胞的凋亡率,增强Caspase-3 m RNA的表达(P<0.05或P<0.01)。【结论】冰片能抑制兔角膜上皮细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,其机制与增强凋亡相关基因Caspase-3m RNA的表达有关。
