段琼
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 负载肿瘤干细胞膜微粒的DC-CIK/CTL细胞协同西妥昔单抗对结直肠癌细胞的杀伤作用及其机制被引量：6
- 2016年
- 目的:探讨负载结直肠癌干细胞膜微粒(membrane microparticles,MMPs)DC-CIK与西妥昔单抗(Cetuximab,C225)对EGFR靶向药耐药结直肠癌细胞的靶向协同杀伤作用及其机制。方法:PCR法检测结直肠癌SW480、SW620、HCT116株细胞k-RAS突变状态,无血清悬浮细胞培养法富集SW480、HCT116肿瘤干细胞,RT-PCR检测干细胞标志物Sox-2和Oct-4。提取外周血单个核细胞培养DC与CIK,将结直肠癌干细胞MMPs负载DC后再与CIK共孵育。形态观察及MTT法分别检测DC-CIK/CTL细胞及其培养上清、C225单独和合并处理对SW480、SW620、HCT116及其干细胞的杀伤效应;RT-PCR检测DC-CIK/CTL细胞培养上清、C225单独和合并作用对SW480、SW620、HCT116细胞凋亡相关基因Fas和上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关E-钙黏蛋白和波形蛋白基因的表达,划痕实验测定DC-CIK/CTL细胞培养上清、C225单独及联合作用对结直肠癌细胞侵袭行为影响。结果:SW480、SW620和HCT116细胞均为k-RAS突变型;富集培养获得的结直肠癌干细胞样细胞高表达Sox-2和Oct-4 mRNA。MMPs负载DC-CIK/CTL细胞及其分泌上清与C225对结直肠癌细胞的抑制有协同作用。C225与MMPs负载DC-CIK/CTL上清联合组相对于两者单独作用组能提高Fas与E-钙黏蛋白基因的表达;联合组的迁移率比两者单独作用组小。结论:负载结直肠癌干细胞MMPs的DC-CIK/CTL细胞对EGFR靶向药耐药结直肠癌细胞有体外特异靶向杀伤效应,且与C225显著协同,其发生机制与逆转细胞EMT和诱导细胞凋亡有关。
- 庞翠王金燕胡志昊段琼李丁刘文超张菊
- 关键词：结直肠癌西妥昔单抗
- 全文增补中
- 负载肺癌干细胞膜微粒的DC-CIK对耐药肺癌细胞的靶向杀伤作用及对肺癌干细胞凋亡的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:探讨负载肺癌干细胞膜微粒的DC-CIK细胞对EGFR-TKI耐药肺癌细胞的杀伤作用及对肺癌干细胞凋亡的影响机制。方法:无血清悬浮细胞培养法富集EGFR-TKI耐药肺癌细胞A549、H292干细胞样细胞,RT-PCR检测干细胞标志物,裸鼠成瘤实验鉴定致瘤性。超滤和差速离心法获取肺癌干细胞膜微粒。流式细胞术分别测定共孵育组和常规培养组DC成熟标志CD86和CD83,测定两组DC-CIK细胞表型CD3^+、CD3^+CD8^+、CD3^+CD56^+、CD3^+CD4^+;形态观察及MTT法分别测定不同效靶比两组DC-CIK对A549、H292的杀伤效应;ELISA法分别检测两组DC-CIK上清中IL-2、IFN-γ、TNF-α分泌水平;流式细胞术分别测定两组DC-CIK对肺癌干细胞凋亡的影响。结果:富集培养获得的EGFR-TKI耐药肺癌干细胞样细胞高表达干细胞标志物Sox2和Oct4,并具较强裸鼠致瘤性。负载膜微粒的DC成熟标志CD86和CD83较常规DC表达显著升高;负载膜微粒的DC-CIK较常规DC-CIK细胞表型CD3^+、CD3^+CD8^+、CD3^+CD56^+、CD3^+CD4^+升高,对EGFR-TKI耐药肺癌细胞杀伤效应高于常规DC-CIK,并具有显著提高的靶向趋向性;负载膜微粒的DC-CIK分泌因子对EGFR-TKI耐药肺癌干细胞样细胞凋亡的影响与常规DC-CIK不同。结论:与常规培养DC-CIK相比,负载膜微粒的DC-CIK活性提高,对EGFR-TKI耐药肺癌细胞的体外特异靶向杀伤效应显著提高。细胞分泌因子可显著上调耐药肺癌干细胞的细胞凋亡率。
- 段琼王金燕苏海川刘征丽孙建中唐兴宇庞翠刘文超张菊
- 关键词：肺癌干细胞
