马楠
- 作品数：13 被引量：16H指数：3
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省科学技术计划项目辽宁省自然科学基金辽宁省医学高峰建设工程项目更多>>
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- 金刚烷胺对脊髓小脑共济失调3型ATXN3基因变异表达的抑制作用
- 2019年
- 目的研究金刚烷胺对于SCA3神经元的保护作用及其机制.方法该研究分为变异型ATXN3组、野生型ATXN3组及空白对照组.建立表达野生型ATXN3-Q14和变异型ATXN3-Q75基因片段的细胞模型,并对其进行鉴定和培养.在上述细胞模型中分别加入不同浓度的盐酸金刚烷胺溶液(1,5,10μg/mL)进行干预,空白对照组加等剂量的去离子水.药物干预48 h后,采用MTT法测定不同组别的细胞活力.采用AnnexinⅤ-FITC测定细胞凋亡,样品用流式细胞仪进行分析.采用Western Blot法检测不同浓度金刚烷胺对ATXN3变异表达的抑制作用.结果(1)在变异型组中,用10μg/mL金刚烷胺干预时,从24 h起HEK293T细胞的增殖率显著高于空白对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);而5μg/mL及1μg/mL干预组与空白对照组相比,48 h内细胞增殖率无明显变化.(2)不同浓度的金刚烷胺均能不同程度地减少变异型组HEK293细胞的凋亡,且有剂量依赖性,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).而不同浓度金刚烷胺干预野生型的细胞凋亡率和空白对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).(3)与空白对照组相比,金刚烷胺5μg/mL组和10μg/mL组的变异型ATXN3-Q75蛋白表达被明显抑制(P<0.05);而金刚烷胺1μg/mL组对变异型ATXN3-Q75蛋白表达仅轻度抑制(P>0.05);不同浓度的金刚烷胺对野生型ATXN3-Q14蛋白表达仅有轻度抑制作用(P>0.05).结论该研究表明金刚烷胺对ATXN3基因变异表达具有抑制作用,可能成为SCA3治疗的潜在方向.
- 欧阳嶷张婧阎雪晶马楠丁玉璋
- 关键词：金刚烷胺泛素蛋白酶体系统
- 树突状细胞感染PSMA/4-1BBL基因重组腺病毒后的免疫功能变化被引量：1
- 2012年
- 目的:观察复制缺陷型腺病毒介导的人前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)基因和肿瘤坏死因子配体超家族成员4-1BB配体(4-1BB ligand,4-1BBL)基因体外共同感染的树突状细胞(dendritic cell,DC)的免疫学功能变化。方法:Ad-GFP空载体感染未成熟DC,确定最适MOI。将感染的健康志愿者外周血来源DC分为Ad-PSMA/4-1BBL-DC组(共感染组)、Ad-PSMA-DC组、Ad-4-1BBL-DC组、Ad-GFP-DC组以及未感染DC组,荧光倒置显微镜观察DC的形态学变化,流式细胞仪分析CD80、CD83、CD86等表型变化,Western blotting检测DC上PSMA和4-1BBL蛋白的表达,ELISA法检测各组DC上清的IL-12水平,CCK-8法检测各组DC刺激自体T淋巴细胞增殖能力及对人前列腺癌细胞株LNCap、Du145和22RV的细胞毒作用。结果:确定最佳MOI为200。共感染组DC表面CD80、CD83、CD86、HLA-DR共刺激分子均上调,明显高于未感染DC组[(38.72±0.99)%、(44.65±0.77)%、(63.60±0.75)%、(62.25±0.58)%vs(28.27±1.04)%、(28.08±1.16)%、(41.05±1.33)%、(46.87±1.12)%;P<0.05]。共感染组IL-12分泌水平明显高于单个基因重组腺病毒感染组及未感染组[(134.29±2.22)vs(79.51±1.60)、(70.33±1.13)、(69.67±1.43)、(28.88±2.97)pg;P<0.05]。DC∶T同一比例下,共感染组刺激自体T细胞增殖能力明显高于单感染组及未感染组(P<0.05)。PSMA/4-1BBL-DC-CTL对PSMA阳性的LNCap细胞的杀伤率明显高于对另两种PSMA阴性细胞DU145、22RV的杀伤率(P<0.05),也明显高于PSMA-DC-CTL组、4-1BBL-DC-CTL组的杀伤率(P<0.05)。结论:Ad-PSMA/4-1BBL感染后,DC不但高分泌IL-12,还能刺激和增强肿瘤特异性CTL对PSMA阳性前列腺癌细胞的杀伤作用;Ad-PSMA和Ad-4-1BBL共感染DC较单一感染DC能更有效诱导肿瘤特异性CTL。
- 杨明花王帅孙海燕刘晓辉马楠隋承光
- 关键词：4-1BBL基因细胞毒性T淋巴细胞
- 肾癌细胞和G250单克隆抗体复合物致敏树突状细胞肿瘤疫苗的制备
- 2012年
- 目的:以肾癌细胞和G250单克隆抗体(G250 monoclonal antibody,G250 mAb)复合物致敏树突状细胞(dendriticcells,DC)制备肾癌DC疫苗,并检测其活化水平,为临床应用DC肿瘤疫苗提供依据。方法:制备凋亡的肾癌细胞与G250mAb形成的复合物(G250 mAb IgG-complexed apoptotic tumor cell,IC-ATC)。取健康人新鲜外周血分离单个核细胞(peripheralblood mononuclear cell,PBMC),以GM-CSF和IL-4诱导PBMC成未成熟的树突状细胞(immature dendritic cells,iDC),将iDC分别负载凋亡肿瘤细胞(apoptotic tumor cell,ATC)、IC-ATC、G250 mAb,并均以TNF-α诱导成熟树突状细胞(mature dendriticcells,mDC),将未负载的DC作为对照组。流式细胞术检测各组mDC的免疫表型、ELISA试剂盒检测IL-12分泌水平,CCK-8法检测mDC刺激淋巴细胞增殖的能力。结果:成功制备IC-ATC致敏的DC疫苗。相对于负载ATC、G250mAb和未负载的DC,负载IC-ATC的DC疫苗显著上调CD86、CD80、CD83、HLA-DR的表达[(42.04±3.42)%vs(28.34±1.16)%、(33.77±1.61)%、(26.52±2.14)%,P<0.05;(38.17±2.55)%vs(23.79±2.41)%、(31.94±3.29)%、(24.32±3.23)%,P<0.05;(79.39±1.44)%vs(69.06±2.01)%、(74.49±1.35)%、(66.71±3.83)%,P<0.05;(35.52±2.72)%vs(26.90±2.82)%、(29.45±1.58)%、(27.42±2.11)%,P<0.05]和IL-12分泌水平(25.04 vs 5.27、13.32、7.53,P<0.05),且能更有效地刺激淋巴细胞增殖(4.02 vs 1.73、1.22、1.41,P<0.01)。结论:IC-ATC可有效促进DC成熟和活化,IC-ATC致敏的DC疫苗诱导淋巴细胞增殖能力显著增强。
- 孙海燕刘晓辉马楠王扬蒋涛刘云鹏姜又红
- 关键词：树突状细胞肾癌肿瘤疫苗
- Smad3小干扰RNA在转化生长因子β_1作用下对树突状细胞成熟及功能的影响被引量：3
- 2012年
- 目的研究通过RNA干扰技术阻断外周单核细胞来源的树突细胞(DC)内的Smad3,并在转化生长因子β(1TGF-β1)作用下对DC的成熟和免疫抑制作用的影响。方法设计针对Smad3特异性小干扰RNA(siRNA),利用RNAiMAX转入DC,并用RT-PCR检测转染效果。实验分Control-DC组、TGF-β1-Control-DC组、TGF-β1-Negative siRNA-Smad3 DC组和TGF-β1-siRNA-Smad3 DC组。流式检测各组DC成熟表型的变化,ELISA检测各组DC上清白细胞介素12(IL-12)的水平,CCK-8法检测DC刺激同种异体T细胞增殖的能力。结果 TGF-β1-siRNA-Smad3 DC组表面成熟标志CD80、CD83、CD86、HLA-DR及IL-12分泌水平明显高于TGF-β1-Control-DC组和TGF-β1-Negative siRNA-Smad3 DC组(P<0.05),且TGF-β1-Negative siRNA-Smad3 DC组刺激同种异体T细胞增殖的能力显著增强。结论通过阻断DC的Smad3表达,可以逆转TGF-β1对DC成熟和免疫功能的抑制。
- 马楠祁馨卉崔慧霞李妍刘云鹏姜又红
- 关键词：SMAD3肿瘤疫苗
- 脉冲式冲管加正压封管联合静脉留置针护理在宫颈癌化疗患者中的应用效果被引量：3
- 2022年
- 宫颈癌化疗过程中易发生静脉炎等不良事件。静脉留置针能减少穿刺,对缓解化疗期间患者的痛苦具有积极意义。为延长留置针的使用时间,本文探讨宫颈癌患者化疗期间脉冲式冲管加正压封管联合静脉留置针护理的临床效果,报告如下。1资料与方法1.1临床资料选择2018年6月-2020年6月我院收治的62例宫颈癌化疗患者,采用抽样法随机将其分为对照组与观察组,每组各31例。对照组:年龄35~68岁,平均(45.85±2.71)岁;观察组:年龄36~67岁,平均(45.72±2.62)岁。两组的一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
- 马楠
- 关键词：宫颈癌患者脉冲式冲管正压封管抽样法
- 腺病毒转染对树突状细胞成熟的影响被引量：1
- 2013年
- 目的研究腺病毒转染能否促进树突状细胞(DC)的成熟。方法分别用复制缺陷型腺病毒空载体(Ad-null)和表达乳腺珠蛋白的重组腺病毒(Ad-MGBA)转染DC(Ad-null DC组和Ad-MGBA DC组),用添加和不添加肿瘤坏死因子(TNF-α)的DC作为对照组(TNF-αDC组),另设DC空白对照组。用相差显微镜观察DC的形态变化,用流式细胞术检测各组DC表面成熟标志CD80、CD83、CD86的变化,用ELISA检测各组DC上清中白细胞介素12(IL-12)的变化。结果除DC空白对照组外,其余3组DC均表现出成熟DC的形态;转染DC组(Ad-null DC组和Ad-MGBA DC组)CD80、CD83、CD86、IL-12的表达水平均介于DC空白对照组和TNF-αDC组之间,在Ad-null DC组与Ad-MGBA DC组之间上述分子表达无统计学差异。结论转染腺病毒载体能够促进DC的成熟,但促进DC成熟的作用低于TNF-α对DC促成熟的作用。
- 崔慧霞李妍祁馨卉马楠姜又红张文陆
- 关键词：重组腺病毒树突状细胞转染
- 团队合作舒适护理在腹腔镜下子宫肌瘤剔除术中的应用价值被引量：5
- 2022年
- 子宫肌瘤是临床常见的良性肿瘤,可出现于各年龄段女性中[1]。腹腔镜下子宫肌瘤剔除术是治疗子宫肌瘤的有效术式。为加速患者术后康复,有必要在围术期开展高质量的护理干预。本文探讨团队合作舒适护理在腹腔镜下子宫肌瘤剔除术中的应用价值,现报告如下。
- 马楠
- 关键词：舒适护理腹腔镜下子宫肌瘤剔除术子宫肌瘤团队合作术后康复良性肿瘤
- GPC3基因重组慢病毒载体的构建及其在肝癌细胞中的表达被引量：2
- 2013年
- 目的构建含有GPC3的shRNA序列慢病毒表达载体并转染肝癌细胞,观察其转染效率及在肝癌细胞中的表达。方法应用重组DNA技术,将设计好的GPC3基因特异性siRNA序列构建至慢病毒表达载体pGLV3-GFP上,并应用脂质体法转染293T细胞,进行病毒包装及滴度测定。采用RT-PCR及Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测转染HepG2细胞后GPC3基因的表达情况。结果慢病毒载体构建成功,并测定滴度为1×108TU/mL,转染后,GPC3基因表达明显降低。结论成功构建GPC3基因的shRNA慢病毒载体,所介导的RNAi能有效抑制靶细胞中GPC3基因的表达。
- 祁馨卉崔慧霞马楠姜又红
- 关键词：GPC3RNA干扰慢病毒载体
- GPC3基因重组慢病毒载体的构建及其在肝癌细胞中的表达
- ：构建含有GPC3的shRNA序列慢病毒表达载体并转染肝癌细胞,观察其转染效率及在肝癌细胞中的表达. 方法：应用重组DNA技术,将设计好的GPC3基因特异性siRNA序列构建至慢病毒表达载体pGLV3-GFP上,并...
- 祁馨卉崔慧霞马楠姜又红
- 关键词：肝癌细胞基因重组慢病毒载体
- Smad3 siRNA对树突状细胞疫苗抗乳腺癌作用的影响
- 2013年
- 目的:研究在通过siRNA(small interference,RNA)干扰技术沉默外周单核细胞来源的树突细胞(dentritic cells,DC)的Smad3,阻断TGF-β1/Smad3传导通路,并在外源性TGF-β1(transforming growth factorbeta-1,TGF-β1)的作用下对树突状细胞疫苗的影响。方法:针对设计Smad3特异性siRNA利用RNAIMAX转入DC细胞并用Westen-blot法检测Smad3的沉默效果。应用重组人粒细胞-单核细胞集落刺激因子(hmGM-CSF)和重组人白介素-4(hmIL-4),刺激DC成熟。利用反复冻融的方法提取乳腺癌细胞MCF-7的全抗原。实验分组:Control-DC-冻融抗原(Ag)组、TGF-β1-Control-DC-冻融抗原(Ag)组、TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组和TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组。流式检测各组DC成熟表型的变化,ELISA检测各组DC上清IL-12的水平,CCK-8法检测DC诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀瘤活性。结果:TGF-β1-siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组表面成熟标志CD80、CD83、CD86、HLA-DR(P<0.05)及IL-12分泌水平(P<0.05)明显高于TGF-β1-Control-DC-冻融抗原(Ag)组和TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-冻融抗原(Ag)-DC组。且TGF-βI-siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀瘤活性较TGF-β1-Control-DC-冻融抗原(Ag)组、TGF-β1-Negtive siRNA-Smad3-DC-冻融抗原(Ag)组明显增强。结论:通过沉默DC的Smad3的方法,阻断TGF-β1/Smad3传导通路,能逆转TGF-β1对DC分化发育和递呈乳腺癌相关抗原的作用。
- 马楠祁馨卉崔慧霞李妍刘云鹏姜又红
- 关键词：树突状细胞TGF-Β1SMAD3肿瘤疫苗
