李海贤
- 作品数：11 被引量：33H指数：3
- 供职机构：佛山科学技术学院食品科学与工程学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学医药卫生农业科学更多>>
- 海洋放线菌乙酰CoA连接酶的克隆
- 2018年
- 克隆稀有海洋放线乙酰CoA连接酶合成基因的基因片段。根据Salinispora arenicola CNS-205的核苷酸序列保守区设计两对乙酰CoA连接酶特异性引物,以其总DNA为模板,采用PCR的方法扩增得到了包含乙酰CoA连接酶的完整的基因片段,并将该片段成功插入到克隆载体pUC-18中。将重组质粒进行酶切验证并在检测机构中验证测序结果正确,成功地获得了稀有海洋放线菌Salinispora arenicola的乙酰CoA连接酶合成基因的基因片段,为进一步研究该基因的功能奠定了基础。
- 马艳玲李海贤翁萍刘泽璇许小庆曾荣
- 关键词：海洋放线菌PCR克隆测序
- 海洋放线菌细胞色素P450基因的克隆和分析
- 2017年
- 本文研究克隆海洋放线菌Salinispora arenicola细胞色素P450基因,以期为后续研究奠定基础。根据已发表的细胞色素P450基因设计两对特异性引物,采用PCR方法扩增细胞色素P450基因片段,使用分子生物学软件进行序列分析,通过实验获得了海洋放线菌Salinispora arenicola细胞色素P450基因片段,为研究该基因的功能奠定了基础。
- 马艳玲李海贤翁萍刘泽璇许小庆曾荣
- 关键词：海洋放线菌细胞色素P450次生代谢产物
- 苗族特色凉茶饮料的开发被引量：1
- 2018年
- 以草珊瑚、箭杆风、金银花、仙草、甘草5种中药材为原料,采用单因素试验和正交试验的方法开发一种具有苗族特色的凉茶饮料。结果表明,苗族特色凉茶饮料的最佳配方为草珊瑚用量5 g,金银花用量5 g,箭杆风用量4 g,甘草用量5 g,仙草用量4 g,黄原胶用量0.15 g,白砂糖用量6 g,料液比1∶100(g∶m L),CMC-Na添加量0.15%时,凉茶饮料的稳定性最好,呈橙黄色,色泽明亮、均匀一致,具有金银花的清香,口感滋润。
- 方舒婷曾荣李海贤李韵仪龙立卓
- 关键词：草珊瑚仙草
- 海洋放线菌铁蛋白的克隆
- 2017年
- 本文利用PCR技术,以海洋放线菌为DNA的模板,克隆出铁蛋白的目的基因片段,然后进行酶切,再与载体p UC18结合构建重组质粒,转移到大肠杆菌中,然后提取质粒,通过酶切验证和测序验证重组质粒是否正确。该基因的克隆为进一步研究该基因的功能奠定了基础。
- 马艳玲李海贤翁萍刘泽璇许小庆曾荣
- 关键词：海洋放线菌铁蛋白克隆PCR
- 海洋放线菌酰胺酶AM合成基因的克隆
- 2018年
- 克隆稀有海洋放线菌酰胺酶AM合成基因的基因片段。根据Salinispora arenicola CNS-205的核苷酸序列保守区设计两对酰胺酶特异性引物,以其总DNA为模板,采用PCR的方法扩增得到了包含酰胺酶AM的完整的基因片段,并将该片段成功插入克隆载体pUC-18中。将重组质粒进行酶切验证,并在检测机构中验证测序结果正确,成功地获得了稀有海洋放线菌Salinispora arenicola的酰胺酶AM合成基因的基因片段。
- 马艳玲李海贤翁萍刘泽璇许小庆曾荣
- 关键词：海洋放线菌ECORI酰胺酶
- 青金桔格瓦斯的加工工艺研究被引量：8
- 2018年
- 采用青金桔汁和面包为主要原料,乳酸菌和啤酒酵母菌为发酵菌株,分别对青金桔汁的添加量和处理方法,以及调配时机进行了探讨,发酵制备青金桔格瓦斯饮料。试验结果显示,青金桔汁的添加量为5.0%(V/V),果汁处理方法为压榨取得原汁,处理时机为发酵前调配时感官评分测定最佳,在此条件下发酵得到的青金桔格瓦斯不仅具有传统格瓦斯的营养成分,还添加了青金桔丰富的营养价值,且风味独具特色。
- 方舒婷曾荣李海贤李韵仪李晓君
- 关键词：格瓦斯面包
- 正交试验法优化酰胺酶PCR条件被引量：1
- 2017年
- 以Salinispora arenicola的总DNA作为研究材料,将正交实验法应用于聚合酶链式反应(PCR)上,探求4种主要因素(退火温度、退火时间、DMSO、引物量)在3个水平上的最佳使用量,迅速找到最佳PCR条件,为后续一系列实验铺平道路。实验得出10μL反应体系最佳PCR条件为:DMSO 0.6μL;引物0.6μL;退火温度56℃;退火时间20 s。经验证确定该条件能大大提高目标条带扩增量。
- 马艳玲苏思韵刘玉美杨锐洁邵智航刑福炜巫小邦陈锦灵李海贤曾荣
- 关键词：酰胺酶PCR正交试验法
- 海洋放线菌酰基转移酶基因的克隆
- 2017年
- 对稀有海洋放线菌酰基转移酶进行基因的克隆得到目的片段。先设计两对酰基转移酶特异性引物,以总DNA为模板,然后通过PCR扩增的方法得到酰基转移酶的完整的基因片段,并将该片段插入载体p UC18中,以酶连的方法对重组质粒进行酶切,得到的片段进行验证,成功地获得了稀有海洋放线菌酰基转移酶的基因片段。
- 马艳玲李海贤翁萍刘泽璇许小庆曾荣
- 关键词：基因克隆PUC18
- 海洋放线菌(Salinispora arenicola)基因转移系统的建立
- 2018年
- 该实验旨在建立海洋放线菌Salinispora arenicola基因转移系统,以便基因敲除和外源基因表达等遗传操作。以整合型质粒pSET152和p IB139为出发质粒,通过接合转移构建了海洋放线菌Salinispora arenicola的基因转移系统。结果表明,25μg/m L阿泊拉霉素可有效筛选接合子,大肠杆菌与孢子的比例为8:1时可获得较多的转化子。经聚合酶链式反应(PCR)验证,质粒成功整合到菌株海洋放线菌S.arenicola基因组中,接合子经多次传代后,导入的质粒pSET152和pIB139仍稳定整合于接合子基因组上。成功构建了海洋放线菌S.arenicola接合转移系统。
- 马艳玲李海贤翁萍刘泽璇许小庆曾荣
- 关键词：海洋放线菌
- 丁香酚对金黄色葡菌球菌抗菌作用的探究被引量：20
- 2017年
- 为了寻找代替化学防腐剂的绿色安全天然添加剂,研究了丁香酚对金黄色葡萄球菌的抑菌作用。以丁香酚为原材料,采用96孔板微量稀释法和琼脂平板稀释法确定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),通过菌落数直观地确定丁香酚对金黄色葡萄球菌的MIC值和MBC值;并以分光光度计法探究不同质量浓度丁香酚对金黄色葡萄球菌中苹果酸脱氢酶(MDH)和琥珀酸脱氢酶(SDH)酶活性的影响。结果表明,丁香酚对金黄色葡萄球菌的最低抑制浓度(MIC)为600μg/mL,最低杀菌浓度(MBC)为700μg/mL,其可将金黄色葡萄球菌菌体蛋白质质量浓度、苹果酸脱氢酶(MDH)酶活、琥珀酸脱氢酶(SDH)酶活分别降至0.033 mg/mL、8.28 U/mg、2.40 U/mL,原因可能是抑制了菌体三羧酸循环和电子链传递中相关关键酶的活性。
- 马艳玲李海贤曾荣
- 关键词：丁香酚抗菌作用苹果酸脱氢酶琥珀酸脱氢酶
