张湘奇
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浦东新区科技发展基金上海市“科技创新行动计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 消癌平注射液对人肝癌HepG2和MHCC97H细胞侵袭和转移抑制作用及分子机制研究被引量：3
- 2019年
- 目的:研究消癌平注射液(XAP)对人肝癌HepG2和MHCC97H细胞侵袭和转移抑制作用及分子机制。方法:MTT法检测XAP对人肝癌细胞株HepG2和MHCC97H的增殖抑制作用,通过划痕实验、Transwell实验检测XAP对HepG2和MHCC97H细胞迁移能力的抑制作用,采用Transwell包被基质胶实验检测XAP对HepG2和MHCC97H细胞侵袭能力的抑制作用,应用Western blotting方法检测XAP对HepG2和MHCC97H细胞MYOF、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响。结果:MTT法结果显示,当XAP浓度为80μl·ml^(-1)作用24 h时,HepG2和MHCC97H细胞的存活率约为70%; XAP浓度为120μl·ml^(-1)及160μl·ml^(-1)时,对HepG2和MHCC97H细胞的增殖抑制作用逐渐增强(P<0.01)。48 h时,XAP呈剂量依赖性抑制HepG2和MHCC97H细胞的增殖(P<0.05或P<0.01)。划痕实验和Transwell实验结果显示XAP呈剂量依赖性地抑制佛波酯(12-O-tetradecanoylphorbol13-acetate,TPA)诱导的HepG2和MHCC97H细胞迁移(P<0.05或P<0.01)。Transwell包被基质胶实验显示XAP呈剂量依赖性地抑制TPA诱导的HepG2和MHCC97H细胞的侵袭(P<0.05或P<0.01)。Western blotting结果表明XAP抑制TPA诱导的HepG2和MHCC97H细胞中MYOF、MMP-2、MMP-9蛋白表达的升高(P<0.05或P<0.01)。结论:消癌平注射液能够抑制肝癌HepG2和MHCC97H细胞的侵袭和转移,其抑制作用可能与调控MYOF从而抑制基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9表达相关。
- 杨姣杨姣陈君君张湘奇祁美娟韩永龙
- 关键词：消癌平注射液HEPG2MHCC97H
- 丹红注射液对人原代肝细胞尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶的体外抑制作用被引量：2
- 2017年
- 目的研究丹红注射液对Ⅱ相药物代谢酶尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGTs)的体外抑制作用。方法随机将新鲜的人原代肝细胞分为3组:实验组(丹红注射液)、阳性对照组(酮康唑)和空白对照组。分别将7个不同含量的丹红注射液(0.14%,0.41%,1.23%,3.70%,11.10%,33.30%和100.00%)、不同浓度的酮康唑溶液(1.37,4.12,12.30,37.00,111.00,333.00和1000.00μmol·L^(-1))10μL和纯化水与探针底物7-羟基香豆素(1000μmol·L^(-1))10μL置于人原代肝细胞体外孵育体系80μL中,共同孵育15 min。用液相色谱-串联质谱法测定代谢产物7-羟基香豆素-D-葡萄糖醛酸苷的含量(代表UGTs活性),并计算其IC50值(表示丹红注射液对UGTs的抑制程度)。结果含量分别为0.00%,0.01%,0.04%,0.12%,0.37%,1.11%,3.33%和10.00%的丹红注射液(在孵育体系中稀释了10倍)对UGTs的抑制率分别为0,-1.6%,3.2%,8.2%,5.2%,17.1%,38.3%和71.4%,且呈浓度依赖性抑制作用。与空白对照组比较,1.11%,3.33%,10.00%的丹红注射液差异均有统计学意义(P<0.05)。在人原代肝细胞体外孵育体系中,丹红注射液对UGTs的IC50值为4.9%。结论丹红注射液对人原代肝细胞UGTs有较弱的抑制作用,不太可能导致与UGTs相关的药物相互作用。
- 张婧娴张湘奇石美智张素行张科之杨姣郭澄韩永龙
- 关键词：丹红注射液尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶药物相互作用
- TAB1——基于蛋白质组学的卵巢癌紫杉醇耐药的潜在生物标志物探讨被引量：1
- 2021年
- 目的:探究卵巢癌对紫杉醇(PTX)耐药的潜在靶点及其相关机制。方法:体外培养卵巢癌A2780细胞和A2780PTX耐药细胞(A2780/T),采用不同浓度(2,4,8,16,32,64,128,256μmol·L^(-1))PTX分别干预24 h或48 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测PTX对A2780细胞和A2780/T细胞存活率的影响,利用液相色谱质谱/质谱(LC-MS/MS)非标记(Label-Free)定量蛋白质组学方法鉴定和筛选两组细胞中表达差异的蛋白,通过基因本体(GO)注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,筛选卵巢癌细胞对PTX耐药的潜在生物标志物。以正常培养的A2780细胞作为空白组,采用0,1,4μmol·L^(-1)的PTX处理A2780/T细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测验证潜在靶点转化生长因子-β活化激酶1结合蛋白1(TAB1)及其下游相关分子转化生长因子-β活化激酶1(TAK1),p38有丝分裂活化蛋白酶(MAPK)mRNA和蛋白的表达水平。结果:与空白组比较,PTX干预组的A2780和A2780/T细胞的活力均降低。PTX对A2780细胞的抑制率明显高于A2780/T细胞。A2780细胞中,PTX处理48 h的半抑制浓度(IC50)为0.002μmol·L^(-1),A2780/T细胞中,PTX的IC50>设置的最高浓度128μmol·L^(-1),与A2780细胞相比,A2780/T细胞对PTX具有耐药性。通过非标记定量蛋白质组学分析筛选出A2780/T和A2780细胞之间有441种差异表达蛋白和421种特殊差异表达蛋白。GO功能富集分析显示,在差异表达的蛋白质中,结合蛋白占大多数(80%)。根据KEGG通路分析结果和表达位点分析,TAB1被认为可能是卵巢癌对PTX耐药的潜在生物标志物。与A2780细胞比较,A2780/T细胞的TAB1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),与TAB1相互作用的TAK1 mRNA和p38 MAPK mRNA亦明显降低(P<0.05,P<0.01),但蛋白表达无显著变化。结论:TAB1可能是卵巢癌对PTX耐药的潜在生物标志物,其机制可能与TAB1/TAK1/p38 MAPK通路有关。
- 丁亚伟陈君君张湘奇张葳周丽孔欠文石美智姜波周阳云汪晓河许剑锋韩永龙韩永龙
- 关键词：卵巢癌紫杉醇耐药生物信息学
- CYP3A65及上游核受体基因PXR和AHR2在斑马鱼生长发育阶段的表达
- 2019年
- 为了选择处于最佳生长阶段的斑马鱼用于药物代谢研究,本实验考察不同生长阶段斑马鱼全鱼、肝脏和肠道组织中CYP3A65及其上游核受体基因(PXR、AHR2)mRNA表达水平的变化规律。实验测定CYP3A65、PXR和AHR2相对表达量,并通过比较核受体基因与代谢酶基因mRNA之间的相关性来证实核受体基因的调控作用。结果显示,144 hpf和75 dpf两个生长阶段的斑马鱼中CYP3A65、PXR和AHR2 mRNA表达量最高;斑马鱼生长阶段中代谢酶基因和核受体基因的表达趋势一致,且受肝脏、肠道组织占全鱼比重的影响。研究表明,幼鱼期144 hpf斑马鱼及稚鱼期75 dpf的斑马鱼最适用于CYP3A65代谢研究;CYP3A65与PXR、CYP3A65与AHR2的mRNA表达之间有显著的相关性,与AHR2的相关性更显著。
- 祁美娟石美智张婧娴陈君君张湘奇杨姣杨姣郭澄
- 关键词：斑马鱼PXRMRNA表达发育阶段
- 6种抗肿瘤中药注射液对卵巢癌细胞中ATF3 mRNA表达的影响被引量：6
- 2019年
- 目的考察消癌平注射液、艾迪注射液、华蟾素注射液、复方苦参注射液、斑蝥酸钠维生素B_6注射液、参芪扶正注射液对卵巢癌细胞A2780、SK-OV-3中转录激活因子3(ATF3)mRNA表达的影响。方法 6种不同浓度中药注射液作用于卵巢癌细胞24 h后,MTT法、RT-PCR法分别检测细胞增殖率、ATF3 mRNA表达。结果各中药注射液均有抑制卵巢癌细胞增殖的作用,并呈浓度依赖性。其中,华蟾素注射液可在抑制细胞增殖的同时抑制ATF3 mRNA表达,斑蝥酸钠维生素B_6注射液显著上调该因子mRNA表达,一定浓度消癌平注射液、艾迪注射液、复方苦参注射液、参芪扶正注射液对其mRNA表达也呈下调作用。结论 6种抗肿瘤中药注射液对卵巢癌细胞中ATF3 mRNA表达有抑制或诱导作用,其机制可能与中药活性成分影响肿瘤发展和转移有关。
- 张湘奇陈君君杨姣石美智祁美娟肖霄韩永龙
- 关键词：卵巢癌细胞
- 消癌平注射液调节核受体增强紫杉醇抑制卵巢癌A2780细胞增殖的机制被引量：7
- 2019年
- 目的探讨消癌平注射液通过调节核受体PXR/CAR增强紫杉醇抑制卵巢癌A2780细胞增殖的作用机制。方法分别将20,40,80,160 mg·mL^(-1)消癌平注射液,10,40,80,160 nmol·L^(-1)紫杉醇单用,或两药联用于人卵巢癌细胞A2780细胞株,采用噻唑蓝(MTT)法检测药物对细胞的抑制率,倒置相差显微镜观察药物对细胞形态的影响,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测药物对PXR、CAR及下游药物代谢酶CYP2C8、CYP3A4、CYP3A5和转运体P-gp的mRNA表达的影响,Western blotting法检测药物对PXR、CYP2C8蛋白表达的影响。结果消癌平注射液处理卵巢癌A2780细胞后,细胞增殖受到抑制,且随药物浓度增加、作用时间延长,抑制率显著增加;与紫杉醇单用组比较,消癌平注射液联用紫杉醇后对细胞增殖的抑制作用更为显著;RT-PCR和Western blotting结果显示消癌平注射液可抑制紫杉醇激活的PXR及下游代谢酶CYP2C8的mRNA和蛋白的表达。结论消癌平注射液与紫杉醇联用能够增强紫杉醇对卵巢癌A2780细胞增殖的抑制作用,其机制可能与消癌平注射液抑制与药物代谢相关的核受体PXR和下游药物代谢酶CYP2C8表达有关。
- 张湘奇陈君君杨姣石美智祁美娟肖霄王洪斌韩永龙
- 关键词：消癌平注射液紫杉醇孕烷X受体药物代谢
- 丹红注射液对3种转运体的体外抑制作用研究被引量：1
- 2018年
- 目的:初步研究丹红注射液对药物转运体Na+-牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)、有机阴离子转运多肽(OATP)和有机阳离子转运体1(OCT1)的体外抑制作用。方法:将新鲜的人原代肝细胞随机分为3组:实验组(7个不同含量的丹红注射液0.03%、0.06%、0.12%、0.25%、0.50%、1.00%和2.00%),NTCP、OATP和OCT1分别对应的阳性药物(环孢素A溶液10μmol/L、利福霉素200μmol/L、维拉帕米溶液20μmol/L)对照组和空白对照组(汉克斯平衡盐溶液),分别取160μL工作溶液置于人原代肝细胞体外孵育体系中预孵育15 min,再加入三合一底物40μL(牛胆磺酸钠5μmol/L、瑞舒伐他汀5μmol/L和1-甲基4-苯基吡啶离子5μmol/L)共同孵育。用液相色谱-串联质谱法测定细胞裂解液中代表转运体活性的底物含量,并计算其IC_(50)值。结果:在人原代肝细胞体外孵育体系中,0.12%,0.25%,0.50%,1.00%和2.00%的丹红注射液对OATP的抑制作用与空白对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01)。丹红注射液对药物转运体NTCP、OATP和OCT1的IC_(50)值分别为≥2.00%、0.85%和>2.00%,且对OATP的IC_(50)值(0.85%)介于常用日剂量之间。结论:丹红注射液在体外对人原代肝细胞NTCP和OCT1有较弱的抑制作用,不太可能导致与它们相关的药物相互作用;但是对OATP有较强的抑制作用,提示我们当丹红注射液与其他经OATP转运的药物联用时,要注意药物间的相互作用,避免可能产生的不良反应。
- 张婧娴陈涛张湘奇石美智陈君君张科之杨姣郭澄王来友韩永龙
- 关键词：丹红注射液转运体药物相互作用
- 消癌平注射液联合紫杉醇对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用及机制研究被引量：4
- 2019年
- 目的:探讨消癌平注射液联合紫杉醇对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用及机制。方法:体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,以不同浓度的消癌平注射液联合紫杉醇进行干预,并与消癌平注射液、紫杉醇单药组进行比较,采用MTT法、细胞克隆实验和LDH检测细胞增殖和细胞毒性,DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS的产生,RT-PCR检测Mfn2 mRNA的表达。结果:消癌平注射液可显著抑制MCF-7细胞的增殖和克隆,增加LDH的释放,且消癌平注射液联合紫杉醇组较紫杉醇单药组作用更为显著;消癌平注射液可显著增加ROS的生成,但联合用药组与单药组相比无统计学差异;消癌平注射液可上调Mfn2 mRNA的表达,并显著提高紫杉醇引起的Mfn2 mRNA低表达。结论:消癌平注射液联合紫杉醇可能会通过调控Mfn2 mRNA的表达,引起线粒体功能损伤并抑制乳腺癌细胞的增殖,对紫杉醇抗乳腺癌发挥增效作用。
- 陈君君杨姣石美智张湘奇张婧娴祁美娟韩永龙
- 关键词：消癌平注射液紫杉醇乳腺癌MCF-7细胞MFN2
