肖芳
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院微基因药物实验室更多>>
- 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目国家基础科学人才培养基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- hVEGF121与βhCG融合蛋白的表达载体构建与初步表达
- 为了构建一种新型抗肿瘤融合蛋白疫苗,包含hVEGF121和βhCG抗原表位,并探索融合蛋白的纯化条件和方法.采用PCR方法,克隆VEGF和βhCG基因,并通过限制性内切酶NcoⅠ、EcoR Ⅰ和HindⅢ将两个基因逐个插...
- 曹荣月宦晓军孙翁李盼郑梅赵鹤肖芳杨梦琪龙军
- 关键词：ΒHCG克隆融合蛋白
- 真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2的构建及在小鼠骨髓树突状细胞中的表达被引量：1
- 2014年
- 为了构建含有绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)报告基因的M2真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2(2段热休克蛋白70表位序列407-426,mHSP70407-426,M2),探讨M2基因转染小鼠骨髓树突状细胞(Dendritic cell,DC)的表达情况。采用4轮PCR方法从pcDNA3.1(+)-GFP载体中将GFP编码序列扩增出来,并在其上游引入Kozak序列,下游引入M2序列,使用限制性内切酶HindIII和BamHI将目的片段插入到pcDNA3.1(+)中,利用质粒自带的氨苄青霉素抗性筛选出阳性克隆,获得重组基因的表达载体。重组载体通过转染试剂Lipofectamine2 000转染至DC中,通过倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞内的表达。构建的pcDNA3.1(+)-GFP-M2经双酶切、PCR和测序鉴定和预期结果一致。荧光显微镜观察显示在转染pcDNA3.1(+)-GFP-M2基因的树突状细胞中,荧光均匀地分布于整个细胞。成功构建含有绿色荧光蛋白报告基因的M2真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP-M2。M2基因成功转染至树突状细胞中。
- 曹荣月孙翁陈檬杨梦琪宦晓军肖芳李盼龙军
- 关键词：真核表达载体树突状细胞KOZAK序列
- 树突状细胞疫苗联合GM-CSF治疗黑色素瘤的研究
- 近年来用肿瘤细胞裂解物致敏的内源性树突状细胞(以下简称B-DC)已成为黑色素瘤治疗领域的新热点.然而其诱导的免疫反应强度不够，临床治疗结果不是很令人满意.在本次研究中，目的在于提高B-DC的免疫原性，增强B-DC的治疗效...
- 曹荣月孙翁陈檬宦晓军肖芳龙军张晓红方泰惠
- 关键词：黑色素瘤树突状细胞OK-432
