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曲古抑菌素A和5-氮杂-2'-脱氧胞苷对猪孤雌胚胎发育的影响: 2013年; 为了研究曲古抑菌素A(TSA)和5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对猪孤雌胚胎发育及胚胎质量的影响,试验采用猪卵母细胞孤雌激活的方法,孤雌激活后在胚胎培养液中分别添加不同浓度TSA和5-Aza-CdR,比较其对猪孤雌胚胎发育的影响。结果表明:40 nmol/L TSA处理24 h能显著提高孤雌胚胎的囊胚率及囊胚细胞个数(P<0.05),卵裂率无明显变化(P>0.05);30 nmol/L5-Aza-CdR处理48 h能显著提高孤雌胚胎的囊胚率(P<0.05),卵裂率与囊胚细胞个数均无明显变化(P>0.05)。说明在一定浓度条件下,TSA和5-Aza-CdR对猪孤雌胚胎发育的囊胚率有显著促进作用,5-Aza-CdR处理对卵裂率、囊胚细胞个数的影响不大,但TSA处理可以明显提高囊胚细胞个数,从而提高胚胎质量。; 康雅雅马红任亮赵诚悦齐贵龙柳樱子刘娣; 关键词：孤雌胚胎

猪ACSM3基因过表达/敲减质粒的构建: 2022年; 脂肪主要由甘油和脂肪酸组成,酰基辅酶A合成酶中链家族成员3(Acyl-CoA medium-chain synthetase3,ACSM3)是脂肪酸代谢第一步反应中的关键酶。为了深入研究ACSM3基因的生物学功能,采用克隆、测序、双酶切、连接等分子生物学技术,将ACSM3基因的完整编码区连入pcDNA3.1(+)载体内,构建该基因的过表达质粒;通过生物合成技术,构建该基因的敲减质粒。然后利用体外培养的猪前体脂肪细胞,检测ACSM3基因的过表达/敲减质粒的作用效果。结果表明,成功构建了ACSM3基因的过表达质粒,该质粒的过表达效果可一直持续到转染后的第8天。从3条特异性干扰序列中筛选出1条具有显著敲减效果的序列,敲减作用可持续到转染后的第2天。本研究所构建的过表达/敲减质粒,可为后续的ACSM3基因的功能研究提供有力的技术支持。; 张冬杰柳樱子柳樱子汪亮刘娣; 关键词：脂肪细胞过表达

猪microRNA-17-92基因簇分析: 2018年; 为了分析猪microRNA-17-92基因簇的结构和表达特性,试验采用生物信息学方法分析其序列保守性、PCR产物直接测序的方法检测其在民猪、荷包猪和大白猪中的多态性,并利用荧光定量PCR技术构建其原初转录本和成熟microRNA-18a的组织表达谱。结果表明：microRNA-17-92基因簇各成熟miRNA在猪、人、小鼠、鸡和非洲爪蟾等物种中高度保守;在microRNA-17-92基因簇3＇侧翼区发现一个SNP位点,为中度多态,各等位基因在民猪、荷包猪和大白猪群体中具有相似的频率;microRNA-17-92的原初转录本和成熟microRNA-18a普遍表达于所检测的组织中,但表达模式存在差异。说明猪microRNA-17-92基因簇各成熟miRNA受到严格的表达调控。; 柳樱子荆晓燕张彩霞宋艳芳刘娣杨秀芹; 关键词：荧光定量PCR 多态性

猪IRS1基因对C2C12细胞系增殖分化的影响被引量：2: 2021年; 本课题组在前期研究中发现IRS1是民猪和大白猪背最长肌中存在表达差异的一个关键基因,为了深入探讨IRS1在骨骼肌细胞中发挥的生物学功能,本研究首先将猪的IRS1基因完整编码区序列连入pcDNA3.1载体内,构建过表达质粒,同时人工合成IRS1的siRNA干扰序列,在C2C12细胞系内过表达或干扰IRS1基因,使用qRT-PCR技术检测生肌决定因子家族基因(MyoD、MyoG和Myf5)、决定肌纤维类型的MyHC I、MyHC IIa、MyHC IIb和MyHC IIx基因以及PI3K、Akt、FoxO1基因的表达变化情况。结果表明,干扰IRS1基因后,肌细胞分化受阻,MRFs表达有下降趋势,过表达IRS1后,MRFs在不同分化时间发生了显著上调,说明IRS1对MyoD、Myf5和MyoG的转录有促进作用。过表达IRS1基因后,决定肌纤维类型的MyHC IIa基因和MyHC IIx基因表达水平均在诱导分化第6天时发生显著上调,干扰IRS1基因后,MyHC I型肌纤维在第4天和第6天、MyHC IIx型在第6天时的表达量均发生了显著下调,说明IRS1可影响肌纤维类型。干扰IRS1基因后,诱导分化初期(2 d)Akt的表达量出现显著下调,到了诱导分化末期(6 d),FoxO1表达量出现显著上调,说明IRS1表达的变化可以激活IRS1/Akt/FoxO1信号通路。; 张冬杰柳樱子柳樱子汪亮刘娣; 关键词：C2C12细胞过表达实时定量PCR

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柳樱子