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李娇
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
北京农学院动物科学技术学院
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发文基金:
北京市自然科学基金
国家自然科学基金
北京市属高等学校人才强教计划资助项目
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相关领域:
生物学
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合作作者
吴国娟
北京农学院动物科学技术学院
王惠川
北京农学院动物科学技术学院
张中文
北京农学院动物科学技术学院
廖芳芳
北京农学院动物科学技术学院
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廖芳芳
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李娇
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中国畜牧兽医
年份
1篇
2012
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Arkadia表达载体转染肾小管上皮细胞条件的优化
被引量:1
2012年
本试验旨在优化泛素化酶Arkadia质粒表达载体pGPU6/GFP/Neo转染小鼠肾小管上皮细胞(renal tubular epithelialcells,RTECs)的条件,为研究Arkadia表达载体在小鼠马兜铃酸肾病(aristolochic acid nephrohathy,AAN)中的作用奠定基础。以小鼠RTECs为转染对象、脂质体LipofectamineTM2000为转染介质,采用Real-time PCR和CCK-8法检测不同的质粒与脂质体比例条件下Arkadia mRNA的表达差异及对细胞活性的影响;同时,用Real-time PCR检测不同的转染时间条件下表达载体对Arkadia mRNA沉默效果的差异。结果显示,Arkadia-pGPU6/GFP/Neo载体的转染效率表现出了一定的剂量和时间依赖性。当质粒DNA∶LipofectamineTM2000为0.66μg∶2μL、转染时间为24 h时,对Arkadia mRNA表达的抑制最明显并且对细胞的毒性最小。最终确定了Arkadia-pGPU6/GFP/Neo载体转染小鼠RTECs的最佳条件。
廖芳芳
李娇
王惠川
张中文
吴国娟
关键词:
转染
肾小管上皮细胞
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