温斐
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：清华大学化学工程系生物化工研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程更多>>
- 诺卡氏菌腈水合酶基因在重组毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2005年
- 为从基因水平上改造腈水合酶,进行了诺卡氏菌腈水合酶基因的外源表达研究。在重组大肠杆菌表达系统内,腈水合酶的α亚基几乎不能正常表达,在重组E.coliBL21(DE3)(pET32aNHBAX)中,腈水合酶活性仅为0.04Umg。构建重组毕赤酵母表达质粒pPIC3.5kNHBAX,采用电穿孔转化法将其转入宿主菌P.pastorisGS115中,经过菌株培养和腈水合酶的诱导表达,筛选获得了优选菌株P.pastorisNH4。对P.pastorisNH4的细胞培养和腈水合酶的诱导表达条件进行优化,结果表明,重组腈水合酶在毕赤酵母中的表达水平可以达到0.52Umg,但不能稳定积累。
- 于慧敏史悦田卓玲温斐沈忠耀
- 关键词：诺卡氏菌腈水合酶大肠杆菌毕赤酵母
