张喜庆 作品数:33 被引量:157 H指数:6 供职机构: 吉林农业大学动物科学技术学院 更多>> 发文基金: 国家现代农业产业技术体系建设项目 吉林省科技发展计划基金 吉林省教育厅科研项目 更多>> 相关领域: 农业科学 环境科学与工程 生物学 更多>>
牛源多杀性巴氏杆菌荚膜血清型及毒力基因检测 被引量:4 2017年 为了确定12株牛源多杀性巴氏杆菌的血清型及毒力基因的携带情况,本研究采用PCR技术对12株牛源多杀性巴氏杆菌(pasteurella maltocida,Pm)进行荚膜血清型鉴定和6种毒力基因(tbp A、hgb A、hgb B、ptf A、pfh A、tox A)的检测,并对其序列进行比对分析。结果显示:12株多杀性巴氏杆菌均为荚膜血清A型;100%的荚膜血清A型Pm携带hgb A毒力基因和pfh A毒力基因;41.67%的荚膜血清A型Pm携带nan H毒力基因;58.33%的荚膜血清A型Pm携带ptf A毒力基因;而对于tbp A与tox A两种毒力基因在12株牛源荚膜血清A型Pm中均未检测到。 王羽 董文龙 王巍 张喜庆 田佳琪 马红霞 高云航关键词:多杀性巴氏杆菌 毒力基因 畜禽养殖环境中微生物气溶胶的研究进展 被引量:15 2017年 畜禽舍内产生的微生物气溶胶不仅对动物以及从业人员健康产生较大影响,也给疾病防控带来一定难度。作为养殖场及周边环境的一个潜在污染源,对畜禽舍内微生物气溶胶的研究已经成为热点之一。本文针对微生物气溶胶的种类及来源、污染现状及危害、采集及检测方法、气溶胶中耐药菌及耐药基因的污染情况等作一综述,以期为研究畜禽养殖业微生物气溶胶提供较全面的理论依据。 张喜庆 勾长龙 娄玉杰 高云航关键词:微生物气溶胶 耐药菌 耐药基因 污染 基于响应面法优化以ABTS为底物的漆酶测定方法及其应用 被引量:3 2021年 为探索一种最佳的漆酶酶活力测定反应体系条件,从而确定更为准确的酶活力测定方法,以漆酶标品为研究对象,以2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)为底物,采用分光光度法确定漆酶标品稀释倍数与ΔOD值之间的线性关系以及最佳酶促反应时间,选取酶活力测定反应体系中的缓冲液浓度、pH值以及ABTS浓度作为影响因素进行单因素优化,以所测定漆酶酶活力为响应值进行响应面优化与评估。结果表明,漆酶标品稀释倍数在30~80之间与吸光度变化值线性关系良好,酶促反应中最佳酶活力测定时间为起始3 min。反应体系中当醋酸-醋酸钠缓冲液浓度为50 mmol/L、pH 4.0、底物ABTS浓度为1 mmol/L时,所测得漆酶标品酶活力最为接近真实值,为1 040.49 U/g。将优化好的反应条件应用于生产漆酶微生物的酶活力检测中,从而确定菌株的产酶性能,所优化的方法在测定微生物产酶活性方面十分稳定,具有可行性。 韩月颖 张喜庆 王琦 魏菁 刘继军 高云航关键词:漆酶 ABTS 响应面优化 牛源非脱羧勒克菌的分离鉴定及其耐药基因的检测 被引量:1 2017年 为诊断导致乳牛死亡的病原菌,于病死牛腹腔积液中分离得到1株具有致病性的优势菌株。经16S r DNA检测鉴定为非脱羧勒克菌。动物回归试验中,病牛肺、心外膜、喉头病理变化明显。以15种抗生素进行药敏试验,该非脱羧勒克菌对大环内酯和氨基糖苷类药物均呈显著耐药。耐药基因检测中大环内酯类耐药基因与氨基糖苷耐药基因均呈显性表达。 田佳琪 董文龙 王巍 王羽 盛宇轩 张喜庆 稽少泽 马红霞 高云航关键词:最小抑菌浓度 高效纤维素分解菌的分离鉴定及堆肥效果研究 被引量:19 2016年 采用CMC-Na平板法和刚果红染色法从自然发酵的牛粪中分离获得高效纤维素分解菌,通过形态学观察、生化试验及16S rDNA分子生物学对菌株进行鉴定,采用单因素法确定菌株的最佳培养条件,最后接种牛粪进行堆肥发酵观测其效果。结果表明:获得的菌株Y2鉴定为枯草芽孢杆菌;经产酶条件优化后,菌株Y2的滤纸酶活力(FPA)为15.83 u·mL^(-1),羧甲基纤维素酶活力(CMCA)高达100.81 U·mL^(-1),分别是优化前的1.3、2.76倍。堆肥试验结果表明:接种Y2组和EM菌剂组均在第3 d进入高温期(>50℃),且高温期分别维持了9 d和8 d,接种Y2组纤维素降解率达到42%,而EM菌剂组为35%,接种无菌水组只有10.5%。菌株Y2在堆肥发酵方面具有较大的应用潜力。 张喜庆 勾长龙 娄玉杰 徐佳萍 高云航关键词:纤维素降解菌 产酶条件优化 堆肥发酵 奶牛舍气溶胶微生物监测及环境影响因素分析 被引量:6 2018年 采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器在4个不同饲养阶段奶牛舍(A、B、C、D)内采集微生物气溶胶样本,通过测定牛舍环境中微生物气溶胶含量及其在ANDERSEN-6级采样器上的分布,分析环境因素与气载微生物含量的相关性,推断其对从业人员及牛体自身可能造成的危害。结果表明:不同饲养阶段牛舍环境中气载需氧菌含量存在一定差异,牛舍D(犊牛舍)内浓度最高,为3 484~3 596 CFU/m3,而在牛舍A(泌乳高峰期)内浓度最低,为1 332~1 434 CFU/m3。气载真菌在牛舍C(育成期)内浓度最高,为1 954~2 296 CFU/m3;在牛舍D(犊牛舍)内浓度最低,为1 742~1 791 CFU/m3,且二者差异显著(P<0.05)。此外,研究发现在不同饲养阶段的牛舍内气载微生物浓度与环境因子之间的相关性存在明显差异。研究结果对不同饲养阶段牛舍内改善和疾病预防具有一定的参考意义。 高云航 张喜庆 勾长龙 周海柱 马红霞 娄玉杰关键词:奶牛舍 环境因子 随机扩增多态性DNA技术对绿色气球菌的相关性分析 2017年 随着分子生物学的发展,16S、23S rRNA以及16S^23S rRNA已应用于菌种鉴定。16S^23S rRNA的基因间隔区相对于前两者有较高的变异性,弥补了16S和23S rRNA保守性强,分化程度不够的缺点。本研究对7株绿色气球菌和两株屎肠球菌扩增16S^23S rRNA基因间隔序列。通过随机扩增多态性DNA技术分析绿色气球菌DNA,评价不同菌株间的克隆相关性及耐药性。 王羽 董文龙 张喜庆 马红霞 高云航关键词:绿色气球菌 RRNA 随机扩增多态性DNA技术 病死猪堆肥高效降解复合菌系的构建及应用效果 被引量:4 2020年 为了缩短堆肥时间、提高堆肥产品质量,从病死猪好氧堆肥样品中筛选能高效降解蛋白质和脂肪的安全菌株,经拮抗验证后构建出病死猪堆肥高效降解复合菌系并进行现场堆肥试验.结果显示通过分离纯化共获得36株具有尸体降解能力的安全菌株,经酶活性测定复筛出10株具有较高蛋白酶及脂肪酶活性的菌株,对其进行菌种鉴定及菌株间拮抗研究后,混合构建为5组复合菌系,分别为A、B、C、D和E.通过比较复合菌系的蛋白酶及脂肪酶活性大小,进一步选择优选复合菌系E进行现场堆肥试验,结果表明堆肥期间对照组和接菌各组(2%和4%)最高温度分别达到约56.3、60.8和61.2℃;低剂量和高剂量接菌组堆肥温度达到55.0℃以上的高温天数均持续约7 d,显著高于对照组的3 d(P<0.01);堆肥结束时,对照组和接菌各组(2%和4%)降解率分别达到78.7%、97.7%和98.0%.本研究构建的复合菌系E可有效提高堆肥温度并延长高温维持时间,加速病死猪的降解. 嵇少泽 勾长龙 张喜庆 王羽 田佳琪 李晨 刘继军 高云航关键词:降解菌 脂肪酶 复合菌系 病死猪尸体降解复合菌的筛选、鉴定、优化及应用效果评价 2022年 【背景】我国生猪病死率较高,建立高效的病死猪尸体无害化处理方式尤为重要。【目的】提高病死猪尸体堆肥无害化处理效率。【方法】筛选具有蛋白质和脂肪降解功能的菌株,并构建复合菌剂,利用单因素和响应面方法对其菌种配比及降解条件进行优化,对其接种于病死猪和锯末堆肥进行应用效果评价。【结果】经鉴定,菌株DB1为粘质沙雷氏菌,所产蛋白酶活力为36.76 U/mL,猪肉降解率为72.17%。菌株ZF2为贝莱斯芽孢杆菌,所产脂肪酶活力为12.33 U/mL,猪肉降解率为70.83%。复合菌剂中DB1与ZF2最佳菌种配比为2.55:1,响应面优化其最佳降解条件为温度31.65℃、接种量3.11%、pH 6.0、盐度0.75%、Mn^(2+)浓度1 mmol/L。在此条件下进行猪肉降解实验,7d后降解率达90.61%。堆肥实验显示对照组和低、中、高接种量组堆肥峰值温度分别可达60、64、69和62℃。其中3%接种量的处理效果最佳,高温期可维持19 d,病死猪降解率达98.06%,各指标均极显著优于对照组(P<0.01)。【结论】首次根据生猪中肥瘦比设计猪肉降解实验来评价功能菌的作用效果,较前人方法有所改进。以猪肉降解率作为评价指标,优化了功能菌的菌种配比,与前人研究相比具有更好地加速堆肥升温和加快病死猪尸体降解的能力。 翟伟 张喜庆 刘继军 梁小军 高云航关键词:复合菌剂 菌种配比 堆肥 山羊源伪中间葡萄球菌的分离鉴定及耐药性检测 被引量:2 2017年 伪中间葡萄球菌是一种常见的致病菌,多引起宠物不同程度感染。2016年3月初,吉林省某羊场育肥羊出现零星死亡,病羊主要表现为呼吸系统症状。采集病羊呼吸系统各器官,以进行细菌的分离、培养。分离菌株经培养特性、染色镜检、生化试验及16S r DNA序列分析,确定为伪中间葡萄球菌,其对小鼠有致病性。对分离到的菌株通过微量稀释法进行药物敏感性测定,结果显示,对庆大霉素、链霉素、红霉素、阿莫西林、头孢氨苄、磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星、强力霉素耐药;对阿米卡星、氟苯尼考、环丙沙星敏感。 李雪嵩 董文龙 王羽 张红伟 张喜庆 马红霞 高云航关键词:山羊 MIC