吴保义
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：延边大学农学院更多>>
- 发文基金：吉林省教育厅科研项目国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 新孢子虫NcGRA7基因酵母双杂交诱饵载体的构建与鉴定被引量：1
- 2018年
- 为筛选能与新孢子虫NcGRA7蛋白相互作用的靶蛋白,构建了酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-NcGRA7。应用PCR技术从新孢子虫基因组DNA中扩增出NcGRA7基因,将其克隆至pMD-19T(simple)中,经过酶切鉴定后再连接至酵母双杂交诱饵载体pGBKT7上。结果表明:试验成功获得了NcGRA7基因片段,测序结果中序列无碱基突变,与目标基因序列同源为100%。试验成功构建的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-NcGRA7,为使用酵母双杂交技术筛选与NcGRA7蛋白相互作用的蛋白奠定基础。
- 吴保义陈正鹏李红旺金春梅梁晚枫于龙政
- 关键词：酵母双杂交新孢子虫诱饵载体
- 嗜吞噬细胞无形体病分子生物学诊断方法的研究进展
- 2017年
- 嗜吞噬细胞无形体主要侵染宿主成熟或未成熟的髓系白细胞,是蜱传疾病的病原体。主要感染放牧牛群,舍饲牛群较少发,并有明显的季节性。对全球的养牛业经济造成严重的影响。本文就当前常用的嗜吞噬细胞无形体分子检测方法作一综述。
- 李红旺刘士煌吴保义金春梅于龙政
- 羊泰勒虫PCR检测及进化分析被引量：3
- 2019年
- 为调查吉林省洮南地区羊泰勒虫病的流行情况,在吉林省洮南地区某养殖场随机采集了羊血液样本76份,用PCR和nPCR方法对其进行检测,并将测得序列与GenBank中泰勒虫属和巴贝斯虫属18S rRNA序列进行对比分析。结果表明:洮南地区羊泰勒虫病的PCR阳性率为37%(28/76),nPCR阳性率为33%(25/76),nPCR方法的特异性更高。该试验测得泰勒虫18S rRNA序列与Theileria sp.和Theileria luwenshuni(吕氏泰勒虫)同源性高达99.6%以上,遗传距离为0~0.003,并处于同一进化分支上。该试验结果为洮南地区羊泰勒虫病的防控提供流行病学依据。
- 朱奕霏于龙政吴保义刘士煌金春梅
- 关键词：羊泰勒虫PCR检测进化分析流行病学
- 吉林省龙井市牛东方泰勒虫的流行病学调查
- 2020年
- 牛东方泰勒虫病是由泰勒科、泰勒属的东方泰勒虫寄生在牛的红细胞及淋巴细胞中,从而引起的一种具有传播性的血液原虫病,以高烧、贫血、出血、异常消瘦以及体表淋巴结肿大等症状为主要临床特征。为了掌握牛东方泰勒虫病在吉林省龙井市地区的流行情况,本试验采用血涂片染色镜检与PCR检测相结合的方法对该地域的牛血液样本进行牛东方泰勒虫病的流行病学调查,并利用等位特异型引物对该病进行分型。试验结果表明,龙井地区牛东方泰勒虫PCR检测样本阳性率为32.08%(17/53),C-型的阳性率和I-型的阳性率均为13.21%(7/53),而B-型仅为7.55%(4/53),且存在两种基因型的混合感染,B型和I型混合感染率为1.87%(1/53),B型和C型混合感染率1.87%(1/53)。
- 刘士煌郑添予朱奕霏吴保义张燕金春梅于龙政
- 关键词：PCR基因型流行病学调查
- 利用酵母双杂交技术筛选与新孢子虫NcSRS2蛋白相互作用的宿主蛋白
- 2023年
- 【目的】筛选与鉴定与新孢子虫NcSRS2蛋白相互作用的Vero细胞蛋白。【方法】从Nc1株犬新孢子虫速殖子中提取DNA作为模板,PCR扩增NcSRS2基因,克隆于pGBKT7表达载体,构建诱饵载体pGBKT7-NcSRS2,转化入Y2H酵母感受态细胞,进行自激活活性验证和细胞毒性检测。利用酵母双杂交技术,以转化诱饵载体pGBKT7-NcSRS2的Y2H酵母菌株与Vero细胞cDNA文库进行酵母双杂交,筛选与NcSRS2蛋白相互作用的宿主蛋白,对阳性克隆进行测序,并用BLAST分析,筛选出与NcSRS2存在相互作用的Vero细胞蛋白质。【结果】诱饵载体pGBKT7-NcSRS2无自激活活性和细胞毒性,可用于文库筛选。运用酵母双杂交系统,筛选出2个与NcSRS2相互作用的Vero细胞成分,分别是NADH dehydrogenase subunit 1和STMN2。【结论】本研究首次运用酵母双杂交技术筛选出与新孢子虫NcSRS2相互作用的Vero细胞蛋白质,为进一步研究犬新孢子虫NcSRS2参与黏附及入侵宿主细胞的机制奠定基础。
- 金春梅周博宇姚远吴保义吴保义李红旺于龙政
- 关键词：犬新孢子虫酵母双杂交
