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氮掺杂石墨烯量子点对拟南芥主根生长方向的影响被引量：1: 2022年; 石墨烯量子点(GQDs)在电化学生物传感器、生物成像和生物医学等领域具有巨大的应用潜力,在公众和环境中的暴露程度也越来越高,近年来其生物安全性备受关注。截至目前,有关石墨烯量子点对植物生长发育影响的研究较少。该文从细胞和分子水平探究了氮掺杂石墨烯量子点(N-GQDs)处理对拟南芥(Arabidopsis thaliana)主根生长方向的影响。结果表明,N-GQDs能够被根摄取,并通过维管束运输。50-100 mg·L^(-1) N-GQDs处理可改变主根的生长方向,使其朝着远离培养基的方向发生弯曲。研究发现,N-GQDs处理导致根尖小柱细胞中淀粉粒的积累减少,生长素外排载体PIN3的表达量降低,小柱细胞中的PIN3重新定位到远离培养基一侧的细胞外侧膜(即朝向空气),促进根尖生长素的不对称分布,从而引发主根朝着远离培养基的方向弯曲生长,以避开较高浓度的N-GQDs环境。研究结果为进一步阐明N-GQDs处理改变根生长方向的机制提供了重要线索,同时也为N-GQDs的生物安全性评价提供参考依据。; 叶青闫晓燕陈慧泽冯金林韩榕; 关键词：生长素根生长淀粉粒

拟南芥黏连蛋白RAD21对增强UV-B辐射后细胞分裂的响应被引量：2: 2020年; UV-B辐射对植物的影响体现在多个水平,其会引起植物DNA损伤,造成有丝分裂异常,最终影响植物的生长发育及生理生化过程。RAD21.3是黏连蛋白复合物的一个亚基,参与有丝分裂中染色体的分离。该研究以哥伦比亚生态型拟南芥(Arabidopsis thaliana)和atrad21.3突变体为材料,设置对照(CK)及UV-B处理组,对野生型(WT)、atrad21.3及过表达株系的根长、株高、抽薹时间和生理生化指标进行统计分析。利用碱性品红染色观察拟南芥根尖的有丝分裂现象,并统计畸变率。SPSS分析结果表明,UV-B处理后,WT UV-B和atrad21.3 CK的抽薹时间、株高及各项生理生化指标与WT CK相比无显著差异,但atrad21.3UV-B与之相比差异显著。通过烟草(Nicotianabenthamiana)的瞬时表达和亚细胞定位观察,发现RAD21.3集中在细胞核;进一步观察分裂期细胞发现落后染色体、染色体桥和游离染色体等异常现象。统计结果表明,与WT CK相比,WT UV-B和atrad21.3 CK的畸变率较高,但atrad21.3 UV-B的畸变率更高,表明RAD21.3可能响应UV-B辐射诱导的异常有丝分裂。; 贺芳芳陈慧泽冯金林高琳牛娇韩榕; 关键词：拟南芥 UV-B辐射有丝分裂

活体染色显微技术和绿色荧光蛋白在本科实验教学中的应用被引量：6: 2017年; 激光扫描共聚焦显微镜的原理和使用是本科生细胞生物学实验教学中的重要内容。目前,在细胞生物学实验教学中常使用绿色新鲜的植物叶片作为实验材料,在激光扫描共聚焦显微镜下对叶绿体的自发荧光进行观察。叶绿体的自发荧光信号强而且范围广,使学生难以清晰地理解特异性的荧光信号。该文通过对转p35S::Naa10-GFP基因拟南芥幼苗的根尖进行活体染色[碘化丙啶(propidium iodide,PI)和4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色],在不同的激发光下,收集相应的荧光信号,通过计算机辅助成像,获得不同颜色叠加的特异荧光信号图像。该实验设计简单可行,获得的图像清晰且便于观察,能够使初学者直观并且深刻理解激光扫描共聚焦显微镜的原理和使用方法,适合在高校细胞生物学实验教学中推广,同时也为研究其他蛋白质亚细胞定位提供技术参考。; 冯金林王津韩榕; 关键词：激光扫描共聚焦显微镜绿色荧光蛋白 DAPI

二穗短柄草BdSKIP基因的克隆及功能分析: 2023年; 转录和转录后水平的基因表达调控在植物的生长发育和环境响应中发挥重要作用。在酵母和人细胞中,Ski相互作用蛋白(Ski-interacting protein,SKIP)作为转录调节因子和剪接因子分别在转录和转录后水平调节基因表达。本研究克隆了二穗短柄草BdSKIP基因,生物信息学分析表明,BdSKIP蛋白具有典型的SNW结构域,与普通小麦和大麦的SKIP蛋白同源性最高。将BdSKIP基因转化拟南芥skip-1突变体,结果显示BdSKIP蛋白在维持主根正常生长和抑制拟南芥提前开花方面发挥重要的作用,并且可以在转录和转录后水平调控基因的表达。亚细胞定位结果显示,BdSKIP蛋白定位于细胞核,与调控基因表达的功能相一致。本研究揭示了BdSKIP蛋白的功能,为BdSKIP蛋白的进一步应用提供了基础。; 冯金林席晓宇李卓宣柴建祥; 关键词：二穗短柄草 SKIP 剪接因子转录调节因子

拟南芥N末端乙酰转移酶Naa50参与调控根细胞有丝分裂: 2022年; N末端乙酰转移酶Naa50在调控拟南芥生长发育方面至关重要。为探究Naa50是否通过调控细胞有丝分裂来影响植物生长发育,将naa 50-1突变体与H2B-YFP株系杂交,利用H2B-YFP标示细胞分裂过程中染色体的分离行为。结果表明,与野生型相比,拟南芥naa 50-1突变体根尖分生区细胞有丝分裂指数下降,染色体畸变率明显增加,微核率上升,且处在分裂中期的细胞比例增加。将naa 50-1突变体与CYCB1-CUS株系杂交,检测根细胞中CYCB1蛋白表达,发现naa 50-1突变体中CYCB1蛋白表达量明显增加。PI染色分析表明,naa 50-1突变体根部存在部分死细胞。以上结果表明,在细胞有丝分裂过程中,Naa50促进遗传物质平均分配到两个子细胞中,促进细胞从分裂中期向后期转换;Naa50通过调控细胞分裂进而参与植物生长发育的调控。; 冯金林席晓宇赵世凤; 关键词：拟南芥有丝分裂指数细胞分裂

N末端乙酰转移酶Naa20抑制植物发育时相的转变: 2022年; 蛋白质N末端乙酰化修饰是真核生物中重要的蛋白质修饰类型,该修饰由一系列进化保守的N末端乙酰转移酶催化完成。为了探究N末端乙酰转移酶Naa20在植物发育进程中的作用,对拟南芥Naa20基因的突变体进行表型观察,发现naa20突变体相较于野生型表现出营养生长阶段幼年态向成年态转变的提前,并且开花时间也提前。转基因互补分析表明,naa20突变体发育时相转变提前是由于Naa20基因表达缺失引起的。遗传分析表明,naa20 hst双重突变体表现出与hst单突变体相似的幼年态向成年态转变提前和开花时间提前的表型。酵母双杂交试验表明,Naa20蛋白与Naa25蛋白具有直接的相互作用。以上结果表明,Naa20与Naa25存在于同一个复合体,通过下游调控HST进而抑制植物发育时相的转变,在植物营养生长时期转变和生殖生长转变过程中发挥了重要的作用。; 冯金林姚丽霞秦铭徽; 关键词：拟南芥

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冯金林