舒小闯
- 作品数:5 被引量:10H指数:2
- 供职机构:南京大学医学院临床学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
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- CpG甲基转移酶诱导紧密连接蛋白7和8基因表达下调对人结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响
- 2013年
- 目的探讨CpG甲基转移酶M.SssI对人结肠癌HT-29细胞中紧密连接蛋白7(claudin-7)和claudin-8表达的调节作用,及其对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法以50U/ml的M.SssI处理HT-29细胞24h(过甲基化组),采用重亚硫酸盐测序法检测claudin-7和claudin-8基因启动子区域CpG岛的甲基化状态,实时荧光定量PCR法检测claudin-8和claudin-8mRNA的表达,细胞免疫荧光技术和Westernblot法检测claudin-7和claudin-8蛋白的表达,Hoechst33342荧光染色法和流式细胞术检测HT-29细胞的凋亡,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测HT-29细胞的增殖。同时设对照组(以2山PBS处理HT-29细胞)和5-Azacytidine组(以10I.t,moL/L5-Azaeytidine处理HT-29细胞)。结果过甲基化组claudin-7和claudin-8靶序列中发生甲基化的CpG胞嘧啶数目分别为25和10个,对照组分别为9和5个,5-Azacytidine组分别为0和3个。过甲基化组claudin-7和chudin-8 mRNA和蛋白的表达均明显低于对照组(均P〈0.05),而5-Azacyfidine组ciaudin-7和claudin-8mRNA和蛋白的表达均明显高于对照组(均P〈0.05)。Hoechst33342荧光染色结果显示,对照组和5-Azacytidine组的HT-29细胞均呈均匀蓝色荧光,细胞呈圆形,大小一致,无明显差异;而过甲基化组HT-29细胞呈高度白色荧光的凋亡细胞明显增多。流式细胞术检测结果显示,过甲基化组HT-29细胞的早期凋亡率比对照组增加84.7%(P=0.002)。MTr法检测结果显示,过甲基化组HT-29细胞的生长速度较对照组缓慢(P=0.002),HT-29细胞的增殖抑制率为32.1%;5-Azacytidine组HT-29细胞的增殖水平与对照组相似(P=0.084)。结论CpG甲基转移酶可以通过上调claudin-7和claudin-8基因启动子区的甲基化程度,下调HT-29细胞中claudin-8和elaudin-8mRNA和蛋白的表达,从而诱导细胞产生凋亡,并抑制其增殖。
- 王文辉汪芳裕魏娟沈芸竹刘畅舒小闯
- 关键词:HT-29细胞紧密连接蛋白
- 肠易激综合征患者肠道菌群变化的初步探讨及益生菌治疗随机对照试验的系统评价
- 目的:应用PCR-DGGE(denaturing gradient gel electrophoresis,变性梯度凝胶电泳)技术分析肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)患者肠道菌群变...
- 舒小闯
- 关键词:肠易激综合征肠道菌群
- 文献传递
- 溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜通透性异常的研究及其发病机制的探讨
- 目的:溃疡性结肠炎(UC)的发病机制尚未阐明,目前的研究表明肠黏膜屏障受损、肠道通透性增加是UC发生发展中的关键环节。之前的研究主要是通过测定蔗糖、乳果糖、甘露醇来评估UC患者胃十二指肠及小肠通透性,而UC患者病变最重要...
- 周淑萍路又可刘炯舒小闯汪芳裕
- 文献传递
- 肠易激综合征与肠道细菌关系的研究进展被引量:7
- 2011年
- 肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是一种复杂的多因素功能性疾病,其病因和发病机制尚未明确.肠道共生菌与宿主和平共处,互惠互利,这种关系破坏直接或间接参与宿主多种疾病的发生与发展.近年来,随着微生态学的发展,肠道菌群与IBS发病的关系日益受到关注.大量研究显示,肠道细菌与IBS关系密切.本文主要就IBS时肠道菌群的变化及肠道细菌参与IBS发病的可能机制予以综述.
- 舒小闯王少东汪芳裕
- 关键词:肠易激综合征肠道细菌微生态失调
- 益生菌治疗肠易激综合征随机对照试验的系统评价被引量:4
- 2012年
- 目的系统评价益生菌治疗肠易激综合征(IBS)的疗效。方法计算机检索PubMed、CochraneLibrary、Web of Sicence、EMbase、MD Consult、CNKI、CBM、WanFang Data中关于益生菌与安慰剂对照治疗IBS的随机对照试验。文献检索时限均从建库至2011年6月。由两名研究者按照Cochrane系统评价员手册5.0.1标准独立评价文献质量、提取资料并交叉核对后,使用RevMan 5.1软件进行Meta分析。结果共纳入20个随机对照试验,1 713例患者。Meta分析结果显示:益生菌与安慰剂相比,在改善IBS总体症状、腹痛/腹部不适、腹胀方面,两组差异均有统计学意义。结论现有证据表明,益生菌对改善IBS症状有一定疗效。但由于纳入研究的方法学质量及各研究间诊断标准、评价方法、剂量、疗程等诸多方面存在差异,上述结论还需更多设计严格的高质量RCT进一步证实。
- 舒小闯周淑萍陈春燕王少东汪芳裕
- 关键词:益生菌肠易激综合征META分析随机对照试验