张洋洋
- 作品数：6 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 利用CRISPR-Cas9技术敲除MAS1基因的质粒构建与酶切方案优化的研究
- 2019年
- CRISPR-CAS9技术是新一代基因编辑技术,可简便快捷地对哺乳动物细胞进行指定基因的敲除,实现沉默外源基因表达的目的。但传统的CRISPR-CAS9技术提供的酶切方案没有特异性,致使酶切效率不稳定,影响胶回收率以及后续实验。本实验通过改变酶切体系大小,以及酶切反应时间,继而通过胶回收率及测序检测的方法验证最佳酶切条件,最后通过荧光定量PCR和Western blotting实验检测目的基因的表达量,确认是否成功敲除目的基因。研究结果说明:BbsⅠ酶与px459质粒比值为1μL:500 ng,酶切体系为50μL,酶切时间为45 min时,酶切效果最佳、胶回收率最高,且此时目的基因在细胞内的表达量为0,确定该实验条件下目的基因被成功敲除。
- 孙芳廖维芳廖维芳赵瑞强张洋洋廖志红赵瑞强
- 急性髓系白血病患者外周血白细胞长链基因间非编码RNA324(LINC00324)与免疫表型的相关性分析
- 2019年
- 目的分析急性髓系白血病(AML)患者外周血白细胞长链基因间非编码RNA324(LINC00324)与免疫表型的关系。方法用实时荧光定量PCR和生物信息学数据库分析AML患者外周血白细胞及KG-1、THP-1、U937细胞株中UNC00324的表达水平,并采用Peraon相关分析40例AML患者LINC00324的表达水平与红细胞及血小板计数及LINC00324与免疫表型CD14、CD68、CD64、CDllb、CD4、CD45、CD33、人类白细胞抗原DR(HLA-DR)、CD163、CD2、CD58、CD117、CD43、CD34、CD99、CD8、CD38、CD10、CD13、CD56、CD7、TdT、CD235a、CD138、CD61、髓过氧化物酶(MPO)、CD19的关系。同时选取cBioPortal数据库的数据集(TCGA,NEJM 2013)分析173名AML患者的临床病例数据,分析患者肿瘤样本中LINC00324的表达水平与外周血幼稚细胞百分比及白细胞计数的相关性。结果AML患者外周血白细胞LINC00324表达下调,其表达水平与免疫表型CD33、红细胞及血小板数显著正相关。生物信息学数据库分析显示LINC00324在髓系白血病细胞株中低表达,AML患者中LINC00324表达与CD33、CD117、CDllb、CD14、CD64等多种免疫表型相关,与外周血幼稚细胞百分比及白细胞计数呈负相关。结论UNC00324可能参与调控免疫细胞的分化发育及功能,为AML靶向药物开发或治疗提供新策略。
- 刘奕张洋洋谢佳莹鲍卫谢彬彬周吉成曾祺燕
- 关键词：免疫表型
- 急性髓系白血病患者LINC00324表达水平与染色体核型及预后的关系
- 2021年
- 长链非编码RNA LINC00324在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)发生发展中的作用尚不明确。为探讨AML患者LINC00324表达水平与染色体核型及预后的关系,首先采用实时荧光定量PCR法检测46例AML患者LINC00324的表达水平,并分析其与染色体核型及基因变化的关系;其次利用cBioPortal数据库分析173名AML患者LINC00324水平与各临床指标的关系。实验结果显示,AML患者LINC00324的表达水平明显降低(P<0.001),尤其在预后不良组显著下调(P<0.05);利用cBioPortal数据库分析也表明LINC00324水平在预后中等组和预后不良组中均显著下调(P<0.01),且预后不良组LINC00324水平更低(P<0.05)。在预后不良组中,单体核型患者LINC00324表达水平比非单体核型患者明显降低(P<0.05)。此外,LINC00324表达水平在FLT3-ITD阳性患者、M0、M1、M2型患者中明显下调(P<0.05);LINC00324水平与WT1表达量、C-KIT表达量和骨髓原始细胞数目均呈显著负相关(P<0.001)。LINC00324可能参与AML的发生和发展,有望作为AML患者预后评估的潜在指标。
- 谢佳莹周吉成蓝玥张洋洋刘芳尘刘奕鲍卫曾麒燕
- 关键词：急性髓系白血病长链非编码RNA染色体核型预后
- 红桂木凝集素对肿瘤细胞增殖的影响被引量：1
- 2017年
- 本实验旨在研究红桂木凝集素(Artocarpus lingnanensis lectin,ALL)对人鼻咽鳞癌细胞株CNE1和肝腹水腺癌细胞株SK-Hep-1增殖的影响。利用亲和层析纯化红桂木凝集素;不同浓度ALL处理CNE1和SK-Hep-1细胞48 h后,倒置显微镜观察ALL对CNE1和SK-Hep-1细胞形态的影响,CCK8法检测不同浓度ALL对CNE1和SK-Hep-1增殖的影响。经纯化的红桂木凝集素,凝集红细胞活力为:29~211。倒置显微镜观察发现,随着ALL浓度的增加,细胞形态变小且皱缩,透光性差,出现细胞碎片。CCK8法表明,低剂量ALL对细胞无抑制作用,高剂量ALL明显抑制CNE1和SK-Hep-1细胞的增殖,呈剂量-浓度依赖关系。由此得出高浓度ALL能抑制鼻咽癌细胞株CNE1,肝癌细胞株SK-Hep-1的增殖的结论。
- 刘芳尘尹利君张洋洋言畅魏永钧曾麒燕
- 关键词：分离纯化鼻咽鳞癌细胞增殖
- Lnc01089在肝癌细胞中的表达分析被引量：1
- 2018年
- 为探讨Lnc01089与肝癌细胞侵袭的关系,本研究分析了Lnc01089在肝癌细胞株和肝癌组织中的表达情况。从肝癌细胞株HepG2、Huh7、SMMC-7721和15例成对的肝癌组织及其癌旁组织中提取总的RNA,经逆转录得到cDNA,通过qRT-PCR实验,分析Lnc01089在肝癌组织和这三种肝癌细胞株中的表达水平。结果发现Huh7、SMMC-7721中Lnc01089的表达量明显低于HepG2;肝癌组织中Lnc01089的平均表达量也明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义（p〈0.05）。结果提示Lnc01089表达水平的降低与肝细胞的恶性程度有关。因此Lnc01089可能与肝癌的发生、发展有密切联系,有望为肝癌治疗提供新的靶点。
- 张洋洋吕智略孙芳周素芳曾麒燕
- 关键词：长链非编码RNA肝癌QRT-PCR
- Linc00324在乳腺癌中的表达及其过表达对MDA--MB--231细胞影响的体外研究
- 目的:本文旨在分析linc00324在乳腺癌组织中的表达水平及其与临床病理指标之间的相关性，并研究linc00324对乳腺癌细胞生物学行为的影响，以期为乳腺癌的诊断治疗提供实验依据。 方法:一、借助TCGA数据库和GE...
- 张洋洋
- 关键词：乳腺癌
- 文献传递
